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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
417
- 英文名:
Gram positive bacteria RNA Column extraction kit
- 保质期:
长期
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
阴凉干燥
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产销*(代"售")北京柱式革兰氏阳性菌RNA提取试剂盒现货,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:北京柱式革兰氏阳性菌RNA提取试剂盒现货
规格:50次
编号:BTN130970
品牌:百奥莱博
英文名:Gram positive bacteria RNA Column extraction kit
产地:国产|进口
更多有关北京柱式革兰氏阳性菌RNA提取试剂盒现货的价格及使用说明等,请联*(代"系")我们的业务经理王欣女士咨询,我公司还销*(代"售")以下产品:
·CCK-8细胞增殖及毒性检测试剂盒
编号:BTN121205
英文名称:Cell Counting Kit-8
规格:5mL
本CCK-8试剂盒是基于WTS-8的第二代细胞增殖及毒性检测产品,主要成分为水溶性四唑盐WST-8(2-(2-甲氧基-4-硝*基)-3-(4-硝*基)-5-(2,4-二磺基*)-2H-四唑单*盐,WST-8为一种MTT类似物,在电子耦合试剂1-Methoxy PMS存在的情况下能够被还原成橙黄色水溶性的甲臜(formazan)。生成的甲臜量与活细胞数量成线性相关。
产品特点:
1.溶液稳定,对细胞无毒性,可直接同步加入到细胞样品中长时间孵育,可以多次测定选取最佳测定时间。
2.灵敏度高,实验的灵敏度比其它如MTT,XTT或MTS高,操作简便、快捷,实验结果重复性好。
3.水溶性,免去后续的溶解步骤。
4.不需要换液,尤其适合于悬浮细胞。
5.安全无毒,不会对操作人员身体造成危害。
6.可以广泛应用于生物活性因子的活性检测、药物的筛选、细胞增殖检测、细胞毒性。
储存条件:常温运输和4 ℃干燥避光保存,有效期一年。
使用方法:
一、制作标准曲线(测定细胞具体数量时测定细胞具体数量时)
1.先用细胞计数板计数所制备的细胞悬液中的细胞数量,然后接种细胞。
2.按比例(例如:1/2比例)依次用培养基等比稀释成一个细胞浓度梯度,一般要做3-5个细胞浓度梯度,每组3-6个复孔。
3.接种后培养2-4小时使细胞贴壁,然后加 CCK 试剂培养一定时间后测定OD值,制作出一条以细胞数量为横坐标(X轴),OD值为纵坐标(Y轴)的标准曲线。根据此标准曲线可以测定出未知样品的细胞数量(使用此标准曲线的前提是实验的条件要一致,便于确定细胞的接种数量以及加入CCK后的培养时间)。
二、细胞活性检测
1.在96孔板中接种细胞悬液(100μL/孔)。将培养板在培养箱中预培养24小时(37℃,5% CO2)。
2.每孔加入10μL的CCK溶液。
3.将培养板在培养箱内孵育1-4小时。
4.用酶标仪测定在450nm处的吸光度。
5.如果暂时不测定OD值,可以向每孔中加入10μL 0.1M的HCl溶液或者 1%w/v SDS溶液,并遮盖培养板避光保存在室温条件下。在24小时内吸光度不会发生变化。
三、细胞增殖-毒性检测
1.在96孔板中配置 100μL的细胞悬液。将培养板在培养箱预培养24小时(37℃,5%CO2)。
2.向培养板中加入10μL不同浓度的待测物质。
3.将培养板在培养箱孵育一段适当的时间(例如:6、12、24或48小时)。
4.向每孔加入10μL CCK溶液。
5.将培养板在培养箱内孵育 1-4小时。
6.用酶标仪测定在450nm处的吸光度。
7.如果暂时不测定OD值,可以向每孔中加入10μL 0.1M的HCl溶液或者1%w/v SDS溶液,并遮盖培养板避光保存在室温条件下。在24小时内吸光度不会发生变化。
注意事项:
1.如果待测物质有氧化性或还原性的话,可在加CCK之前更换新鲜培养基(除去培养基,并用培养基洗涤细胞两次,然后加入新的培养基),去掉药物影响。如果药物影响比较小的情况下,可以不更换培养基,直接扣除培养基中加入药物后的空白吸收即可。
2.用酶标仪检测前请确保孔内没有气泡,否则会干扰测定。
3.建议先做几个孔摸索接种细胞的数量和加入CCK试剂后的培养时间。
4.有条件的情况下建议采用多通道移液器,可以减少平行孔间的差异。加入CCK试剂时,建议斜贴着培养板壁加,不要插到培养基液面下加,容易产生气泡,会干扰OD 值读数。
5.白细胞可能需要培养较长时间。
6.当使用标准 96孔板时,贴壁细胞的最小接种量至少为1000个/孔(100μL培养基)。检测白细胞时的灵敏度相对较低,因此推荐接种量不低于2500个/孔(100μL培养基)。如果要使用24孔板或6孔板实验,请先计算每孔相应的接种量,并按照每孔培养基总体积的10%加入CCK溶液。
7.如果没有450nm的滤光片,可以使用吸光度在430-490nm之间的滤光片,但是450nm滤光片的检测灵敏度最高。
8.培养基中酚红的吸光度可以在计算时,通过扣除空白孔中本底的吸光度而消去,因此不会对检测造成影响。
结果分析:
细胞活力*(%)=[A(加药)-A(空白)]/[A(0加药)-A(空白)]×100
A(加药):具有细胞、CCK溶液和药物溶液的孔的吸光度
A(空白):具有培养基和CCK溶液而没有细胞的孔的吸光度
A(0加药):具有细胞、CCK溶液而没有药物溶液的孔的吸光度
*细胞活力:细胞增殖活力或细胞毒性活力
北京柱式革兰氏阳性菌RNA提取试剂盒现货关键词:Gram positive bacteria RNA Column extraction kit,柱式革兰氏阳性菌RNA提取试剂盒,BTN130970
·柱式血清血浆DNA提取试剂盒
编号:BTN130979
英文名称:Serum/plasma DNA column extraction kit
规格:50次
·一步式细菌DNA提取试剂盒
编号:BTN60806
英文名称:One-step Bacteria DNA extraction kit
规格:50次
本试剂盒是在一步裂解式超快细菌基因组DNA提取试剂,其最大特点是快速,可以用于绝大多数革氏阳性和阴性细菌基因组DNA的快速提取。
试剂盒特点:
1. 操作简单,整个过程不到10分钟(对一个样品而言)。
2.产率一般在3-10μg/mL过液培养细菌。
3. OD260/280一般在1.8以上。
4. DNA片段长度一般在40-50 Kb左右。
5.适用范围广,可以使用于绝大多数细菌。
6. 也可以使用过夜培养细菌和菌落。
7. 得到的DNA可以直接用于PCR,酶切或其他分子生物学实验。
试剂盒组成:
| 成分 | 规格 |
| 溶菌酶 | 600mg |
| 一步式细菌裂解液 | 25ml |
| 专用上柱液 | 50ml |
| 离心吸附柱 | 50套 |
| 通用洗柱液 | 50ml |
| DNA洗脱液 | 10ml |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:常温运输及保存(溶菌酶需要冰袋运输,-20℃保存),有效期一年。
使用方法:
一: 对革氏阴性细菌
1. 如果一步式裂解液产生沉淀,需要65℃预热直到沉淀溶解,摇匀待用。
2. 将0.1-1.5mL过夜培养的菌液转移到1.5mL塑料离心中,室温12000rpm离心1分钟沉淀细菌,弃上清。
3. 加入0.5mL一步式细菌裂解液到离心管中,吹打混匀。
4. 加入0.5mL专用上柱液到裂解液中,颠倒混匀后全部转移到离心吸附柱中,室温放置至少2分钟。
5. 12000rpm室温离心1分钟,DNA将吸附在离心吸附柱的膜上,倒弃收集管中的穿透液。
6. 将0.5mL通用洗柱液加入离心柱中,12000rpm室温离心1分钟,弃穿透液。
7. 重复第6步操作一次。
8. 空甩半分钟,将离心吸附柱转移到新的离心管中。
9. 加50-100μL DNA洗脱液,室温放置3~5分钟。
10. 12000rpm室温离心1分钟即得DNA溶液。
二: 对革氏阳性细菌
1. 将0.1-1.5mL过夜培养的细菌离心1分钟后,重悬于0.6mL溶菌液中(60mL自备超纯水+600mg溶菌酶),颠倒混匀5-10次后37℃保温30分钟(有的菌种可能需更长时间,需要自己根据细菌不同而决定)。
2. 12000rpm离心10分钟,小心弃上清。
3.后续处理接革氏阳性细菌处理的第3步。
北京柱式革兰氏阳性菌RNA提取试剂盒现货关键词:Gram positive bacteria RNA Column extraction kit,柱式革兰氏阳性菌RNA提取试剂盒,BTN130970
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