大鼠脂肪干细胞

大鼠的麻醉

一、SD大鼠的麻醉 1、SD大鼠腹腔麻醉 把异氟烷和脂肪乳混合做成乳化异氟烷，腹腔注射，3分钟麻醉，30分钟清醒。 乳化异氟烷制备：用30%的脂肪乳为载体，在室温下（20℃）应用玻璃瓶法，配制成8%的乳化异氟烷。即将1.2ml的液态异氟烷和21.3ml的30%脂肪乳加入至一个气密性良好的25～30ml玻璃容器内，在振荡器上以2000r/min的速度剧烈震荡30s，静置30s，然后再以2000r/min速度剧烈震荡50min，达到平衡后放置于4℃冰箱保存备用。 乳化异氟烷，大鼠

脂肪干细胞的应用

脂肪干细胞的应用脂肪组织是人体内含量十分丰富的组织。随着肥胖症患者的增多，人类脂肪开始“富余”，并渐成为累赘。人们一直以为，脂肪仅仅只有储存热量作用，过量储存会导致脂肪肝、血管硬化。殊不知，脂肪还蕴藏有十分稀缺的干细胞资源。Zuk等人将脂肪抽吸术后的脂肪细胞(processed lipoaspirate cell，PLA)收集、消化后进行体外培养研究。经过不同的细胞因子的诱导，PLA能够向骨、软骨、骨骼肌、脂肪、神经等组织转化。PLA经转化后细胞表面的CD标记物与骨髓干细胞的诱导分化标记

脂肪干细胞（ASCs）的提取及鉴定

短梭状），24小时后第一次换液，以后3天换液一次。培养3-4天时，细胞生长繁殖，细胞数量增加，并可见细胞形成孤立小片（细胞岛），逐渐扩展，细胞透明，颗粒啥，界线清晰。7-10天细胞已基本铺满瓶壁形成致密单层，（80%融合后）可进行传代培养。 3. 细胞传代培养 （1）操作步骤 a. 取一瓶脂肪干细胞在倒置相差显微镜下观察，培养细胞如长成致密的单层，即可进行传代。 b. 将培养瓶带人超净工作台，倒去细胞培养液，吸取2ml-3ml PBS加入培养瓶中，轻轻振荡后倾去，可重复进行