皮肤成纤维细胞_大鼠原代细胞

基因治疗中的皮肤成纤维细胞途径

基因治疗中的皮肤成纤维细胞途径       与骨髓细胞 相比，皮肤成纤维细胞用作基因治疗靶细胞的研究起步虽晚一些，然而由于皮肤成纤维细胞在获得、培养以及移植等方面的便易性，它在基因治疗中的发展很快。       皮肤成纤维细胞容易获取，对培养要求低，操作技术难度小，在普通实验室中容易推广。原代成纤维细胞具有较强的扩增能力，能够迅速传代40―50代次，扩增数百万倍以上。成纤维细胞在体外扩增之后也容易植回体内，还可根据需要重新取出。此外，成纤维细胞对基因转移载体要求较低，基因转移效率

皮肤成纤维细胞和THP-1细胞的传代经验

我养过皮肤成纤维细胞和THP-1细胞。皮肤成纤维细胞是贴壁生长的。THP-1细胞是悬浮的。由于我们实验室养细胞的时间也不是很长，所以也只能说说自己平时的操作了。先说皮肤成纤维细胞。当细胞铺满瓶底，也就是细胞与细胞之间没有间隙时，就可以传代了。一般十天左右传一代。先吸弃旧培养液，用D-Hanks液洗两遍，再加入0.25%的胰酶，加入的量以能覆盖瓶底为准。加入后轻轻摇晃培养瓶使液体覆盖瓶底，然后静置两分钟左右，最好是能在显微镜下观察，当细胞之间出现间隙且有一部分细胞呈现圆形后即可。吸去胰酶，加入含

大鼠肺成纤维细胞培养

超净台中。 2.2 解剖取肺：将乳鼠在酒精中浸泡后取出，转移至超净台上的玻璃培养皿中，用碘酒消毒胸部皮肤，再用酒精棉球脱碘。左手捏紧乳鼠颈背部皮肤以充分展露胸部，右手以眼科直剪剪开皮肤，充分撕拉开，再用酒精棉球消毒，继而以另一把眼科弯剪沿胸骨柄左下缘向上剪开肋骨，然后在切口中间横剪胸骨。用眼科镊取出肺，置于盛有PBS(含有200 U/ml青链霉素)的玻璃平皿中，冲洗去血。 2.3 用眼科剪将肺分成几个肺叶，用镊子去除周边的血凝块及纤维组织，用眼科剪剪去肺门处的支气管和血