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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
988
- 英文名:
FFPE Total Protein Extraction Kit
- 保质期:
长期
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
常温
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产销*(代"售")石蜡包埋组织蛋白提取试剂盒销*(代"售"),我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:石蜡包埋组织蛋白提取试剂盒销*(代"售")
产地:国产|进口
英文名:FFPE Total Protein Extraction Kit
规格:50次
品牌:百奥莱博
石蜡包埋组织是很重要的临床材料,研究其正常细胞和疾病相关的细胞,特别是癌细胞中标记蛋白的差异表达水平,对于判断癌化的进展,癌症的类型的判定,以方便于诊断和治疗有重要的意义,然而体外培养的细胞的蛋白差异表达水平并不能够真实反映体内细胞的真实状况,因此从石蜡包埋组织中提取蛋白并且加以研究有很重要的意义,本试剂盒通过特殊的快速脱蜡试剂和蛋白质抽提试剂,在两种不同的温度条件下温育,可以将被铰链的蛋白质释放出来,经过简单的离心步骤,上清中含有的蛋白经过沉淀洗涤和溶解后,可以用于Western Blot 、SDS-PAGE、ELISA、2D电泳或蛋白质芯片分析等,本试剂盒可以使用50次左右。
产品特点:
1. 不含有去污试剂,适用于非染色的标本。
2.可以适用于甲醛浸泡的组织标本。
3. 不需要超速离心,可以同时处理多个标本。
试剂盒组成:
| 成份 | 规格 |
| 预处理试剂A | 100mL |
| 预处理试剂B | 5mL |
| 提取试剂 | 5mL |
| 沉淀试剂 | 75mL |
| DTT干粉 | 80mg |
| 使用手册 | 1份 |
储存条件:常温下运输和保存,但DTT和提取试剂需要4℃保存,盛装预处理试剂A的瓶子已经密封,请在使用后,将剩余的预处理试剂A倒入一个有内盖的瓶中,同时盖紧内外盖,以防止挥发。盛装预处理试剂A,B和沉淀试剂的瓶盖要盖紧,同时避免火源。
使用方法:
1. 取两块大约10-15μm厚,100mm2石蜡包埋组织切片到1.5mL的干净离心管中,加入1mL预处理试剂A,高速涡悬震荡30 sec,室温静置5 min,期间偶尔颠倒离心管数次。
2. 加入100μL预处理试剂B,涡悬震荡10sec,再10000rpm(10000g)离心2min,移去上下两层的液体。
3. 用500μL的超纯水清洗脱蜡的组织两次,离心并尽量吸去液体,保留组织块沉淀。
4. 加入100μL提取试剂(用前需要将DTT全部加入到装提取试剂的瓶中,摇晃混匀,未用完的提取试剂需要4℃放置),盖上盖子,涡悬震荡数秒。
5.在水浴锅中100℃加热20 min,短暂离心一下,再用组织研磨棒将切片组织磨碎。
6.在水浴锅中60℃加热2 hour,期间大约每20 min取出,震荡一次。
7. 4℃,12000rpm(12830 g)离心15 min,小心将上清转移到一个新的1.5mL的干净离心管中。注意:在上清中的蛋白质可以在4℃的环境条件下保存一个星期,如果需要长期保存,请放置在-20℃的环境中,同时避免 反复冻溶,也可以使用我公司生产的非干扰型蛋白浓度测定试剂盒对上清中的蛋白质直接定量。
8. 加入1mL的沉淀试剂,涡悬震荡10 sec,在4℃的环境中保持10 min。
9. 4℃,12000rpm离心15 min,去除上清,保留沉淀。
10. 加入0.5mL的沉淀试剂,涡悬震荡10 sec,在4℃的环境中保持10 min,再4℃,12000rpm离心15 min,去除上清,保留沉淀,在通风橱中将试管倒置在滤纸上,让残余的液体挥发干净。
11. 将固体沉淀溶解于合适的自备的缓冲液中,再4℃,12000rpm离心5 min,收集上清,用于SDS-PAGE,Western blot等实验。注意:此上清中含有DNA,RNA 残留,所以溶液有些发粘,加入少量的micrococcal nuclease,benzonase等消化,有助于减少粘性,但是即使不处理一般不会影响后续实验,用枪头将沉淀捣碎。建议使用含有Thiourea ,Urea,NDSB-201或其它强溶解能力的去污试剂的缓冲液有利于沉淀的完全溶解。
注意事项:
1. 为提高石蜡包埋组织中蛋白质的回收效率,必须尽量减少在切片制作过程中甲醛固定时间,同时在石蜡包埋前彻底脱水,甲醛固定的时间越长,蛋白质的提取回收效率越低。
2. 尽量取用从石蜡包埋组织块中切取的薄片,或没有封闭到载玻片上的没有经过苏木精等染色的切片。
3. 材料越新鲜或甲醛固定时间越短,蛋白质的回收效率越高。
4. 提取试剂中含有含有刺激性的化合物,操作时要戴好乳胶手套,避免沾染皮肤、眼睛和衣服,防止吸入口鼻,沾染皮肤 眼睛后,立即用清水或生理盐水冲洗,必要时寻求医生的帮助。
5. 对于甲醛浸泡的组织样本,每次可以取5-10mg的组织样本,用双蒸水洗涤离心收集后后,直接从步骤4开始操作。
6. 提取的蛋白沉淀如果用于ELISA、RIA等免疫实验,可能需要先进行抗原修复程序,但是如果用Western Blot或Dot blot实验,一般情况下没有必要。
7. 本试剂盒只能够用于体外实验,不能够用于临床、治疗和动物体内实验等,由此产生的后果概不承担责任。
关于石蜡包埋组织蛋白提取试剂盒销*(代"售")的更详细说明,请致电我公司咨询,我们将以最饱满的热情为您提供解答,此外,我公司专业供应下列产品:
·内毒素清除试剂盒
编号:BTN160692
英文名称:Endotoxin removing Kit
规格:1.5mL
本试剂盒使用的是一类高效内毒素清除树脂,它以修饰过的多粘菌素B(PMB)为配体,进行特异性的内毒素清除。经此专用亲和介质纯化,样品最终的内毒素水平可低于0.1 EU/mL。
细菌内毒素(脂多糖,LPS)是革兰氏阴性细菌细胞壁的主要成分。人们在研究革兰氏阴性菌血症和内毒素血症的过程中,发现细菌内毒素在其中起着关键的作用,内毒素使机体免疫功能严重受损,进一步的发展可能引发脓毒性休克,弥散性血管内凝血,急性呼吸窘迫综合症,全身炎症反应综合症或致命性多器官功能衰竭。因此,内毒素的清除对于人类疾病治疗的注射型药品、生物制品等都是必须的,尤其对于基因药物、蛋白药物、单抗克隆药物、治疗性疫苗、小分子化学药物等生物制品的下游纯化处理来说就显得非常重要。
试剂盒特点:
1.高稳定性,高去除效率。
2.高结合力:> 2000,000 EU/mL。
3. pH范围为5-10时,亲和介质对内毒素的清除率在92%以上;pH值在7-8时,清除效率最高。
4. 无需恒流泵即可调节流速。
5. 重复使用 5次不会改变柱子效果。
6. 使用方便,试剂盒中提供无热原缓冲液,无热原收集管及无热原枪头等。
7.适合纯化对象为蛋白,多肽,抗体,多糖等。
8.可耐受试剂:20% DMSO,20% 乙醇,20% 甘油;1 M 尿素,300mM咪唑; 0.05% 吐温-20,10mM DTT等。
试剂盒组成:
| 成分 | 规格 |
| 专用亲和介质 | 1.5mL预装柱 |
| 再生缓冲液 | 125ml |
| 平衡缓冲液 | 125ml |
| 流速控制器 | 1个 |
| 无热原接收管 | 1 包(3 支/包) |
| 无热原枪头(1mL) | 2 包(6 支/包) |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:常温运输,4℃保存,有效期一年。
使用方法:
1.样品处理:样品的pH值和离子强度在内毒素去除的过程中起着重要作用。虽然结合内毒素的pH范围在6-9,但是7-8的pH范围是纯化的最佳范围。合适的离子浓度可以降低非特异性吸附,0.15-0.5 M NaCl的条件可以得到一个很好的去除效率和低的样品损失。所以,纯化之前可以使用处理过的*化*,0.1 M的*氧化*或0.1 M盐*(代"酸")来调节离子强度或pH值。
2.活化亲和介质:将预装柱置于铁架台,垂直固定,去除预装柱顶部的盖子,打开流速控制器,使保护液在重力作用下流干,加入5mL的(预冷)再生缓冲液,调节流速控制器,保持流速在0.25mL/min(或者10滴/min),待再生缓冲液流干,再加入5mL 再生缓冲液,再重复操作两次,确保体系保持无热原(即内毒素)存在。即使是第一次使用也必须进行这一步操作。这步操作大约需要60分钟完成。
3. 平衡亲和介质:活化完毕后,加入6mL的(预冷)平衡缓冲液,调节流速控制器,保持流速在0.5mL/min,流干平衡缓冲液,再按此操作重复两次。这步操作大约需要40分钟完成。
4.内毒素清除:将流速控制器关闭,使用无热原枪头将样品加入,打开控制器,控制流速不高于0.25mL/min,流出液体积达到1.5mL后,使用无热原接收管接受样品,样品流干后,再加入1.5mL-3.0mL的(预冷)平衡缓冲液淋洗,收集淋洗液。检测样品浓度及内毒素水平。
5. 再次使用:如果流出样品内毒素水平未能达到预期值,需要将预装柱重新再生,按照步骤1 重新再生,然后上样纯化。
6. 储存条件:如果预装柱用完后需要保存,先用10mL 平衡缓冲液平衡柱子,待平衡液流干,加入1.5mL的再生缓冲液(含0.02%的叠氮化*)。
石蜡包埋组织蛋白提取试剂盒销*(代"售")关键词:FFPE Total Protein Extraction Kit,BTN130888,石蜡包埋组织蛋白提取试剂盒
·真菌DNA提取试剂盒
编号:BTN60304
英文名称:Fungus DNA extraction kit
规格:50次
本试剂盒是基于液氮研磨法的真菌基因组DNA快速提取试剂盒,尤其适用于从真菌的菌丝体和子实体提取DNA(如果提取孢子和有坚硬细胞壁的单个真菌细胞,则建议选用本公司的玻璃珠法柱式真菌DNA提取试剂盒),提取过的真菌包括酵母(如:Saccharomyces cerevisiae、Schizosaccharomyces pomb、Pichia pastoris)、动物病原真菌(如:Candida albicans、Aspergillus niger)和植物病原真菌(如:Collectotrichum musae、Fusarium oxysporum)。
试剂盒特点:
1. DNA 纯净,OD260/280一般都在1.9左右,可直接用于PCR、酶切、杂交等。DNA大小在50 Kb左右。
2. 操作简单,整个过程约30分钟左右,比大多数同类产品短。
3.液体培养物处理量在0.1-3mL 之间,真菌菌丝、子实体的处理量在0.1-0.5 g 之间。
4. 价廉物美,与国外同类产品相比质量相当,但价格便宜。
5. 安全无毒,不需要使用*化苄等有毒物质,本试剂盒对人体无毒,无腐蚀性和刺激性气味。
试剂盒组成:
| 成分 | 规格 |
| 溶液A | 50ml |
| 溶液B | 50ml |
| RNase A溶液(10mg/ml) | 0.75ml |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:常温运输及保存,有效期一年。
使用方法:
1. 先将全部RNase A溶液全部加入到溶液A中,摇匀后再取用,未用完的溶液A最好在4℃保存。
2. 称取0.1-0.5g 湿的真菌菌丝、子实体或0.1-3mL液体培养物离心得到的沉淀,转移到塑料研钵中,液氮研磨成粉后转移到一个干净的1.5mL塑料离心管中。注意:最好避免使用含二氧化硅的玻璃研钵,因为DNA 会吸附在表面,影响得率。如果菌丝或子实体等已经十分干燥,则使用量最好比上面推荐的使用量低5-10倍;如果需要预先从环境中对真菌进行纯化(如从血液病原真菌中提取DNA,则需要先去除红细胞等成份),请按相关的标准方法先将该真菌预纯化出来,以沉淀物的形式放液氮研磨。
3.在离心管中加入1mL 65℃预热的溶液A并用移液枪头充分吹打混匀(如果溶液A有沉淀,需先在65℃加热溶解后摇匀再使用)。
4. 65℃保温5-30分钟,其间最好吹打混匀2-3次。
5. 12000~15000g室温离心3分钟,将不超过0.75mL的上清转移到新离心管中。有时候上清液中还会有少量细小悬浮物,但对后续操作没有影响,不必进行特殊处理。
6.在上清液中加入等体积的溶液B,上下颠倒30秒充分混匀,溶液将呈白色混浊状,将其置于冰浴中放置5-10分钟。
7. 12000~15000g室温离心3分钟,转移上清到新离心管中。
8. 加入0.2mL的*仿(自备),震荡器上充分振荡30秒混匀。
9. 12000~15000g室温离心3分钟,两相交界面将有白色膜状物,小心转移上清到新离心管中。
10. 重复第7-第8 步操作一次。
11. 加入0.6-1倍体积的异丙醇(自备),上下颠倒30秒混匀,12000~15000g离心5分钟,弃上清,管底将有微小DNA沉淀。
12. 用1mL 70%乙醇清洗沉淀2次后(一次洗涤是指加入70%乙醇震荡,12000~15000g室温离心3分钟,小心吸弃上清),再短暂离心一次,吸弃残留的液体(约50μL。吸出残留的乙醇很重要,否则它会严重影响后续的电泳上样、酶切、杂交等实验)。
13. 加入50-100μl自备缓冲液(如TE)和5-15μl RNase A溶液溶解沉淀(由于基因组DNA较大,一般需要过夜溶解)。DNA 即可用于电泳,酶切和PCR等反应。如果需要测OD,则必须乙醇沉淀去除降解的RNA。
石蜡包埋组织蛋白提取试剂盒销*(代"售")关键词:FFPE Total Protein Extraction Kit,BTN130888,石蜡包埋组织蛋白提取试剂盒
NF-222 羊抗人AFP
ARB11631 人清道夫受体B(SRB/CD36)尿液中含量检测 Human scavenger receptor b,srb ELISA KIT
ARB11361 人类粘蛋白(ORM)检测服务 Human orosomucoid,orm ELISA KIT
PY02-180 赖*酸脱羧酶培养基 5克
D-赖*酸盐*(代"酸")盐 Palmitic acid 7274-88-6
BL0616 镍-琼脂糖凝胶6FF Ni Sepharose 6FF
石蜡包埋组织DNA快速提取试剂盒
B1101 小牛血清(辐照灭菌)
L-*丙*酸 MMC 63-91-2
D-正亮*酸 DL-Trytophan 327-56-0
ARB13916 猪肠三叶因子(ITF)定量分析 Porcine intestinal trefoil factor,itf ELISA KIT
ARB12391 大鼠肿瘤特异生长因子/肿瘤相关因子(TSGF)Elisa分析 Rat tumor specific growth facter/tumor supplied group of factor,tsgf ELISA KIT
没食子兰 BOC-L-Ile 1562-85-2
北京百莱博科技有限公司是蛋白质研究产品的专业生产供应销*(代"售")商,恭候您的咨询选购石蜡包埋组织蛋白提取试剂盒销*(代"售")。
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石蜡包埋组织切片 miRNA 提取试剂盒(DP502) 操作指南
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石蜡包埋组织切片总 RNA 提取试剂盒操作指南(DP439)
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