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文献和实验溶于L15基础培养基。 4、 SDS处理液:20gSDS,50μl二甲基甲酰胺,加双蒸水50ml溶解。 5、 L-多聚赖氨酸:50μg溶于1ml双蒸水中。 6、 L15基础培养基溶解的不同浓度的蛋白液。 (三)操作步骤(以背根神经节细胞培养为例) 1、 无菌条件下取新生一天的SD大鼠背根神经节(DRG)。 2、 镜下去除神经根和外膜,放入1ml 0.1%胶原酶中37℃消化30min,每5min摇匀一次。 3、 洗去胶原酶,吹打分散后,接种于预先涂有L-多聚赖氨酸的96孔培养板中,每孔
基。 4、SDS处理液:20gSDS,50μl二甲基甲酰胺,加双蒸水50ml溶解。 5、L-多聚赖氨酸:50μg溶于1ml双蒸水中。 6、L15基础培养基溶解的不同浓度的蛋白液。 (三)操作步骤(以背根神经节细胞培养为例) 1、无菌条件下取新生一天的SD大鼠背根神经节(DRG)。 2、镜下去除神经根和外膜,放入1ml 0.1%胶原酶中37℃消化30min,每5min摇匀一次。 3、洗去胶原酶,吹打分散后,接种于预先涂有L-多聚赖氨酸的96孔培养板中,每孔含100μl无血清L15培养基,细胞约800
gSDS,50μl二甲基甲酰胺,加双蒸水50ml溶解。5、L-多聚赖氨酸:50μg溶于1ml双蒸水中。6、L15基础培养基溶解的不同浓度的蛋白液。(三)操作步骤(以背根神经节细胞培养为例)1、无菌条件下取新生一天的SD大鼠背根神经节(DRG)。2、镜下去除神经根和外膜,放入1ml 0.1%胶原酶中37℃消化30min,每5min摇匀一次。3、洗去胶原酶,吹打分散后,接种于预先涂有L-多聚赖氨酸的96孔培养板中,每孔含100μl无血清L15培养基,细胞约800个。4、实验组分别加入纯化的表达蛋白(分别以不同
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