北京现货重组蛋白A/G优惠

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百奥莱博专业生产供应北京现货重组蛋白A/G优惠，我公司销*(代"售")全品类的分子生物学试剂，价格优惠，欢迎广大科研工作者垂询订购。

名称：北京现货重组蛋白A/G优惠
品牌：百奥莱博
产地：国产|进口
规格：1mg
编号：BTN131081

更多有关北京现货重组蛋白A/G优惠的价格及使用说明等，请联*(代"系")我们的业务经理王欣女士咨询，我公司还销*(代"售")以下产品：

·生物素
编号：BTN131092
英文名称：Biotin
规格：1g
生物素为B族维生素之一，又称维生素H、维生素B7、辅酶R，CAS号为58-85-5，分子式为C₁₀H₁₅N₂O₃S，分子量为243.3。游离的生物素常被用于从亲和素柱子纯化生物素化复合物的洗脱缓冲液中。其在用HABA染料测量生物素化程度的过程中可以被用来作为参考标准。

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

·终点显色法内毒素定量试剂盒
编号：BTN120415
英文名称：Chromogenic End-point TAL Kit
规格：32次
鲎试剂为鲎科动物东方鲎(TAL)的血液变形细胞溶解物的冷冻干燥品，鲎试剂中含有Ｃ因子等跟凝血有关成分，当细菌内毒素激活C因子时会，起一系列酶促反应，激活凝固酶原形成凝固酶，凝固酶分解人工合成的显色基质，使其分解为多肽和黄色的对硝基*(代"*")胺(pNA，λmax=405nm)。在一定时间内，pNA的生成量与细菌内毒素浓度成正相关，据此，可以通过测定样品405nm的光吸收来用外标准法定量样品的内毒素浓度。其原理图如下(TAL和图中LAL相同)：

本试剂盒就是基于上述原理开发而成，并进行了重大改进，增加了偶氮化试剂染色硝基*(代"*")胺(pNA)的步骤，此步使得反应的最终颜色变成玫瑰红色(λmax = 545nm)，避免了深颜色样品本身的颜色对405nm处吸收峰的干扰，结果更加准确可靠。

产品特点：
1.一站式，提供所需的试剂、内毒素对照和无热源的耗材，为用户省去繁琐的准备工作。
2. 灵敏度高，可以对浓度在0.1EU/mL-1EU/mL和在0.01EU/mL -0.1EU/mL两个浓度范围的内毒素样品进行定量。
3. 比经典的pNA法多一步偶氮化染色的步骤，处理样品的范围更广，结果更加稳定可靠。
4.样品中如含有β－葡聚糖，则需选用特异性显色基质鲎试剂盒，因为β－葡聚糖会产生G因子旁路反应，干扰内毒素检测。
5. 若样品含头孢类抗菌素或磺胺制剂，则需要选用不含偶氮化试剂的鲎试剂盒，因为上述成分也能跟本试剂盒中的偶氮染色剂发生偶联反应而干扰偶氮化显色。

试剂盒组成：

 

成分	规格
细菌内毒素标准品 15EU	2支
鲎试剂	2支×1.7mL
显色基质	2支×1.7mL
偶氮化试剂1	2支×10mL
偶氮化试剂2	2支×10mL
偶氮化试剂3	2支×10mL
HCl(反应终止剂)	50ml
细菌内毒素检查用水	50ml×2瓶
除热原试管，10×75mm	10×5支
除热原吸头，1ml	10×4支
除热原吸头，0.2ml	10×5支
说明书	1份

储存条件：常温运输，4℃避光保存，有效期两年。

使用方法：

一、样品的预处理
1.若样品的本底在545nm的吸光度值大于0.5，必须对样品进行稀释后再检测。
2.若样品颜色较深(例如溶血)，或在酸性条件下颜色加深(例如一些组织培养介质),必须设置样品空白管以扣除样品自身的颜色本底。样品空白管不加入鲎试剂，以等体积的细菌内毒素检查用水代替。其余操作同样品管。
3.本检测方法高度灵敏，故接触试剂及样品的所有器皿必须是除热原的。除热原指内毒素浓度小于0.005 EU/ml。玻璃器皿可经250℃干烤至少60分钟去除热原。实验过程应防止细菌的污染(内毒素即细菌的LPS)。
4.待测样品的pH值应在6.0–8.0之间，若超出此范围，需用自备的除热原的缓冲液、0.1M*氧化*或0.1M盐*(代"酸")调节。

二、试剂准备
5.细菌内毒素标准溶液配制(制备标准曲线用)：取细菌内毒素标准品1支，按细菌内毒素标准品使用说明(见附2)稀释为10EU/mL的内毒素溶液，再稀释为1.0EU/mL的内毒素溶液，最后按下表以1.0EU/mL的内毒素溶液为母液，在A-D四个离心管中稀释成0.1、0.25、0.5、1.0 EU/mL的浓度梯度。配制好的内毒素标准溶液应在4小时内用完。注意：也可以选择0.01、0.025、0.05、0.1EU/mL的浓度梯度。注意：标准品浓度范围不同，后续显色实验的保温时间也不同。

成份	A管	B管	C管	D管
细菌内毒素检查用水(mL)	0	0.5	0.75	0.9
1EU/ml内毒素溶液(mL)	1	0.5	0.25	0.1
内毒素浓度(EU/mL)	1	0.5	0.25	0.1

6.阴性对照用细菌内毒素检查用水。
7.配制鲎试剂、显色基质、偶氮化试剂等试剂的工作液。
(1)鲎试剂：按标签标示量加细菌内毒素检查用水于鲎试剂中，轻轻振摇使鲎试剂完全溶解，得鲎试剂工作液。注意不要用旋涡混匀剧烈振摇。鲎试剂工作液应在10分钟内用完。
(2)显色基质：按标签标示量加细菌内毒素检查用水于显色基质中，轻轻振摇使显色基质完全溶解，得显色基质工作液。显色基质工作液可在无污染的条件下于4℃贮存8小时以内。
(3)偶氮化试剂1：按标签标示量加反应终止剂(注意：不是细菌内毒素检查用水)于偶氮化试剂1瓶中，得偶氮化试剂1工作液。
(4)偶氮化试剂2：按标签标示量加细菌内毒素检查用水于偶氮化试剂2瓶中，得偶氮化试剂2工作液。
(5)偶氮化试剂3：按标签标示量加细菌内毒素检查用水于偶氮化试剂3瓶中，得偶氮化试剂3工作液。偶氮化试剂工作液可于4℃贮存1周。

三、实验操作
8.取本试剂盒提供的无热原试管6管，按下表操作(每加一个试剂均需要充分混匀，或用移液器轻柔吹打混匀):NC为阴性对照，PC为阳性对照。

成份	NC 1管	PC 4管	样品 1管
细菌内毒素检查用水(μL)	100	-	-
内毒素标准溶液(μL)(4种)	-	每种分别100	-
待测样品(μL)	-	-	100
鲎试剂工作液(μL)	100	100	100
混匀，37ºC温育T1分钟
显色基质溶液(μL)	100	100	100
混匀，37ºC温育T2分钟
偶氮化试剂1工作液(μL)	500	500	500
偶氮化试剂2工作液(μL)	500	500	500
偶氮化试剂3工作液(μL)	500	500	500
混匀,静置5分钟，于λ545nm测OD值

特别注意：每个批次的T1和T2不同。对本批次。

四、数据处理
9.建标准曲线：Y=bX + a，其中Y为545nm处吸光值，X为内毒素浓度，b为直线斜率，a为Y轴截距。
10.当实验数据同时满足如下三个条件时实验才有效：
(1)标准曲线的相关系数r≥0.980，
(2)标准曲线最低点的Y值大于阴性对照的Y值，
(3)待测样品平行管的平均值在标准曲线的区间内。

附1：待测样品的干扰实验
当样品中可能存在鲎实验的干扰物质时，须进行干扰实验。待测样品的干扰实验详见《中华人民共和国药典》2010细菌内毒素检查法》的“光度测定法干扰实验”。当鲎试剂、待测样品的来源、配方、生产工艺改变或实验环境中发生了任何有可能影响实验结果的变化时，须进行干扰实验，步骤如下:
1.选择标准曲线中点或一个靠近中点的内毒素浓度(设为λm)，作为待测样品干扰实验中添加的内毒素浓度，配制含λm内毒素的待测样品阳性对照，测量出该溶液的内毒素浓度,称为Cs；
2.测量出未添加外源内毒素的待测样品溶液内毒素浓度,称为Ct；
3.计算该实验条件下的回收率R＝(Cs–Ct)/λm×100%
4.当R在50%～200%之间，则认为在此实验条件下待测样品溶液不存在干扰作用。
5.当R在50%～200%之外，需对待测样品进行系列稀释(稀释倍数不得超过最大有效 稀释倍数MVD)或进行其它处理消除干扰,每一稀释溶液都重复步骤1-3,直到内毒素的回收率R在50%～200%之间。选择回收率R最接近100%的稀释倍数进行内毒素检测。

附2：细菌内毒素标准品使用说明
本品为白色疏松海绵状固体，系参照中国药品生物制品检定所的细菌内毒素工作标准品标定的大肠杆菌内毒素冻干品，供鲎实验中的鲎试剂灵敏度复核、干扰实验和各种阳性对照。其用法如下：
6.溶解：加入适量的细菌内毒素检查用水(BET水，最大加入量不得超过1mL),复溶后置涡旋混匀器上混匀15 min。
7.稀释：将上述内毒素溶液进一步用细菌内毒素检查用水稀释成各个不同浓度。每次稀释后必须在涡旋混匀器上混匀至少一分钟。每一步的稀释倍数均不得超过10倍。
8.本品为一次性使用。仅供体外鲎实验检测，禁止用于注射、口服等。
9.实验所用的器皿需经过处理，以除去可能存在的外源性内毒素，可以经250℃干烤至少60分钟处理，也可以采用其他确保不干扰细菌内毒素检测的适宜方法处理。实验操作过程中应该防止微生物的污染。
10.稀释的内毒素溶液静置时间超过10分钟，用前需要在涡旋混匀器上剧烈混匀1分钟，放置4小时以上的内毒素溶液应丢弃。


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·超级杂交液(原位杂交)
编号：BTN130906
英文名称：Super hybrid solution(In situ hybridization)
规格：10mL
本产品为我司开发的即用型原位杂交专用核酸杂交液。既可以用于RNA原位杂交、DNA原位杂交，也可以用于FISH原位杂交等试验。

原位杂交是在一定生物结构基础之上的核酸杂交。这种结构基础可以是一条染色体；一个细菌；更大结构基础是细胞和组织。基本原理是两条核苷酸单链片段，在适宜的条件下，通过*键结合，形成DNA-DNA、DNA-RNA或RNA-RNA 双键分子，应用带有标记的(有放射性同位素，如3H、35S、32P、荧光素生物素、地高*(代"辛")等非放射性物质)DNA或RNA片段作为核酸探针，与组织切片或细胞内待测核酸(RNA或DNA)片段进行杂交，然后可用放射自显影等方法予以显示，在光镜或电镜下观察目的mRNA或DNA的存在并定位；用原位杂交技术，可在原位研究细胞合成某种多肽或蛋白质的基因表达。此方法有很高的敏感性和特异性，可进一步从分子水平来探讨细胞的功能表达及其调节机制。已成为当今细胞生物学、分子生物学研究的重要手段。

储存条件：低温运输和-20℃保存、有效期一年。

使用方法：(以检测mRNA序列为例)

培养细胞和冰冻切片
1. 玻片的处理：一般采用多聚赖*酸或APES。切片厚度10-20μm。
2.细胞在多聚赖*酸处理的盖玻片上进行培养，条件为37℃和5%的CO2，所用培养基为DμLbecco基础培养基。细胞长好后0.1M PBS(PH7.4)洗2分钟×3次。
3.培养细胞和冰冻切片均可用下述方法固定：固定液为4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6)，含有1/1000 DEPC。室温固定 20--30分钟。蒸馏水充分洗涤，干燥后-20℃冰冻可保存2周以上。
4. 30%H2O2 1份+纯甲醇50份混合，室温处理30分钟。蒸馏水洗涤3次。
5. 暴露mRNA核酸片段：切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3% 柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶，混匀)，37℃或室温消化5—120秒钟。有时也可以不消化。原位杂交用PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。
6.后固定：胃蛋白酶消化后才需要。固定液为1%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6)，含有1/1000 DEPC。室温固定10分钟。蒸馏水洗涤3次。
7.预杂交：湿盒的准备——干的杂交盒底部加20%甘油20ml以保持湿度。按每张切片加20μL预杂交液(提前加入鲑鱼精DNA，终浓度为100μg/ml)。恒温箱38-42℃2—4小时。吸取多余液体，不洗。
 注：靶DNA的变性，DNA-DNA杂交检测中，在杂交前需要增加靶DNA的变性步骤(对mRNA的原位杂交无需此步)。样品DNA的变性可能会造成样品形态学的部分破坏，此步是实验中需要优化的一个步骤。实验时可以摸索变性时间、变性温度等参数以获得最佳条件。可以将探针的变性和样品DNA变性同步进行：将样品和探针溶液加盖盖玻片，置于烘箱80℃变性 ，处理5-10 min，后冷却至37℃进行杂交。
8.杂交——按每张切片20μL杂交液(探针浓度约为1ng/μL；杂交液提前加入鲑鱼精DNA，终浓度为100μg/ml)，加在切片上。将原位杂交专用盖玻片的保护膜揭开后，盖在切片上。恒温箱38-42℃杂交过夜(根据杂交情况可以调节)。
9.杂交后洗涤：揭掉盖玻片，37℃左右水温的2×SSC洗涤5分钟×2次；37℃ 0.5×SSC洗涤15分钟×1次; 37℃ 0.2×SSC洗涤15分钟×1次(如果有非特异性染色，重复0.2×SSC洗涤15分钟×1-2次)。
10.滴加封闭液：37℃ 30分钟。甩去多余液体，不洗。
11. 根据探针标记物，选择相应显色方法显色、复染，脱水、封片。
12. 结果观察。

石蜡切片
 如果有条件的话，应尽可能地采用新鲜标本。标本离体后，及时予以固定。固定液为4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.0-7.6)，含有1/1000 DEPC。标本较大时用刀片切成厚度不超过4mm的小块，固定1小时即可，较大的标本固定不要超过2小时。某些组织对过度固定尤其敏感，如动物大脑，固定时间30-40分钟，一般不要超过1小时。
1．常规脱水、浸蜡、包埋。切片厚度6-8μm。
2．玻片的处理：一般采用多聚赖*酸或APES。
3．石蜡切片经常规脱蜡至水。30%H2O2 1份+蒸馏水10份混合,室温5-10分钟以灭活内源性酶。蒸馏水洗3次。
4．暴露mRNA核酸片段：切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3%柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶，混匀)，37℃或室温消化3--30分钟(视标本新旧、厚薄自行调整)。用户可以比较不同的消化时间，例如5分钟,10分钟，20分钟，30分钟。以找到最佳的消化时间。原位杂交用PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。
5.其余步骤和冰冻切片6-11步相同。
6. 结果观察。


北京现货重组蛋白A/G优惠关键词：Recombinant Protein A/G,BTN131081,重组蛋白A/G

ARB11149 人肿瘤标志物(CA724)代做ELISA实验 Human ca724 ELISA KIT
D-丝*酸甲酯盐*(代"酸")盐 Lactulose 5874-57-7
PY04-072  10%*化*卵黄液  5ml/支×10支  每支添加于95ml卵黄*化*琼脂培养基基础中，用于金黄色葡萄球菌的分离培养
ARB13789 豚鼠白介素6(IL-6)elisa检测操作说明书 Guinea pig interleukin 6,IL-6 ELISA KIT
1239-45-8 *化乙锭 Ethidium Brmide
血清β-羟丁酸检测试剂盒(酶比色法)   100T
62640-02-2 NADP Na2 氧化型辅酶Ⅱ
CYB161005 人IgG(液体-pH7.2PBS)
BTN130874 人玻连蛋白 Vitronectin
碘化丙啶PI染色液(DNA染色)  50ug/ml 10ml
CYB163037 羊抗小鼠IgG(全分子)-FITC
ARB13902 猪血管内皮细胞粘附分子1(VCAM-1/CD106)酶标法分析 Porcine vascuolar cell adhesion molecule 1,vcam-1 ELISA KIT
ARB10926 人克拉拉细胞蛋白(CC16)定量分析 Human clara cell protein,cc16 ELISA KIT

北京百莱博科技有限公司专业生产供应销*(代"售")生物试剂、化学试剂、抗原抗体、血清血浆、Elisa试剂盒，更多试剂产品需求，欢迎来电咨询选购北京现货重组蛋白A/G优惠。