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文献和实验本人把大鼠原代肾小管上皮细胞的取材、培养方法进行了总 结,请分享! 取材:1.肾小管节段的分离(机械网筛滤过法): ①取 Wistar 大鼠断颈法处死,立即置入碘伏液中浸泡 5 分钟。 ②将大鼠转移入超净工作台,取腰部切口迅速取出肾脏,置于盛有生理盐水的培养皿中清洗并除去包膜和肾蒂组织。 ③取皮质置于80目筛网上,剪碎成1-2mm3大小组织块,网下放盛有少量生理盐水的培养皿。 ④用玻璃注射器内芯于80目网上充分研磨组织。 ⑤收集 80 目网下液体转移至 100
」是品系,「大鼠」是指物种,「骨髓」是组织来源,「间充质干细胞」是最终细胞名称,便于在向商家咨询时,让商家第一时间知道你需要具体什么产品。 (2)明确自己需要的细胞是永生细胞株还是原代细胞。 这两者有很大区别:前者可长时间传代,但后者传代次数极其有限,甚至部分组织来源原代细胞完全不能传代,极其接近生物体细胞状态;另外,这两种细胞价格相差很大,前者相对比较便宜,后者成本和价格较高,不说清楚就让商家报价,最后出来的价格吓死你! (3)明确实验设计需要的细胞量,以及细胞用途,至少
间充质干细胞-100X 右:成软骨分化诱导培养后,阿新蓝染色 左:成脂分化诱导培养后,油红 O 染色 右:成骨分化诱导培养后,茜素红染色 与上述主动诱导相反,另一种常见现象是细胞在没有外界干预下的“自发性分化”。 二、自发性分化:细胞的被动选择 与主动诱导相反,很多原代细胞在脱离体内复杂的微环境后,会自发改变其分化状态。例如骨骼肌细胞可能形成肌管、角质形成细胞出现角质化、神经干细胞形成球状结构。 这种
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