凝胶法内毒素半定量试剂盒价格

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名称：凝胶法内毒素半定量试剂盒价格
规格：10×0.1mL
英文名：Endotoxin semi-quantitative kit(Gel Method)
编号：BTN130504
产地：国产|进口
本试剂盒又称鲎试剂，为鲎科动物东方鲎的血液变形细胞溶解物的冷冻干燥品。鲎试剂中含有C因子、B因子、凝固酶原、凝固蛋白原等。在适宜的条件下(温度，pH值及无干扰物质)，细菌内毒素激活C因子，引起一系列酶促反应，使鲎试剂产生凝集反应形成凝胶。

试剂盒组成：

 

成分	规格
鲎试剂,灵敏度0.06 EU/mL	0.1ml×10支
说明书	1份

储存条件：常温运输，阴凉处避光保存，有效期两年。

使用方法：

一、样品溶液的制备
样品的pH值应在6.0–8.0 之间，若超出此范围，需用无热原缓冲液或0.1N*氧化*、0.1N 盐*(代"酸")调节。若样品中可能存在鲎实验的干扰物质，见本说明书4.2“样品的干扰实验”。若样品中可能含有导致鲎试剂中G 因子旁路反应的(1,3)β－D－葡聚糖，需选用不会对(1,3)β－D－葡聚糖起反应的特异性鲎试剂。

二：细菌内毒素标准溶液及对照液的准备
2.1细菌内毒素标准溶液(本试剂盒不提供)
 取细菌内毒素工作标准品1支，按《细菌内毒素工作标准品使用说明书》配制2λ ，1λ ,0.5λ,及0.25λ的一系列内毒素标准溶液(λ为鲎试剂灵敏度标示值)。备用。
 注：鲎试剂灵敏度复核实验见本手册其他常用实验方案。
2.2 阴性对照液：即无内毒素水。
2.3 阳性对照液：即浓度为2λ的内毒素标准溶液。
2.4样品阳性对照液：即添加浓度为2λ内毒素标准的样品溶液。

三：内毒素检测
3.1 鲎试剂的溶解：按标示量(本试剂盒为0.1mL/支)加无内毒素水于鲎试剂中，轻轻振摇使鲎试剂完全溶解。注意不要引起气泡，溶解后的试剂应在10 min内使用(即配即用)。
3.2样品溶液的制备
 样品最大有效稀释倍数(MVD)的计算：
 MVD＝ C•L/λ
 λ：测试用鲎试剂灵敏度标示值(EU/mL)；L：样品细菌内毒素限值；C：样品浓度或样品复溶后所得样品浓度。当L 单位为EU/mL(溶液)时，C的单位为1mL/mL；当L单位为EU/mg或者EU/U时，C的单位为mg/mL或者U/mL。按照计算所得体积，加无内毒素水制备样品溶液。
3.3 各反应管中分别加入0.1mL 阴性对照液，阳性对照液，样品，或样品阳性对照液。
 封闭管口，轻轻摇匀，垂直放入37℃的恒温器中温育60分钟±2分钟，温育期间避免振动。
3.4 结果判断
3.4.1 将试管从恒温器中轻轻取出，缓慢倒转180°。若管内的内容物呈坚实凝胶，不变形，不从管壁滑脱为阳性，记录为(+)；不呈凝胶或虽生成凝胶但不能保持完整并从管壁滑脱为阴性，记录为(－)。
3.4.2 只有当阴性对照管结果均为阴性，阳性对照管、样品阳性对照管结果均为阳性，实验方有效，否则无效。若阴性对照管为阳性，提示鲎试剂、无内毒素水或实验器具可能受到污染。若阳性对照管为阴性，提示鲎试剂活性减失、内毒素标准溶液效价降低，鲎试剂的灵敏度或内毒素的效价标示不准确，或内毒素标准溶液的稀释不正确。若样品阳性对照管为阴性，提示反应体系内有干扰因素存在。

四：其他常用实验方案
4.1 鲎试剂灵敏度复核实验
 当使用新批号的鲎试剂或实验条件发生了任何可能影响检验结果的改变时，应按《中华人民共和国药典》2010 版中《细菌内毒素检查法》的“鲎试剂灵敏度复核实验”进行实验。按照下式复核灵敏度：λ＝lg-1(ΣX/4)，当0. 5λ≤λ ≤2.0λ时，鲎试剂灵敏度复核合格，检测时仍以标示灵敏度λ为准。
4.2样品的干扰实验
 当鲎试剂、样品的来源、配方、生产工艺或实验环境中发生了任何有可能影响实验结果的变化时，须按《中华人民共和国药典》2010 版中《细菌内毒素检查法》的“干扰实验”进行干扰实验。以样品代替无内毒素水为溶剂，配制2λ，λ，0.5λ，及0.25λ的内毒素系列标准溶液进行灵敏度复核。若灵敏度复核值在0.5λ 到2λ之间(包含0.5 λ及2 λ)，则认为在此实验条件下样品无干扰。若灵敏度复核值在0.5λ 到2λ之外，则认为在此实验条件下样品有干扰，需对样品进行稀释(稀释倍数不得超过最大有效稀释倍数MVD)或进行其它处理消除干扰。
4.3凝胶限度实验
 凝胶限度实验用于判断样品的内毒素含量是否超过药典所规定的细菌内毒素限值。按《中华人民共和国药典》2010 版中《细菌内毒素检查法》的“凝胶限度实验”进行实验。在实验有效的情况下，如果样品管的两个平行管均为阴性，判定样品的内毒素含量小于药典规定限值。如果样品管的两个平行管均为阳性，判定样品的内毒素含量不符合药典规定。如果样品管的两个平行管一管为阳性，另一管为阴性，需进行复试。复试时，样品需做4个平行管，若所有平行管均为阴性，判定样品符合规定，否则判定样品不符合规定。
4.4凝胶半定量实验
 本方法系通过确定反应终点浓度来量化样品中内毒素含量。详见《中华人民共和国药典》2010 版中《细菌内毒素检查法》的“凝胶半定量实验”。

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F030431 胶体金标记兔抗绵羊IgG抗体 Rabbit Anti-Sheep IgG*GOLD
ARB10300 人不透光相关蛋白(OPAs)免费代测 Human opacity-associated proteins,opas ELISA KIT
BTN81028 一站式植物mRNAOUT One-Stop Plant mRNA Isolation Kit
Western封闭液III（磷酸化抗体专用） 100ml
BL1388 SABC兔IgG-AP kit
ARB11702 人雄烯二酮(ASD)Elisa定量检测 Human androstenedione,asd ELISA KIT
DAPI染色封片剂   10ml
FMOC-L-亮*酸 D-Prolinol 35661-60-0
HC0220 大龙移液器
ARB12198 大鼠半胱*酸蛋白酶抑制剂/胱抑素C(Cys-C)代做ELISA实验 Rat cystatin c,cys-c ELISA KIT
ARB12656 大鼠解整合素样金属蛋白酶8(ADAM8)含量测试 Rat a disintegrin and metalloprotease 8,adam8 ELISA KIT
噻*隆 Glutaraldehyde 51707-55-2
ARB11170 人单核细胞趋化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)含量检测 Human monocyte chemotactic protein 1/monocyte chemotactic and activating factor,mcp-1/mcaf ELISA KIT
ARB11795 人碱性成纤维细胞生长因子受体(bFGFR)elisa检测 Human  bfgfr ELISA KIT
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·预染蛋白Marker(14.4～97.4kD)
编号：BTN70704A
英文名称：Prestained Protein Marker(14.4-97.4kD)
规格：10次
本产品为蛋白质电泳标准系列，是预染成蓝色的数个标准蛋白质的混合物，在SDS-PAGE时和转膜后可以作为分子量标准，粗略估计其他蛋白质的分子量大小。

产品特点：
1．提供干粉型或溶液型，即开即用，非常方便。
2．预染色，在电泳过程中可以观察蛋白质的泳动，也可以监测转膜效果。
3．可用于SDS-PAGE和Western Blot等实验。
4．本系列两种产品涵盖从14.4kD-200kD的分子量范围，单次上样，每个条带的浓度约为0.2μg/μL。

产品组成：

成分	A型	B型
预染蛋白标准(低分子量)	20T	-
预染蛋白标准(高分子量)	-	10T
1×SDS-PAGE上样液	0.5ml	0.5ml
说明书	1份	1份

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

使用方法：

一、干粉型的使用
1．开封后将1×SDS-PAGE上样液加入到样品管中溶解蛋白质粉末，各分子量标准所需的1×SDS-PAGE上样液的体积如下:
低分子量标准(BTN70704A)需要200μL。
中分子量标准(BTN70704B)需要100μL。
2．低分子量标准(BTN70704A)沸水浴中加热5分钟，短暂离心后将溶液按每管10μL的体积分装到多个塑料离心管中，置-20℃长期保存。
中分子量标准(BTN70704B)待完全溶解后，直接按每管10μL的体积分装到多个塑料离心管中，置-20℃长期保存。
3．使用时每次取一管，低分子量标准(BTN70704A)室温放置直到液体融化后即可上样进行SDS-PAGE电泳。中分子量标准(BTN70704B)需要在使用前65℃保温5分钟，然后上样进行SDS-PAGE电泳。BTN70704A型推荐使用12%的分离胶、BTN70704B推荐使用8%的分离胶。
4．电泳后进行考马斯亮蓝G-250染色，染色后出现的带型见上表。

二、溶液型的使用
1．将溶液按每管一次电泳的用量分装到塑料离心管中冻存，每次只用一管，这样避免反复冻融。
2．使用时取一管室温放置直到液体融化。
3．沸水浴中加热3～5分钟后趁热上样并进行SDS-PAGE电泳。BTN70704A型推荐使用12%的分离胶、BTN70704B推荐使用8%的分离胶。
 电泳后进行考马斯亮蓝G-250染色，染色后SDS-PAGE胶上将可见6条蛋白带(对BTN70704A)或6条蛋白带(对BTN70704B)，但由于共价结合了染料分子，各预染蛋白的分子量均稍大于染色前的蛋白，所以如果不需要精确估算未知蛋白的分子量，一般以染色前的各蛋白质的分子量作为参考。如果需要精确估算未知蛋白的分子量，则必须使用非预染蛋白电泳标准系列产品(BTN70102)，以避免误差。

本系列产品所含成分及分子量分布

分子量范围		低分子量	高分子量
肌球蛋白重链	200kD		有
*调素结合蛋白	130kD		有
兔磷酸化酶B	97.4kD	有	有
牛血清白蛋白	66.2kD	有	有
兔肌动蛋白	43kD	有	有
牛碳酸酐酶	31kD	有
人生长激素	22kD	有
大豆胰蛋白酶抑制剂A	20.1kD
鸡蛋清溶菌酶	14.4kD	有

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·Southern DNA Marker Oligo(生物素标记)
编号：BTN120654E
英文名称：Southern DNA Marker Oligo(Labeled by Biotin)
规格：20次

·一管式拭子DNA提取试剂盒
编号：BTN60501
英文名称：One-tube swab DNA extraction kit
规格：100次
本试剂盒专门用于从口腔拭子中快速提取能够用于PCR的基因组DNA。也可以用于提取微量血液，精液，血斑/精斑等法医物证的DNA。

产品特点：
1.快速，整个操作过程只需要十分钟，在一个离心管中完成。
2. DNA样品可直接用于PCR反应。
3.样品可以在4℃长期保存。
4. 不需要使用任何有毒的试剂。
5. 性价比高。

试剂盒组成：

成分	规格
无菌拭子	100只
1.5mL离心管	100只
溶液A	50ml
溶液B	10ml
说明书	1份

储存条件：常温运输及保存。有效期一年。

使用方法：
1. 将医用棉球拭子涂抹面颊的口腔内表面约十次，放入加有0.5mL溶液A的1.5mL塑料离心管中。
2. 剪去口腔拭子柄部，留药棉头于离心管中，盖上离心盖后振荡一分钟。
3. 95℃保温5分钟，用镊子取出离心管中药棉头，并在离心管壁尽量挤出其中的液体。
4. 加入50μl的溶液B，振荡半分钟。
5.室温12000 g离心2分钟。
6. 直接取上清作为模板加入到PCR反应体系中进行扩增，所加量以PCR的总体积的1/５为宜(即50μl的PCR 体系加10μl处理液)。
7. 剩余样品放4℃保存。

使用效果：

图注:用本产品提取涂抹面颊后的拭子的口腔上皮细胞DNA，最后分别取5μl(5号样)和10μl(10 号样)作为模板进行PCR,反应完后取10μl上样电泳。扩增片段为人-actin基因，长度为610bp，M表示100bp DNA Ladder，最大片段为600bp。电泳在SuperBuffer-2中进行，300 V，5分钟。

疑难解答：
Q：能否浓缩第六步上清中的DNA？
A：可以用盐/乙醇法浓缩DNA，用浓缩后的DNA做模板扩增效果更好。

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