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文献和实验细菌生长,明显增强除菌效果。 目前市场上有多个厂家提供支原体去除&预防试剂,包括GenDEPOT、Roch、Bioland、Invivogen、MP Biomedials等。 在选购和使用时,我们需要注意关键几点:首先,支原体的去除或者预防效果,细胞毒性大小;其次,试剂的抗菌谱,是否能去除多种支原体,是否可以同时去除细菌,真菌等;再次,要考虑操作使用是否方便,因为如果使用起来比较麻烦,首先是费时费力,另外可能会带来二次污染;第四,价格因素,找到物美价廉的产品才是王道。 美国
这在我们实验室是不可能使用的方法;有些文章是联合使用两种抗生素来清除支原体,简单方便,我就试了这种。 关于检验支原体污染,有PCR法、培养法、DNA荧光染色法,我选择的是DNA荧光染色法,将冰醋酸和甲醇按1:3混合,固定细胞两次,每次10分钟,然后用1μg/ml的Hoechst33258染色20分钟,紫外激发,确认了我的细胞中生长最好的都有支原体污染。于是我花1.5元买了环丙沙星(ciprofloxacin)药片,稀释成50μg/ml,离心去除淀粉之类的不溶性辅料,加入培基中,稀释成10μg/ml,跟正常
分析可以 确定细胞培养物中是否存在交叉污染。 请勿在常规细胞培养中使用抗生素,因为抗生素的连续使用会促进耐药菌株的生长,并导致轻度污染持续存在。一旦将抗生素从培养基中去除,就会发展成大规模污染。抗生素的持续使用还可能掩盖支原体感染和其他隐性污染。此外,某些抗生素可能会与细胞发生交叉反应,干扰正在研究的细胞过程。 抗生素只能作为对付污染的最后手段且只能短期使用,并应尽快从培养物中去 除。如果长期使用抗生素,则应同时进行无抗生素培养,作为检测隐性感染的对照。 文章来源:赛默飞世尔科技
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