细菌基因组DNA提取试剂盒厂家价格

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细菌基因组DNA提取试剂盒厂家价格是高品质的DNA纯化产品，由北京百奥莱博供应，用于科研目的生化试验项目，本产品质量好，且极具价格优势，深为用户称道，了解更多细菌基因组DNA提取试剂盒等DNA纯化产品请联*(代"系")我司咨询订购。

北京百奥莱博科技有限公司专业生产供应细菌基因组DNA提取试剂盒厂家价格，产品信息：

类别：DNA纯化

英文名：Bacterial genomic DNA Extraction Kit

产品名	产品编号	包装规格
细菌基因组DNA提取试剂盒	RFT037	50次|100次

品牌：百奥莱博

产地：国产|进口

编号：RFT037

规格：50次|100次

英文名：Bacterial genomic DNA Extraction Kit

本试剂盒采用可以特异性结合DNA的离心吸附柱和独特的缓冲液系统提取细菌(革兰氏阳性菌和阴性菌)的基因组DNA。溶菌酶能有效去除细菌细胞壁；蛋白酶K能把核酸解离出来； RNaseA能去除痕量的RNA污染；离心吸附柱能够高效、专一吸附DNA，最大限度去除杂质蛋白及细胞中其他有机化合物，提取的基因组DNA片段大，纯度高，质量稳定可靠。使用本试剂盒回收的DNA可适用于各种常规操作，包括酶切、PCR、文库构建、Southern杂交等实验。

 

试剂盒组成：

 

组份	50次	100次	贮存方式
缓冲液GA	15 ml	30 ml	室温
缓冲液GB	15 ml	30 ml	室温
去蛋白液GD(浓缩液)	18 ml	36ml	室温
漂洗液GW(浓缩液)	25 ml	25 ml	室温
洗脱缓冲液EB	15 ml	15ml	室温
蛋白酶K(20mg/ml)	1 ml	2×1 ml	-20℃
溶菌酶(5mg/ml)	1ml	2×1 ml	-20℃
RNase A(10mg/ml)	1ml	1 ml	-20℃
吸附柱CG	50个	100个	室温
收集管(2 ml)	50个	100个	室温
说明书	1份	1份

 

准备工作：

1、准备55℃和70℃水浴；无水乙醇；1.5ml灭菌离心管。

2、按照标签所示在去蛋白液GD和漂洗液GW中加入无水乙醇，混匀后盖紧瓶盖后室温贮存备用。

3、每次使用前请检查缓冲液GA，缓冲液GB和去蛋白液GD是否有沉淀生成，如果出现沉淀，37℃温浴至沉淀溶解后再使用。

 

操作步骤：

如非指出，所有离心步骤均为使用台式离心机在室温下离心。

 

1、取细菌培养液1–2 ml，10,000 g离心1分钟，尽量吸净上清；向细菌沉淀中加入180μl EB，旋涡混匀后加入18μl 溶菌酶，室温放置10-15分钟，期间间歇混匀几次。

注：溶菌酶的用量和处理时间与处理的细菌种类密切相关，用户可以根据细菌种类进行调节。如革兰氏阳性菌应将处理时间延长到30-60分钟。

2、10000g离心1分钟，吸弃大部分上清，留下约10μl液体，彻底混匀。

注：由于余留的液体较少，彻底混匀菌体不太容易，用手指弹动管壁附加枪头反复吹打既能完全混匀菌体。混匀一定要彻底，否则容易导致步骤8中离心柱堵塞。

3、向菌体沉淀中加入200μl缓冲液GA，混匀。

4、向管中加入20μl 蛋白酶K，混匀，55℃处理15-30分钟，期间间歇混匀2-3次至溶液清亮。

注：加入蛋白酶K后会产生絮状物，消化彻底的标志是絮状物完全消失，溶液变清亮。如消化不彻底，会导致步骤8中离心柱堵塞。

5、加入10μl RNaseA(10 mg/ml)溶液，混匀后室温放置2分钟。

6、加入220μl缓冲液GB，混匀，70℃放置10-30分钟(对于革兰氏阳性菌，时间应延长到60分钟)。

注：加入缓冲液GB时可能会产生白色沉淀，一般70℃放置相应时间后溶液会变清亮。如溶液未变清亮，应延长70℃处理时间。如果絮状物不能处理干净，容易导致步骤8中离心柱的堵塞。

7、加入220μl无水乙醇，充分混匀。

注：加入乙醇后会产生絮状沉淀，可用枪头反复抽打1-2次将沉淀弄碎后再上柱。如果絮状物未做处理，容易导致步骤8中离心柱的堵塞。

8、将上一步所得溶液和絮状沉淀加入到吸附柱CG中(吸附柱放入收集管中)，11000g离心5分钟，倒掉废液，吸附柱CG放入收集管中。

注：如果出现吸附柱堵塞现象，可将离心时间延长到10分钟。

9、向吸附柱CG中加入500μl去蛋白液GD(使用前请先检查是否已加入无水乙醇)，11,000 g离心2分钟，倒掉废液，吸附柱放入收集管中。

10、向吸附柱CG中加入700μl漂洗液GW(使用前请先检查是否已加入无水乙醇)，11,000 g离心60秒，倒掉废液，吸附柱放入收集管中。

11、向吸附柱CG中加入500μl 漂洗液GW，11,000 g离心60秒，倒掉废液。

12、吸附柱CG放回收集管中，11,000 g离心2分钟。

注：此步骤非常重要，其目的是将吸附柱中残余的漂洗液去除。漂洗液中乙醇的残留会影响后续的酶反应(酶切、PCR等)实验。

13、将吸附柱CG转入一个干净的离心管中，向吸附膜的中间部位悬空滴加50–100μl经70℃水浴预热的洗脱缓冲液EB，室温放置2分钟，11,000 g离心2分钟。

注意：

a.洗脱缓冲液体积最好不少于50μl，体积过小影响回收效率。

b.洗脱液的pH值对于洗脱效率有很大影响。若用水做洗脱液应保证其pH值在7.0-8.5范围内，pH值低于7.0会降低洗脱效率。

14、DNA产物-20℃保存。

 

DNA浓度及纯度检测：

基因组DNA片段的大小与样品保存时间、操作过程中的剪切力等因素有关。提取的DNA片段可用琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计检测浓度与纯度。可配制0.8-1.0％琼脂糖凝胶，使用λ/HindIII判断基因组的大小，完整的基因组大小应在23kb以上。使用分光光度计检测时， OD260/OD280比值应为1.7–1.9之间，如果洗脱时不使用洗脱缓冲液，而使用去离子水洗脱，比值可能偏低，但并不表明DNA纯度不高。

 

储存条件：室温，有效期12个月。

细菌基因组DNA提取试剂盒厂家价格专业优质供应商：北京百奥莱博科技有限公司

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编号	类别	名称
RFT160	核酸扩增(PCR)	5M甜菜碱溶液(PCR级)
RFT062	蛋白质研究	1M Tris(pH6.8)
RFT008	核酸电泳和回收	500bp DNA ladder(500～5000bp)
RFT061	蛋白质研究	10×Tris-Tricine-SDS缓冲液(干粉)
RFT191	核酸电泳和回收	50×TAE
RFT047	蛋白质研究	超低分子量蛋白Marker IV(3.3～45kD)
RFT176	抗生素类	*霉素溶液(34mg/ml)
RFT192	蛋白质研究	磷酸酶抑制剂混合物(100×)
RFT098	核酸扩增(PCR)	Long Taq DNA聚合酶
RFT038	DNA纯化	植物基因组DNA提取试剂盒
RFT059	蛋白质研究	1.5M Tris(pH8.8)
RFT078	蛋白质研究	小分子蛋白电泳试剂盒
RFT070	蛋白质研究	5×双色蛋白上样缓冲液(还原)
RFT001	核酸电泳和回收	100bp DNA ladder(100～1500bp)
RFT163	核酸扩增(PCR)	2.5mM dNTP溶液
RFT196	蛋白质研究	蛋白酶抑制剂混合物(细菌蛋白提取用)
RFT183	抗生素类	壮观霉素溶液(50mg/ml)
RFT004	核酸电泳和回收	1kb plus DNA ladder(300～10000bp)
RFT071	蛋白质研究	5×SDS-PAGE蛋白上样缓冲液(还原)
RFT076	蛋白质研究	SDS-PAGE凝胶制备及电泳试剂盒
RFT187	其他细胞生物学试剂	胰酶细胞消化液
RFT027	核酸电泳和回收	λDNA/HindIII+EcoRI(564～21226bp)
RFT024	核酸电泳和回收	DNA Marker VII(300～2500bp)
RFT097	核酸扩增(PCR)	5×加A反应液
RFT117	克隆与表达	pUC18载体

 

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