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文献和实验倒去培养基,先加入PBS1ml,再加入0.25%胰酶1ml,轻轻晃动培养瓶,使之分布均匀;约10秒。将培养瓶迅速转至镜下观察,镜下见细胞触角变钝,细胞变圆,将瓶侧立回到无菌台内,到掉胰酶,加入2mlDMEM培养基(内涵20%胎牛血清),终止消化,弯管吹打成单细胞,可再在镜下观察,确定是否吹打完全。按1:3或1:2传代,加入适量新鲜培养基后,1.5-2.0ml。放入CO2培养箱。注意:时间宁短勿长。宁愿消化不足也不能消化过,PDLC细胞不能等到细胞长融合再传代,长到80%左右就可以传代
瓶倾斜放置在温箱中,干贴壁2-4 h后,将培养瓶慢慢翻转平放,继续静置培养。注意上述操作过程中动作要轻柔,让液体慢慢覆盖组织小块,严禁动作过快致使液体产生的冲力使粘贴的组织块漂起而造成原代培养失败。48 h后换液,更换2-3 ml即可。 2.6 贴块贴壁72 h后,镜下可见大量的成纤维细胞爬出,将组织块去除,继续培养2-3天,待细胞长满,即可传代。注:因为血清浓度低,内皮细胞可以爬出少量,但是很快就会死掉。 2.7 传代用0.25%胰酶常规消化,以1:2传代,传代完后,采用
大鼠成纤维细胞生长因子(FGF ) 酶联免疫分析 试剂盒使用说明书 本试剂仅供研究使用 目的:本试剂盒用于测定大鼠血清,血浆及相关液体样本中成纤维细胞生长因子(FGF ) 的含量。 实验原理: 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠 成纤维细胞生长因子(FGF ) 水 平。用纯化的大鼠 成纤维细胞生长因子(FGF ) 抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入 成纤维细胞生长因子(FGF
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