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- 详细信息
- 技术资料
- 库存:
705
- 保质期:
12个月
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
-20℃
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专业生产销*(代"售")超低分子量蛋白Marker IV(3.3~45kD)促销,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:超低分子量蛋白Marker IV(3.3~45kD)促销
产地:国产|进口
规格:10T(50μl)
品牌:百奥莱博
本产品包含2种多肽和3种低分子量蛋白质组成,分子量范围为3.3kD-45kD。可以用来判断 SDS-PAGE上多肽和小蛋白的分子量。
使用说明:
第一次收到该产品,室温融化后,彻底混匀,离心快甩将溶液完全收集到管底,根据需要适量分装成小管,-20℃贮存,每次取一小管使用;本产品每次使用前,要95℃加热处理5分钟。
一. 制胶:
I 配制分离胶
1.按照表一将不同体积的双蒸水、40%PAA(19:1)、凝胶缓冲液和乙二醇加入到小烧杯中混合。
2.加入10%APS和TEMED,立即混匀5-10秒,以使溶液充分混匀。
3.在凝胶模具中迅速灌入适量分离胶溶液,然后在分离胶溶液上轻轻覆盖一层1-3 cm的水层,使凝胶表面保持平整。
4.静置5-10分钟,待分离胶和水层之间出现一个清晰的界面表示凝胶已聚合。
表一 (一块0.75mm mini胶用量)
| 分离胶 | 浓缩胶 | |
| 18%T, 5%C /6.0ml | 5%T, 3.3%C/2 ml | |
| 40% PAA(19:1) | 2.7 ml | / |
| 40% PAA (29:1) | / | 0.25 ml |
| 4×多肽电泳凝胶缓冲液 | 1.5 ml | 0.5 ml |
| 乙二醇(电泳级) | 1.8 ml | / |
| ddH2O | / | 1.25 ml |
| 10%APS | 50-65μl | 20μl |
| TEMED | 6μl | 2μl |
注:如非必须,不要使用1.0mm和1.5mm的凝胶,尽量使用厚度0.75mm的凝胶,这样会减少电泳后染色和脱色的时间。
II 配制浓缩胶
去除覆盖在分离胶上的水层,用滤纸将残留的水吸去。
1.按照表一将不同体积的双蒸水、40%PAA(29:1)和凝胶缓冲液加入到小烧杯中混合。
2.加入10%过硫*(代"酸")铵和TEMED,立即混匀5-10秒,以使溶液充分混匀。
3.将梳子插入凝胶内,避免产生气泡。
4.静置20-30分钟装待凝胶聚合
二. 电泳:
1. 取一管分装好的Marker样品,彻底融化,95℃加热处理5分钟,充分混匀后备用。
2. 电泳前,将10×Tris-Tricine-SDS电泳缓冲液用蒸馏水稀释成1×缓冲液备用。将电泳槽的内外槽加入1×缓冲液,轻柔拔出梳子,将Marker或蛋白样品(样品已经过2×Tricine上样缓冲液处理)加入点样孔,根据表二条件进行电泳,至蓝色指示前沿至分离胶3/4位置时即可停止电泳。整个电泳过程大约需要2-3个小时。
注:如果电泳时间过短,染色时,指示前沿容易遮挡小于5kd的小肽。
表二 多肽电泳条件
| 恒电压 | 150 V |
| 起始电流 | 45-55 mA |
| 结束电流 | 10-15 mA |
| 电泳时间 | 2-3小时 |
三. 染色
根据常规实验步骤进行染色和观察。
储存条件:-20℃,有效期12个月。
关于超低分子量蛋白Marker IV(3.3~45kD)促销的更详细说明,请致电我公司咨询,我们将以最饱满的热情为您提供解答,此外,我公司专业供应下列产品:
·DNA Marker I(100~600bp)
编号:RFT018
规格:100T(2×250μl)
本产品是由6条带状双链DNA条带组成的DNA Marker,适用于琼脂糖凝胶电泳中DNA条带的分析。含有1×loading buffer,可根据实验需要,直接取2-5μl电泳,使用方便,电泳图像清晰。6条带的大小和含量分别为100bp(50ng/5μl),200bp(50ng/μl),300bp(50ng/μl),400bp(100ng/μl),500bp(50ng/μl),600bp(50ng/μl) 。该Marker适用于DNA片段大小的确定和对DNA含量的精确定量。
使用方法:
1. 取2-5μl本产品加入到琼脂糖凝胶的加样孔中就行电泳。
注:根据电泳梳子的厚度和宽度确定上样量。每1mm×1mm(厚度×宽度)加样孔上样1μl;窄齿梳子(一般为1mm×2mm)上样2μl;宽齿梳子(一般为1mm×5mm)上样5μl。如果使用厚齿梳子或宽于5mm的梳子,可以适当调整上样量。
2. 建议电泳条件:凝胶浓度为2.0-2.5%,凝胶长度5-7cm,电泳电压4-10v/cm,电泳时间20-25分钟。
3. 通过EB染色后紫外灯下观察条带。
注意事项:
1. 琼脂糖的质量对DNA的电泳有很大影响,电泳时请尽量使用质量优等的琼脂糖。
2. 请使用新鲜配制的电泳缓冲液和新鲜配制的琼脂糖凝胶进行电泳,以保证Marker良好的分离效果。
储存条件:-20℃,有效期1年。
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·5×加A反应液
编号:RFT097
英文名称:5×A-plus MasterMix
规格:20次(200μl)
本品由pfu、Pwo、Vent或KOD等有3’→5’外切酶活性的高保真DNA聚合酶扩增的PCR产物为不带A尾的平末端DNA片段,如该平末端DNA片段需要和T载体相连接,需要先利用加A反应液在平末端片段后加上A尾后才能与T载体的T头互补连接。本MasterMix提供了加A尾需要的所有成分,可以在20分钟左右完成整个过程。用于平末端片段的加A反应。
使用方法:
1、平末端PCR产物用PCR产物纯化试剂盒(无非特异扩增;货号RTP2202)或凝胶回收试剂盒纯化(有非特异扩增,货号RTP2201)回收。
2、纯化后的平末端DNA片段按照以下反应体系加A,全量为50μl:
平末端DNA片段——————0.5~5μg
5×加A反应液-——————10μl
ddH2O——————————up to 50μl
储存条件:-20℃,避免反复冻融,有效期一年。
超低分子量蛋白Marker IV(3.3~45kD)促销关键词:超低分子量蛋白Marker IV,RFT047,超低分子量蛋白Marker IV(3.3~45kD),百奥莱博
·BCA蛋白浓度试剂盒
编号:RFT057
英文名称:BCA Protein Assay Kit
规格:500次
BCA蛋白浓度测定试剂盒的原理是蛋白质分子中肽键结构在碱性环境下能与Cu2+生产络合物,并将Cu2+还原成Cu+,而BCA试剂可以特异性地与Cu+结合,形成稳定的有颜色的复合物,并在562nm处有最大的光吸收值,该复合物颜色的深浅与蛋白质浓度成正比,可以根据吸收值的大小来测定蛋白的含量。本试剂盒可以检测500个样品(使用微孔板)或50个样品(使用试管)。
试剂盒组成:
| 组份 | 包装 | 贮存方式 |
| BCA试剂A | 100 ml | RT |
| BCA试剂B | 3 ml | RT |
| 牛血清白蛋白(BSA)标准溶液(5 mg/ml) | 2×1 ml | -20℃ |
| PBS溶液 | 10 ml | 4℃ |
| 说明书 | 1份 |
产品特点:
1、灵敏度高,检测浓度下限达到25μg/ml(在20-1000μg/ml浓度范围内有较好的线性关系),最小检测蛋白量达到0.2μg,待测样品体积为1-20μl。
2、BCA法测定蛋白浓度的最大优点是蛋白浓度的测定可以耐受高浓度的去垢剂,可以兼容样品中高达5%的SDS,5%的Triton X-100,5%的Tween 20, 60, 80。但受螯合剂和略高浓度的还原剂的影响,需确保EDTA低于10mM,无EGTA,二硫苏糖醇低于1mM,β-巯基乙醇低于0.01%。
储存条件:室温,有效期12个月。
北京百莱博科技有限公司是蛋白质研究产品的专业生产供应销*(代"售")商,恭候您的咨询选购超低分子量蛋白Marker IV(3.3~45kD)促销。
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