北京AEBSF溶液(10mg/mL)优惠促销

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

百奥莱博专业生产销*(代"售")北京AEBSF溶液(10mg/mL)优惠促销，我公司供应的分子生物学试剂品类齐全，且具有优势价格，欢迎新老客户垂询订购。

名称：北京AEBSF溶液(10mg/mL)优惠促销
规格：5mL
品牌：百奥莱博
产地：国产|进口
英文名：AEBSF Solution
本产品为浓度是10mg/mL的AEBSF水溶液，工作浓度为0.1-1.0mg/mL。4-(2-*乙基)*磺酰*盐*(代"酸")盐(4-(2-Aminoethyl)benzenesulfonyl fluoride hydrochloride，Pefabloc SC)，分子量是239.5，溶于水，无毒，在低pH条件下，比PMSF更稳定。它是一种水溶性的不可逆的丝*酸蛋白酶，可以抑制胰凝乳蛋白酶，激肽释放酶，血纤维蛋白溶酶，凝血酶和胰蛋白酶。


储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期3个月。

更多有关北京AEBSF溶液(10mg/mL)优惠促销的价格及使用说明等，请联*(代"系")我们的业务经理王欣女士咨询，我公司还销*(代"售")以下产品：

·包涵体蛋白溶解及复性套装
编号：BTN100302
英文名称：Inclusion Body Protein Solubilization & Refolding Pack
规格：100次
本产品用E.coli作为宿主表达得到的重组蛋白往往会形成包涵体，其中的重组蛋白质只完成部分折叠，还没形成最后的正确空间结构，所以没有生物活性，要得到有活性的重组蛋白，还需要后续的溶解和复性(重折叠)处理。目前最常用的溶解包涵体的方法是用尿素，Sarkosyl，盐*(代"酸")胍等强变性剂，其缺点是包涵体中的重组蛋白质被彻底变性，使后续的蛋白质复性处理效率降低。本产品根据包涵体中的重组蛋白质已经完成了部分折叠这一实事设计。

产品特点：
1.一站式，提供包涵体洗涤、溶解和蛋白质复性的所有试剂。
2. 采用温和法溶解包涵体，释放的包涵体蛋白质不彻底变性，还能保持其部分折叠的结构，使后续的复性处理效率提高。
3. 所用复性液基于稀释复性，经过精心优化，有利于大部分蛋白的复性。
4.还提供五种不同的添加剂，它们可以单独加入复性液，也可以按一定比例进行自由组合，以适应不同的蛋白质折叠需求。
5. 本试剂盒提供实惠的小规格，用于做预实验用，用户如果选择到合适的溶液组合后，可以单独购买其中的溶液以用于大量制备。
6. 本试剂盒足够100次小规模(1mL规模)的蛋白质复性实验。

试剂盒组成：

 

成分	规格
包涵体洗涤液	250mL
包涵体温和溶解液(10种各一套)	10×10ml
包涵体蛋白质复性液	250ml
说明书	1份

储存条件：常温运输和保存，有效期一年。

自备试剂：去离子水、BCA蛋白浓度测定试剂盒、0.22μm注射器式滤膜。

使用方法：

一、洗涤包涵体
 说明：用常规方法得到的包涵体常常含有去污剂和细胞碎片，因此需要经过充分的洗涤才能用于本实验。
1．将10mg包涵体沉淀溶解在5mL包涵体洗涤液中，超声波处理8次或充分吹打混匀。可以适当留取10-30μL作为SDS-PAGE电泳样品待用。
2．4℃ 12000rpm离心20分钟后弃上清。
3．重复上面的洗涤步骤3次，每次留取10-30μL作为SDS-PAGE电泳样品待用。
4．将包涵体沉淀溶解在1mL包涵体洗涤液中，超声波处理8次或充分吹打混匀。
5．检查包涵体的纯度：将上步得到的包涵体溶液和前几步得到的预留样品一起用于SDS-PAGE电泳，检查每次洗涤去除杂带的情况。
6．检查包涵体的浓度：用自备的BCA蛋白检测试剂盒测试第4步得到的包涵体溶液的蛋白质浓度。
7．将第4步得到的包涵体溶液的蛋白质浓度调到5-10mg/mL(如果低于此范围，则离心后用适量的洗涤液再溶解；如果高于此范围，则用洗涤液稀释)，然后均分到10个1.5mL塑料离心管中，每管100μl。
8．4℃ 12000rpm离心20分钟后弃上清。
9．所得沉淀即纯化的待用的包涵体。

二、确定溶解包涵体的最佳条件
1．标记上步得到的10个离心管，并分别加入10种包涵体温和溶解液，每种1mL。注意：准确记录它们的对应关系。
2．充分振荡后，室温放置30分钟。
3．450nm检测浑浊度并记录下数据。
4．4℃ 12000rpm离心10分钟后收集上清，此即包涵体溶解液。
5．用0.22μm注射器式滤膜过滤包涵体溶解液。
6．280nm检测包涵体溶解液的光吸收。
7．溶解液溶解包涵体能力跟包涵体溶液浊度跟成反比，跟包涵体溶解液中OD280数值成正比。根据上面的数据即可确定哪种溶解液对实验中所用包涵体具有最佳溶解能力，并将在此溶解液中溶解的包涵体溶解液用于下面的复性实验。大量处理需要从本公司单独大量订购包涵体温和型溶解液10种中的1种。

三、包涵体蛋白的复性
1．在2.5mL 4℃预冷的、处于轻柔搅拌中的复性缓冲液中，逐滴加入上步得到的包涵体溶解液。
2．待所有包涵体溶解液都加完后，将包涵体蛋白复性溶液用孔径为0.22μm注射器式滤膜过滤，除去包涵体(直径一般在0.5-0.8μm)和大的聚合物。
3．将得到的溶液用于活性检测或离子交换柱层析和分子筛层析。


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·超级杂交液(原位杂交)
编号：BTN130906
英文名称：Super hybrid solution(In situ hybridization)
规格：10mL
本产品为我司开发的即用型原位杂交专用核酸杂交液。既可以用于RNA原位杂交、DNA原位杂交，也可以用于FISH原位杂交等试验。

原位杂交是在一定生物结构基础之上的核酸杂交。这种结构基础可以是一条染色体；一个细菌；更大结构基础是细胞和组织。基本原理是两条核苷酸单链片段，在适宜的条件下，通过*键结合，形成DNA-DNA、DNA-RNA或RNA-RNA 双键分子，应用带有标记的(有放射性同位素，如3H、35S、32P、荧光素生物素、地高*(代"辛")等非放射性物质)DNA或RNA片段作为核酸探针，与组织切片或细胞内待测核酸(RNA或DNA)片段进行杂交，然后可用放射自显影等方法予以显示，在光镜或电镜下观察目的mRNA或DNA的存在并定位；用原位杂交技术，可在原位研究细胞合成某种多肽或蛋白质的基因表达。此方法有很高的敏感性和特异性，可进一步从分子水平来探讨细胞的功能表达及其调节机制。已成为当今细胞生物学、分子生物学研究的重要手段。

储存条件：低温运输和-20℃保存、有效期一年。

使用方法：(以检测mRNA序列为例)

培养细胞和冰冻切片
1. 玻片的处理：一般采用多聚赖*酸或APES。切片厚度10-20μm。
2.细胞在多聚赖*酸处理的盖玻片上进行培养，条件为37℃和5%的CO2，所用培养基为DμLbecco基础培养基。细胞长好后0.1M PBS(PH7.4)洗2分钟×3次。
3.培养细胞和冰冻切片均可用下述方法固定：固定液为4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6)，含有1/1000 DEPC。室温固定 20--30分钟。蒸馏水充分洗涤，干燥后-20℃冰冻可保存2周以上。
4. 30%H2O2 1份+纯甲醇50份混合，室温处理30分钟。蒸馏水洗涤3次。
5. 暴露mRNA核酸片段：切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3% 柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶，混匀)，37℃或室温消化5—120秒钟。有时也可以不消化。原位杂交用PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。
6.后固定：胃蛋白酶消化后才需要。固定液为1%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6)，含有1/1000 DEPC。室温固定10分钟。蒸馏水洗涤3次。
7.预杂交：湿盒的准备——干的杂交盒底部加20%甘油20ml以保持湿度。按每张切片加20μL预杂交液(提前加入鲑鱼精DNA，终浓度为100μg/ml)。恒温箱38-42℃2—4小时。吸取多余液体，不洗。
 注：靶DNA的变性，DNA-DNA杂交检测中，在杂交前需要增加靶DNA的变性步骤(对mRNA的原位杂交无需此步)。样品DNA的变性可能会造成样品形态学的部分破坏，此步是实验中需要优化的一个步骤。实验时可以摸索变性时间、变性温度等参数以获得最佳条件。可以将探针的变性和样品DNA变性同步进行：将样品和探针溶液加盖盖玻片，置于烘箱80℃变性 ，处理5-10 min，后冷却至37℃进行杂交。
8.杂交——按每张切片20μL杂交液(探针浓度约为1ng/μL；杂交液提前加入鲑鱼精DNA，终浓度为100μg/ml)，加在切片上。将原位杂交专用盖玻片的保护膜揭开后，盖在切片上。恒温箱38-42℃杂交过夜(根据杂交情况可以调节)。
9.杂交后洗涤：揭掉盖玻片，37℃左右水温的2×SSC洗涤5分钟×2次；37℃ 0.5×SSC洗涤15分钟×1次; 37℃ 0.2×SSC洗涤15分钟×1次(如果有非特异性染色，重复0.2×SSC洗涤15分钟×1-2次)。
10.滴加封闭液：37℃ 30分钟。甩去多余液体，不洗。
11. 根据探针标记物，选择相应显色方法显色、复染，脱水、封片。
12. 结果观察。

石蜡切片
 如果有条件的话，应尽可能地采用新鲜标本。标本离体后，及时予以固定。固定液为4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.0-7.6)，含有1/1000 DEPC。标本较大时用刀片切成厚度不超过4mm的小块，固定1小时即可，较大的标本固定不要超过2小时。某些组织对过度固定尤其敏感，如动物大脑，固定时间30-40分钟，一般不要超过1小时。
1．常规脱水、浸蜡、包埋。切片厚度6-8μm。
2．玻片的处理：一般采用多聚赖*酸或APES。
3．石蜡切片经常规脱蜡至水。30%H2O2 1份+蒸馏水10份混合,室温5-10分钟以灭活内源性酶。蒸馏水洗3次。
4．暴露mRNA核酸片段：切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3%柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶，混匀)，37℃或室温消化3--30分钟(视标本新旧、厚薄自行调整)。用户可以比较不同的消化时间，例如5分钟,10分钟，20分钟，30分钟。以找到最佳的消化时间。原位杂交用PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。
5.其余步骤和冰冻切片6-11步相同。
6. 结果观察。


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ARB14134 甘薯脉花叶病毒(SPVMV)含量分析 
ARB10570 人协同刺激分子受体(CMR)ELISA代测服务 Human costimulatory molecules recptor,cmr ELISA KIT
21901-41-7 1-奈胺
ARB14041 植物磷脂酰甘油(PG)Elisa方法检测 Plant phosphatidylglycerol,pg ELISA KIT
1609-47-8 DEPC   焦碳酸二乙酯
胭脂红 Aspartame 1390-65-4
ARB11983 大鼠FMS样酪*酸激酶3配体(Flt3L)Elisa分析 Rat fms-like tyrosine kinase 3 ligand,flt-3l ELISA KIT
辛二酸 Fmoc-Thr-OH 505-48-6
F030103 HRP标记小鼠抗乙肝表面抗原抗体 Monoclonal Mouse Anti-HBsAg*HRP
蛋白酶K溶液(Proteinase K,20mg/ml)   1ml|5ml
(3a,5b,12a)-N,N-双[3-(D-葡萄糖酰*基)丙基]-3,12-二羟基胆甾烷-24-胺 Quinine hemisulfate salt monohydrate 86303-23-3
BTN130662 Tth RecA蛋白 Tth RecA
ARB13933 猪组织因子(TF)Elisa定量检测 Porcine tissue factor,tf ELISA KIT
ARB12703 大鼠糖原磷酸化酶同工酶BB(GP-BB)elisa检测 Rat glycogen phosphorylase bb,gp-bb ELISA KIT
3-甲基吲哚 Protein A–Agarose 83-34-1
BL1185 EB染色液
ARB10242 人乙型肝炎表面抗原(HBsAg)Elisa方法检测 Human hepatitis b virus surface antigen,hbsag ELISA KIT
十八烷基三甲基*化铵 4-Nitrophenyl-N-acetyl-α-D-glucopyranoside 1120-02-1
SJ0572 TMB-2HCL   四甲基联*(代"*")*(代"胺")二盐*(代"酸")
HC0063 PCR管(离心管)
无菌双蒸水   100ml|500ml
F010105 小鼠抗HIV(P24)抗体 Monoclonal Mouse Anti-HiV(P24)

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