北京RNA提取试剂现货价格

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名称：北京RNA提取试剂现货价格
规格：100ml
品牌：百奥莱博
英文名：RNA Extraction Reagent
产地：国产|进口
本试剂是从细胞和组织中提取总RNA的即用型试剂，可以提取细菌、植物、动物组织和细胞以及新鲜血液的总RNA。提取的总RNA可用于Northern blot、RT-PCR、Dot blot、RNase保护分析等分子生物学实验。

产品特点：
1 分相明显：本试剂为粉红色，便于*仿分相后区分水相和有机相。
2 结果可靠：该试剂含有强烈抑制RNase活性的物质，可靠保护RNA不降解。
3 价廉物美：其提取效果与国外进口产品相媲美，价格却低于它的三分之一。

自备试剂及耗材：
*仿、异丙醇、75%乙醇(用RNase-free 水配制)、RNase-free的水、RNase-free的耗材(Tip头，离心管等)。

操作步骤：

1、匀浆处理
组织中提取总RNA：
a.植物组织：植物叶片直接放入研钵中，加入少量液氮，迅速研磨成粉末，每50-100mg植物叶片加入1ml RNA 提取试剂。
b.动物组织：按10-30mg组织加入1ml RNA 提取试剂，用电动匀浆器或者一次性研磨杵充分匀浆。
培养细胞中提取总RNA：
a.贴壁细胞：无须胰酶消化，可直接用RNA 提取试剂进行裂解，每10cm2培养面积加1mlRNA 提取试剂。
b.悬浮细胞：可直接离心收集、裂解，每1ml RNA 提取试剂可裂解5×106动物或酵母细胞，或107细菌细胞。
血液中提取总RNA：
直接取新鲜的血液，加入3 倍体积红细胞裂解液，混匀后室温放置10分钟，9,000 g离心1分钟。彻底吸弃上清，收集白细胞沉淀。每100-200μl血液收集的白细胞沉淀加入1ml RNA提取试剂。

2、分层(Phase Separation)
根据样品，选择使用方法A或者方法B。如果不确定，则使用方法 B。
A、(细胞，血液，一般动物组织)
室温静置5 分钟，再按照1 ml RNA 提取试剂使用200μl的比例加入*仿，用力颠倒离心管以混匀；室温静置3 -5 分钟使之分层后，4℃ 12000g 离心15
分钟。
B、(植物，脂肪及肝脏等某些杂质含量较高的样品)
室温静置5 分钟后，4℃条件下12000 g 离心10 分钟，将上清移入另外一个离心管中。再按照1 ml RNA提取试剂使用200μl 的比例加入*仿，用力颠倒离心管以混匀。室温静置2 - 5 分钟使之分层后，4℃条件下12000 g 离心15 分钟。
注意：
·4℃ 离心对于降低基因组DNA 的污染是很重要的。
·杂质含量高的样品一定要使用2-B 操作。2-B 操作不仅可以将大部分杂质离心去除，也可以将大片段的基因组
DNA 离心去除，方便加入*仿后的分层，不过，如果想同时抽提总RNA 和基因组DNA，则使用2-A 操作。
·加入*仿后的混匀是非常重要的，否则静止分相易出现分相倒置，即水相在离心管下部而有机相在上部。不推荐振荡混匀，而推荐直接用手混匀：将管底斜向朝上，手斜向快速摇动，使体系成粉色乳状。

3、RNA沉淀(RNA Precipitation)
小心将上层水相(通常可吸取550μl)移至另外一个离心管中，再加入等体积冰冷的异丙醇混匀，室温放置10 - 20 分钟，4℃12000g 离心10min，弃上清，RNA沉淀于管底。
注意：
·中间层和红色下层置于 4℃ 保存，以便接下去抽提基因组DNA。
·用冰冷的异丙醇能更迅速的沉降RNA。
·取上层水相时要特别小心，绝对不要吸入白色中间层及红色下层。移取水相时要使用小体积移液器：200μl 移液器，Tip 的尖嘴要贴在管壁，慢慢松手吸出液体。
·对于脂肪类组织，包括脑组织，在上清的最上层为脂肪，取上清时不要吸入，必要时用等体积*仿对上清再抽提一次。
·如果是杂质含量高的样品，强烈建议将此步操作改为：在上清中加入一半体积的异丙醇，混匀后，再加入一半 (指上清) 体积的RNA 沉淀试剂(1.2M NaCl，0.8M 柠檬酸*)。再混匀后，室温放置10 – 20 分钟。
·弃上清后，将离心管置于离心机中离心数秒，再用移液器将残留液体小心吸出。这是最彻底的去除上清的方法，比倒掉上清后再将离心管倒扣在吸水纸上的方·法可靠得多。如果是杂质含量高的样品，强烈建议增加此步操作。如果肉眼看不见沉淀，则不要用移液器吸。

4、RNA漂洗(RNA Wash)
a.RNA 沉淀中加入1ml 75%乙醇(用RNase-free 水配制)，温和振荡离心管，悬浮沉淀。每1ml RNA提取试剂加入1ml 75％乙醇。
b.4℃ 7,500 g离心5min，弃上清。
注：转速不要高于7,500g，否则得到的RNA不易溶解。
c.短暂快速离心，用移液器小心吸弃上清，注意不要吸弃沉淀。室温放置1-2分钟晾干沉淀。
注：RNA样品不要过于干燥，否则很难溶解。

5、溶解RNA(Redissolving the RNA)
根据需要，沉淀中加入适量(一般可加50-100μl)RNase-free 水，轻弹管壁，以充分溶解RNA，-70℃保存。

储存条件：2～8℃，避光，有效期12个月。

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北京RNA提取试剂现货价格关键词：RFT034,RNA提取试剂,RNA Extraction Reagent


·羧苄青霉素溶液(500mg/ml)
编号：RFT175
英文名称：Carboxy benzyl penicillin solution
规格：5×1ml

·5×双色蛋白上样缓冲液(还原)
编号：RFT070
英文名称：5×DualColor Protein loading buffer (reducing)
规格：5×1ml
5×DualColor蛋白上样缓冲液(双染料)是5倍浓缩的SDS-PAGE凝胶电泳上样缓冲液，应用于还原型SDS-PAGE的蛋白样品制备和上样。该缓冲液中含有两种示踪染料：*酚蓝和吡啰红Y，可以指示SDS-PAGE电泳过程以及Weastern blot的转膜效率。该缓冲液已经加入DTT，可使蛋白质分子的链内二硫键和链间二硫键断裂，经考马斯亮蓝染色以后在电泳凝胶上显现清晰蛋白条带。

操作步骤
融化-混合-变性-上样
1、将5×双色蛋白上样缓冲液37℃数分钟解冻后轻轻摇匀，以确保溶液混合均匀。
2、将缓冲液与蛋白样品按照1：4的比例混匀。
3、将蛋白样品置于95℃中加热5分钟。
4、待蛋白样品充分变性后冷却至室温，快甩离心收集到管底，直接加入SDS-PAGE凝胶加样孔内电泳。

注意事项：
1．由于含有DTT，该缓冲液不适合于Native SDS-PAGE电泳。
2. 一般说来，电泳中吡啰红Y泳动速度快于*酚蓝，但在高浓度SDS-PAGE胶中(高于15%分离胶)，吡啰红Y泳动速度慢于*酚蓝。

储存条件：-20℃。


北京RNA提取试剂现货价格关键词：RFT034,RNA提取试剂,RNA Extraction Reagent


·30％丙稀酰胺溶液(29:1)
编号：RFT065
英文名称：30％ Acylamide Solution(29:1)
规格：100ml
30%丙稀酰胺(29:1)即为含30% acrylamide-bisacrylamide的水溶液，其中acrylamide和bisacrylamide的质量比例为29:1。常用于配制丙*(代"烯")酰胺凝胶(PAGE胶)，包括SDS-PAGE胶等，常用于蛋白的分离。

储存条件：4℃，避光。

·高纯度质粒提取试剂盒
编号：RFT028
英文名称：High purity Plasmid Extraction Kit
规格：100次|200次
本试剂盒采用经典的碱裂解法裂解细菌，再通过离心吸附柱在高盐状态下特异性地结合DNA的特性，可以从1–5ml大肠杆菌LB培养液中快速提取3–20μg纯净的高拷贝质粒DNA。提取的质粒可适用于各种常规操作，包括酶切、PCR、测序、连接和转化等实验。然而，对质粒纯度要求更高的转染实验(要求无内毒素)，此试剂盒不能达到要求。另外，尽管该试剂盒可以抽提较大的质粒(>10kb)，但我们不推荐使用。如果一定要使用，请参考以下方法：加大菌体使用量(使用5–10 ml过夜培养物)，同时按照比例增加P1、P2、P3的用量；洗脱缓冲液应在70℃预热，在吸附和洗脱时可以适当的延长时间，以增加提取效率，其它步骤相同。

本试剂盒使用了有颜裂解液，菌体裂解是否完全一目了然。由于判断菌体裂解和中和是否彻底更主要取决于操作者的经验，所以我们增加了有颜裂解液(一种能使裂解/中和体系变换颜色的试剂)来帮助观察裂解/中和的程度。加入P1后，有颜裂解液使菌液变为浑浊的红色；加入P2后，有颜裂解液立即使溶液变为澄清的红色，裂解是否完全只要观察红色溶液是否澄清，如果红色非常均一，表明裂解充分；在完全裂解的体系中加入P3混匀后，体系立即变为黄色，任何红色的残留表明没有完全混匀或者中和不彻底。

本试剂盒增加了去蛋白液PD，能更加彻底地去除蛋白污染，得到纯度更高的质粒。

试剂盒组份：

 

试剂盒组成	100次	200次	贮存方式
RNase A	300μl	600μl	-20℃
有颜裂解液	600μl	2×600μl	室温
溶液P1	30 ml	60 ml	室温(加入RNase A后2-8℃保存)
溶液P2	30 ml	60 ml	室温
溶液P3	40 ml	80 ml	室温
去蛋白液PD	60 ml	120 ml	室温
漂洗液PW	25 ml	2×25 ml	室温
洗脱缓冲液EB	15 ml	15 ml	室温
质粒吸附柱CP	100个	2×100个	室温
收集管(2 ml)	100个	2×100个	室温
说明书	1份	1份

储存条件：室温，有效期12个月。

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