高分子量非变性电泳蛋白质Marker(66～669 kD)现

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北京百奥莱博主要从事生物试剂的生产和销*(代"售")，产品线涵盖高分子量非变性电泳蛋白质Marker(66～669 kD)现货在内的分子生物学试剂产品，还包括PCR及荧光定量PCR、核酸提取试剂盒类、样本核酸保护试剂、核酸提取、克隆与转化、蛋白纯化、蛋白检测、免疫组化、细胞凋亡与抗体等。

名称：高分子量非变性电泳蛋白质Marker(66～669 kD)现货
规格：20次(100μl)
编号：RFT151
品牌：百奥莱博
英文名：High Molecμlar Weight Native Electrophoresis Protein Marker
产地：国产|进口
本产品是5种高纯蛋白质干粉混合物，总蛋白含量为250μg。具体蛋白含量如下：

 

蛋白名称	分子量(kD)	蛋白来源	蛋白含量(μg)
Thyroglobμlin	669	porcine thyroid	76
Ferritin	440	equine spleen	50
Catalase	232	bovine liver	36
Lactate dehydrogenase	140	bovine heart	48
Albumin	66	bovine serum	40

分子量范围为66kD-669kD，经过非变性电泳后，用考马斯亮蓝染色后可以得到分布均匀密度相近的5条带。

使用说明：
1. 取100μl非变性蛋白上样缓冲液(1×)加入到蛋白干粉混合物中，彻底混匀融化后，-20℃贮存。
2. 常温融化后，彻底混匀，上样电泳。
注：上样量根据胶的厚度和梳子的宽度确定。一般说来，0.75mm×5mm(厚度×宽度)的加样孔上样5μl，其他规格梳子请适当调整上样量。
3. 电泳结束后，染色，观察结果。
注：使用银染时，由于灵敏度高于考马斯亮蓝染色方法，可以适当降低Marker上样量，一般稀释50倍。

注意：
1. 本蛋白Marker不适用于变性蛋白电泳(SDS-PAGE)，因为在SDS存在下，含有多个亚单位的蛋白会不同程度解聚。
2. 在非变性条件下，蛋白的迁移与蛋白的电荷、蛋白形状以及蛋白分子量都有关。因此，在一种凝胶浓度下使用本Marker不能精确估计出目的蛋白的分子量。非变性电泳中，蛋白分子量的确定应该是在不同凝胶浓度下，确定出蛋白的Rf值，绘制出凝胶浓度对Rf的曲线从而判定蛋白的分子量。

储存条件：-20℃，有效期12个月。

我公司的高分子量非变性电泳蛋白质Marker(66～669 kD)现货，性价比高，货期短，送货上门，欢迎您来电咨询购买，另外，我公司还生产供应销*(代"售")下列产品：
ARB10248 人乙酰肝素酶(HPA)elisa检测 Human heparanase,hpa ELISA KIT
葡萄糖检测试剂盒(葡萄糖脱*酶比色法)   50T
丽丝胺罗丹明B D-Phenylalanine methyl ester hydrochloride 3520-42-1
肌苷酸二* Floridin 4691-65-0
*化镧 2,4-D 10025-84-0
ARB12766 小鼠NA-K-ATP酶定量分析 Mouse na-k-atp ELISA KIT
邻*二甲*(代"酸")** Proclin 300 827-27-0
ARB13123 小鼠促甲状腺素释放激素(TRH)尿液中含量检测 Mouse thyrotropin-releasing hormone,trh ELISA KIT
28-表高油菜素内酯 Potassium formate 80483-89-2
糊精水溶液(1%)   100ml
PY02-359  沙氏葡萄糖琼脂培养基  250克  
DL-半胱*酸盐*(代"酸")盐无水物 2-Methylindole 10318-18-0
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·高效高保真DNA聚合酶
编号：RFT103
英文名称：Taq plus DNA Polymerase
规格：500U(100μl)|5×500U(5×100μl)
Taq plus DNA Polymerase是由pfu DNA Polymerase和Taq DNA聚合酶按照一定的比例混合而成，具有扩增效率高，错配率低的特点。与Taq DNA聚合酶相比，Taq plus DNA聚合酶具有扩增长度长，保真性好的优点；与pfu DNA聚合酶相比，具有扩增速度快，反应效率高的优点。此酶具有比Taq DNA聚合酶约3倍的PCR可信度。该酶的大多数PCR产物3’端带碱基A，可以通过TA克隆法进行克隆。适用于要求保真性和高效率的PCR反应，大多数情况下可以替代Taq DNA 聚合酶。

产品组成：
Taq plus DNA Polymerase(5U/μl)——————————100μl
10×Taq plus PCR buffer(含Mg2＋)——————————1ml

活性定义：1单位(U) Taq plus DNA Polymerase活力定义为在74℃、30分钟内，以活性化的大马哈鱼精子DNA作为模板/引物，将10 nmol脱氧核苷酸掺入到酸不溶物质所需的酶量。

贮存液：50 mM Tris-HCl (pH 8.0); 0.1 mM EDTA; 1 mM DTT; 50 mM KCl ; Stabilizers; 50% glycerol

使用方法：
1、按照下表在0.2ml PCR管中制备反应体系：

成分	体积	终浓度
Template	0.1-1μg	as you wish
Primer 1(10μM)	1μl	200nM
Primer 2(10μM)	1μl	200nM
10×Taq plus PCR buffer	5μl	1×
dNTP Mixture(10 mM)	1μl	200μM each
Taq plus(5 U/μl)	0.5-1μl	2.5-5U
ddH2O	up to 50μl	-

2、混匀后，离心快甩将反应液收集到管底。
3、PCR仪如果没有热盖加热的话，补加25μl矿物油。
4、PCR仪上执行以下程序：

步骤	温度	时间	循环数
初始变性	94℃	1-5 min	1
变性	94℃	30 sec	25-40*
退火	Tm-5℃*	30 sec
延伸	72℃	1 min/kb
最后延伸	72℃	5 min	1

*注： PCR 反应条件视模板、引物等的结构条件不同而各异。在实际操作中需根据模板、目的片段的大小、碱基序列和引物的长短等具体情况，设定最佳的反应条件(温度、时间等)。

常见问题分析：
1、Taq plus DNA polymerase能扩增多长片段？
对简单模板(如λ噬菌体做模板)，可以扩增 kb片段；对复杂模板(如基因组DNA)，可以扩增 kb片段。
2、Taq plus DNA polymerase保真性怎样？
Taq plus含有3’-5’校对活性的聚合酶，有校对功能。保真性为普通Taq酶的3倍。
3、使用Taq plus DNA polymerase的扩增产物是否可以进行TA克隆？
由于使用Taq plus得到的PCR产物大多数带有A，可以进行TA克隆。
4、Taq plus DNA polymerase可以扩增高GC含量片段吗？
Taq plus可以扩增高GC含量片段，建议使用Taq plus配合2×GC buffer使用，而不建议使用10×Taq plus PCR buffer。

储存条件：-20℃，有效期一年。


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