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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
423
- 英文名:
Oligo(dT) Recharger
- 保质期:
一年
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
常温
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京Oligo(dT)再生溶液优惠促销的品牌:百奥莱博,是优质的RNA纯化产品,用于科研目的生化试验项目,本产品质量好,且极具价格优势,深为用户称道,了解更多Oligo(dT)再生溶液等RNA纯化产品请联*(代"系")我司咨询订购。
名称:北京Oligo(dT)再生溶液优惠促销
英文名:Oligo(dT) Recharger
规格:250mL
品牌:百奥莱博
产地:国产|进口
编号:BTN130976
本产品是针对Oligo(dT)纤维素再生的溶液,可有效去除亲和基质中的残留RNA和其他杂质,恢复Oligo(dT)纤维素基质的结合能力。
储存条件:常温运输和保存、避光。有效期一年。
更多有关北京Oligo(dT)再生溶液优惠促销的价格及使用说明等,请联*(代"系")我们的业务经理王欣女士咨询,我公司还销*(代"售")以下产品:
·核糖核酸酶HII
编号:BTN130675
英文名称:RNase HII
规格:250U
核糖核酸酶HII(RNase HII)为核糖核酸内切酶,适用于在双链DNA内部切刻核糖核酸的5´末端,产生5´磷酸和3´羟基末端。RNase HII还可以在冈崎片段的RNA 部分进行多处切割。其反应示意图如下:

产品特点:
➤ 重组酶
➤ 除去杂交到poly(dT)上的mRNA poly(A)
➤在cDNA第二链合成时除去mRNA
➤ 无核酸内切酶、核酸外切酶和RNase污染。
产品组成:
| 成分 | 规格 |
| RNase HII(5000U/mL) | 12.5μL |
| 10×Buffer | 1ml |
| 使用手册 | 1份 |
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
活性定义:1单位指1×反应体系中,37℃条件下,30分钟产生与切刻100pmol人工合成双链RNA底物相同的荧光信号所需的酶量。该合成双链底物在荧光探针/淬火对的淬火域附近含有单个核糖核苷。
北京Oligo(dT)再生溶液优惠促销关键词:Oligo(dT) Recharger,Oligo(dT)再生溶液,BTN130976
·SuperTOPO-Kan平末端克隆试剂盒
编号:BTN160684-25K
英文名称:SuperTOPO Blunt Cloning Kit
规格:25次
本试剂盒是基于Topoisomerase能够在几秒钟之内高速连接DNA片段的原理开发的无背景克隆试剂盒,它使用了本公司通过定点突变改良的TOPO酶,连接效率比野生型更高。
产品特点:
1.高效快速,连接反应几乎在几秒钟内完成,连接率几乎达到100%。
2.适用于pfu、KOD等高保真聚合酶扩增的平末端片段的克隆。
3. 无杂带或引物二聚体的PCR扩增产物可以不经过纯化直接用于连接反应。
4. 零背景,无需IPTG-X-Gal蓝白斑筛选,故不需要IPTG-X-Gal培养基。
5. 本试剂盒按10μL标准反应体系,有25次和50次两种规格包装供选择。
6. 提供含Amp和Kan两种抗性的载体供选择(BTN160684-25A是含Amp抗性TOPO载体,BTN160684-25K是含Kan抗性TOPO载体)。
试剂盒组成:
| 成分 | 规格 |
| SuperTOPO-Amp Blunt载体 | 25μl(BTN160684-25A) |
| SuperTOPO-Kan Blunt载体 | 25μl(BTN160684-25K) |
| 连接缓冲液 | 25μl |
| M13F引物 | 50μl |
| M13R引物 | 50μl |
| 超纯水 | 1ml |
| 说明书 | 1份 |
注意:BTN160684-25A提供SuperTOPO-Amp Blunt载体,BTN160684-25K提供SuperTOPO-Kan Blunt载体。
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
使用方法:
1. 如果是PCR 制备插入片段,所用引物不能磷酸化,使用pfu、KOD等产生平末端片段的高保真DNA聚合酶。为保证扩增产物的完整性,PCR循环结束后,再延伸5-10分钟,确保片段延伸完全。
2.电泳检测并相对定量PCR片段(跟DNA marker 比较)。根据插入片段长度和下表确定每次连接反应需要的最佳用量:
| 插入片段长度 | 最佳用量 |
| 100-1000bp | 20-50 ng |
| 1000-2000bp | 50-100 ng |
| 2000-5000bp | 100-200 ng |
3.在一个干净的塑料离心管中,室温下(不要放在冰上)设置如下连接反应体系:
| 成分 | 用量 |
| 纯化后的PCR产物 | 不超过8μl(详见注意事项) |
| SuperTOPO-Amp Blunt载体或 SuperTOPO-Kan Blunt载体 |
1μl |
| 连接缓冲液 | 1μl |
| 超纯水 | 补到10μL |
注意:如果使用未经纯化的PCR产物,则需要加入量不能超过1μL,否则PCR 体系会干扰连接体系。
4. 轻柔吹打混匀后,短暂离心,常温(20-30℃)放置0-5分钟。如果在冬天室温低于20℃,建议使用25℃水浴或金属浴。注意:连接时间超过5分钟的话连接效率会降低。
5. 如果当天不转化,可以将离心管放-20℃保存。如果转化,则取5μL连接液加到50-100μL 刚刚融化的感受态细胞中,轻柔混匀。注意:本产品要求感受态细胞的转化效率不得低于5×10E7cfu/ug。
6. 如果片段长度小于2Kb,则不需要冰浴和热激,直接在离心管中加入500μL 不含抗菌素的SOC或LB培养基,然后取200μL涂盘。也可以先3000g离心2分钟后,弃掉大部分上清,只留约100μl左右,然后重悬细菌后全部涂盘在含Amp(对SuperTOPO-Amp)或Kan(对SuperTOPO-Kan)的培养皿上,37℃过夜培养。
7. 如果片段长度长于2Kb,则按常规转化方式,先冰浴2-30分钟,然后42℃热激30秒,冰上防放置2分钟,再在离心管中加入500μl 不含抗菌素的SOC或LB培养基,37℃ 250rpm培养60分钟,然后取200μL 涂盘。也可以先3000g离心2分钟后,弃掉大部分上清,只留约100μL左右,然后重悬细菌后全部涂盘在含Amp(对SuperTOPO-AmpBlunt载体)或Kan(对SuperTOPO-Kan Blunt载体)的培养皿上,37℃过夜培养。
8. 用M13F/M13R通用引物进行菌落PCR或直接测序来鉴定重组子。
北京Oligo(dT)再生溶液优惠促销关键词:Oligo(dT) Recharger,Oligo(dT)再生溶液,BTN130976
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9032-75-1 PectolyaseY-23 果胶酶Y-23
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肝素*溶液(0.5%,62.5KU,无菌) 10ml|10×10ml
丹磺酰* L-Isoleucinol 605-65-2
钼酸* 2′-BrdU 10102-40-6
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文献和实验Synthesis of Radiolabeled, Subtracted cDNA Probes Using Oligo(dT) as a Primer
2. To the chilled microfuge tube, add: 0.1 M dithiothreitol 2.5 μl placental RNase inhibitor 200 units oligo(dT)12-18 10 μl 10x reverse transcriptase buffer 25 μl 20 mM solution of dGTP, dATP, and dTTP 10 μl 125 μM dCTP 10 μl 10 mCi/ml
与rRNA,5SRNA,5.8SRNA和tRNA相比,大多数真核生物的mRNA在其3’端带有poly(A)尾巴,因此mRNA能用oligo(dT)-纤维素亲和层析法从细胞总RNA中分离。本文中介绍的方法是利用带有poly(A)尾巴的mRNA能与连在纤维素介质上的短链oligo(dT)形成稳定的RNA-DNA杂合链的原理。poly(A)+RNA能用oligo(dT)层析柱选择洗脱,也能分批洗脱,即批量层析的方法。详情请查看下列pdf文件:“oligo(dT)-纤维素层析法提取po
Selection of Poly(A)+ RNA by Oligo(dT)-Cellulose Chromatography Joseph Sambrook Peter Maccallum Cancer Institute and The University of Melbourne, Australia David W
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