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- 详细信息
- 技术资料
- 库存:
749
- 英文名:
2×Bes Taq MasterMix(With Dye)
- 保质期:
长期
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
-20℃
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专业生产销*(代"售")北京2×Bes Taq MasterMix(含染料)促销,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:北京2×Bes Taq MasterMix(含染料)促销
规格:1ml|5ml|25ml
产地:国产|进口
编号:WE0104
本品是由Bes Taq DNA Polymerase、PCR Buffer、Mg2+、dNTPs以及PCR稳定剂和增强剂组成的预混体系,浓度为2×。Es Taq DNA Polymerase具有扩增效率高、错配率低的优良性能。独创的MasterMix配方使整个反应体系非常稳定,超过98%的PCR扩增能一次成功,同时复杂模板也能得到有效扩增,并可最大限度地减少人为误差和污染。本产品已加入染料(蓝色),反应结束后可直接进行电泳检测,无需再使用上样缓冲液。扩增得到的PCR产物3"端附有一个“A”碱基,因此可直接用于T/A克隆。主要适用于常规PCR反应和对高保真性有要求的基因克隆等实验。
产品组成:
| 组份 | 1ml | 5ml | 25ml |
| 2×Bes Taq MasterMix(With Dye) | 1ml | 5×1ml | 5×5ml |
| ddH2O | 1ml | 5×1ml | 5×5ml |
注意:2×Bes Taq MasterMix含有Bes Taq DNA Polymerase,3 mM MgCl2 和400μM each dNTP。
质量控制:
1、经检验无外源核酸酶活性;
2、PCR方法检测无宿主残余DNA;
3、能有效地扩增多种基因组中的单拷贝基因。
使用方法:
以下举例为以人基因组DNA为模板,扩增1 kb的片段的PCR反应体系和反应条件,实际操作中应根据模板、引物结构和目的片段大小不同进行相应的改进和优化。
1、PCR反应体系
| 试剂 | 50μl反应体系 | 终浓度 |
| 2×Bes Taq MasterMix(With Dye) | 25μl | 1× |
| Forward Primer,10μM | 2μl | 0.4μM |
| Reverse Primer,10μM | 2μl | 0.4μM |
| Template DNA | <0.5μg | <0.5μg/50μl |
| ddH2O | up to 50μl |
注意:引物浓度请以终浓度0.1-1.0μM作为设定范围的参考。扩增效率不高的情况下,可提高引物的浓度;发生非特异性反应时,可降低引物浓度,由此优化反应体系。
2、PCR反应条件
| 步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
| 预变性 | 94℃ | 2 min | |
| 变性 | 94℃ | 30 s | 25-35 个循环 |
| 退火 | 55-65℃ | 30 s | |
| 延伸 | 72℃ | 30 s | |
| 终延伸 | 72℃ | 2 min |
注意:
1)一般实验中退火温度比扩增引物的熔解温度Tm低5℃,无法得到理想的扩增效率时,适当降低退火温度;发生非特异性反应时,提高退火温度,由此优化反应条件。
2)延伸时间应根据所扩增片段大小设定,Bes Taq DNA Polymerase的扩增效率为2 kb/min。
3)可根据扩增产物的下游应用设定循环数。如果循环次数太少,扩增量不足;如果循环次数太多,错配机率会增加,非特异性背景严重。所以在保证产物得率的前提下应尽量减少循环次数。
储存条件:-20℃,避免反复冻融。
更多有关北京2×Bes Taq MasterMix(含染料)促销的价格及使用说明等,请联*(代"系")我们的业务经理王欣女士咨询,我公司还销*(代"售")以下产品:
·BaldStar TaqMan Mixture(dUTP+UNG酶)(低含量ROX校正染料)
编号:WE0155
英文名称:BaldStar TaqMan Mixture(dUTP+UNG)(Low ROX)
规格:5ml
本品是专用于探针法(TaqMan,Molecular Beacon等)实时荧光定量PCR的预混体系,浓度为2×,包含 BaldStar Taq DNA polymerase、PCR Buffer、dNTPs(dTTP全部被dUTP所取代)、UNG酶和Mg2+,操作简单方便。主要用于基因组DNA靶序列和RNA反转录后的cDNA靶序列的检测,如基因表达分析,拷贝数分析,SNP基因型分析等。本产品中运用了dUTP-UNG防污染系统,在PCR反应体系配制过程中加入了dUTP,因此就形成了含有dU碱基的扩增产物。而此产物可以在下次进行PCR反应前,由PCR体系中的UNG酶处理消除。这样就有效的去除了PCR产物的残留污染,大大降低了由于扩增产物污染而导致的假阳性。UNG酶在PCR循环中的预变性步骤即可被灭活,因此不会影响新的含dU碱基PCR产物的形成。本品含有的 BaldStar Taq DNA Polymerase是一种经化学修饰的、全新高效热启动酶,在常温下没有聚合酶活性,有效避免在常温条件下由引物和模板非特异性结合或引物二聚体而产生的非特异性扩增,酶的激活须在95℃下孵育10分钟。独特的 PCR缓冲体系与热启动酶的组合,显著提高了PCR的扩增效率,荧光信号更强,灵敏度更高,可以检测单拷贝的模板。使用本产品可以得到更广的线性范围,对目的基因定量更准确。
ROX染料用于校正定量PCR仪孔与孔之间产生的荧光信号误差,一般用于ABI、Stratagene等公司的Real Time PCR 扩增仪。不同仪器的激发光学系统有所不同,因此ROX染料的浓度必须与相应的荧光定量PCR仪相匹配。
不需要ROX校正的仪器(WE0154):
Roche LightCycler 480,Roche LightCyler 96,Bio-rad iCyler iQ,iQ5,CFX96等。
需要Low ROX校正的仪器(WE0155):
ABI Prism7500/7500 Fast,QuantStudio® 3 System,QuantStudio® 5 System,QuantStudio® 6 Flex System,QuantStudio® 7 Flex System,ViiA 7 system,Stratagene Mx3000/Mx3005P,Corbett Rotor Gene 3000等。
需要High ROX校正的仪器(WE0156):
ABI Prism7000/7300/7700/7900,Eppendorf,ABI Step One/Step One Plus等。
产品组成:
| 组份 | WE0154-5ml | WE0155-5ml | WE0156-5ml |
| 2×BaldStar TaqMan Mixture(UNG) | 5×1ml | 5×1ml | 5×1ml |
| 50×Low ROX | - | 200μl | - |
| 50×High ROX | - | - | 200μl |
| ddH2O | 5×1ml | 5×1ml | 5×1ml |
注意事项:
1、使用前请上下颠倒轻轻混匀,尽量避免起泡,并经短暂离心后使用。
2、避免反复冻融本品,反复冻融可能使产品性能下降。本产品长期保存可置于-20℃,避光。如果在短期内需要频繁使用,可在2~8℃保存。
使用方法:
以下举例为常规PCR反应体系和反应条件,实际操作中应根据模板、引物结构和目的片段大小不同进行相应的改进和优化。
1、PCR反应体系
| 试剂 | 50μl反应体系 | 终浓度 |
| 2×BaldStar TaqMan Mixture(UNG) | 25μl | 1× |
| Forward Primer,10μM | 1μl | 0.2μM |
| Reverse Primer,10μM | 1μl | 0.2μM |
| Probe,10μM | 1μl | 0.2μM |
| Template DNA | 2μl | |
| 50×Low ROX or High ROX(可选) | 1μl | 1× |
| ddH2O | up to 50μl |
注意:
1)通常引物浓度以0.2μM可以得到较好结果,可以在0.1-1.0μM作为设定范围的参考。
2)使用的探针浓度,与使用的荧光定量PCR仪、探针种类、荧光标记物质种类有关,实际使用时请参照仪器说明书,或各荧光探针的具体使用要求进行浓度的调节。
3)通常DNA模板的量以10-100ng基因组DNA或1-10ng cDNA为参照,因不同物种的模板中含有的目的基因拷贝数不同,可对模板进行梯度稀释,以确定最佳的模板使用量。
4)不同仪器的激发光学系统有所不同,根据使用荧光定量的仪器选择加入50× Low ROX or 50×High ROX。
2、PCR反应程序
注意!本产品预变性反应必须在95℃ 10分钟下完成!
两步法PCR:
| 步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
| UNG酶消化 | 37℃/50℃ | 2-10 min | |
| 预变性 | 95℃ | 10 min | |
| 变性 | 95℃ | 15 s | 35-40个循环 |
| 退火/延伸 | 60℃ | 1 min |
注意:
1)本产品所采用的热启动酶须在预变性95℃、10 min条件下实现酶的活化。
2)建议采用两步法PCR反应程序,若因使用Tm值较低的引物等原因,得不到良好的实验结果时,可尝试进行三步法PCR扩增。
三步法PCR:
| 步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
| UNG酶消化 | 37℃/50℃ | 2-10 min | |
| 预变性 | 95℃ | 10 min | |
| 变性 | 95℃ | 15 s | 35-40个循环 |
| 退火 | 55℃-65℃ | 30s | |
| 延伸 | 72℃ | 30s |
储存条件:-20℃,避免反复冻融
北京2×Bes Taq MasterMix(含染料)促销关键词:2×Bes Taq MasterMix(With Dye),WE0104,2×Bes Taq MasterMix(含染料)
·HRP标记兔抗绵羊IgG(H+L)
编号:WE0363
英文名称:Rabbit Anti-Sheep IgG, Peroxidase Conjugated
规格:100μl
本产品为过氧化物酶标记的经亲和纯化的兔抗体,特异识别绵羊IgG ,检测灵敏度高,本底低,对其他种属IgG无明显交叉反应,可用于Western Blot、ELISA 和免疫组化检测。酶标记抗体,是一类广泛用于免疫学、分子生物学及临床医学各个分支学科中的免疫化学制剂,具有特异、敏感和安全的特点。
免疫原:绵羊IgG
缓冲液:0.01M PBS,50%甘油,pH7.6
稳定剂:15 mg/ml BSA(不含IgG和蛋白酶)
防腐剂:无(叠氮*是HRP抑制剂,抗体稀释液中请避免使用叠氮*作为防腐剂)
应用范围:
WB ECL发光检测(1:10000-200000)
WB 显色检测(1:5000-100000)
ELISA(1:5000-100000)
Immunohisto/Cytochemistry(1:500-5000)
·游离DNA样本保存管(5ml,PET)
编号:WE0397
英文名称:Cell-Free DNA Storage Tube(PET,5ml)
规格:5ml×5支|5ml×50支
本保存管为PET材质,质量轻,便于运输,管壁破损机率极小,标本在运输、离心及试验过程发生泄漏的可能性极小。
cfDNA样本保存管可直接用于血样的采集与运输,并稳定其中的cfDNA(Cell-Free DNA)。产品中的保存液由EDTA抗凝剂和特殊的保护剂组成,能够有效抑制血浆中的核酸酶,并避免血液有核细胞中基因组DNA的释放。
使用cfDNA样本保存管采集血液样本之后,在6-35℃可稳定保存cfDNA长达14天,为血液样本的运输及储存提供了极大的便利。
cfDNA样本保存管中血液样本可按大多数商业化试剂盒进行cfDNA提取,提取后的cfDNA可应用于下游的检测与分析。同时,该产品也能够用于血液有核细胞中的基因组DNA的保存。
北京2×Bes Taq MasterMix(含染料)促销关键词:2×Bes Taq MasterMix(With Dye),WE0104,2×Bes Taq MasterMix(含染料)
磷酸酶抑制剂混合物片剂 1片|10片|20片
超低分子量蛋白Marker(3.3-22KD) 10次
BL0113 10000*gelred 核酸染料
HC0163 双面离心管架
Western封闭液(尼龙膜) 100ml
BL0954 胶体金标记羊抗大鼠IgG抗体
BFD066 小反刍兽疫抗体检测卡
丙*(代"烯")葡聚糖凝胶S-100 HR MU-α-Gal 65546-95-4
2869-83-2 Janus Green B 詹纳斯绿B
ARB11632 人淋巴细胞功能相关抗原2(LFA-2/CD2)免费代测 Human lymphocyte function associated antigen 2,lfa-2 ELISA KIT
乙酰辅酶A 2-Aminothiazol-4-acetic acid 102029-73-2
胰激肽原酶 1kb DNA LadderⅡ 9001-01-8
ARB10266 人儿茶酚胺(CA)检测服务 Human catecholamine,ca ELISA KIT
BTN130871 一站式MBP标签蛋白纯化套装 One-Stop MBP-Tagged Protein Miniprep Pack
我公司强烈推荐核酸扩增(PCR)系列产品,热情期待您的咨询选购北京2×Bes Taq MasterMix(含染料)促销。
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