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- 库存:
348
- 英文名:
2×Taq MasterMix(With Dye)
- 保质期:
长期
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
-20℃
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博主要从事生物试剂的生产和销*(代"售"),产品线涵盖北京现货WE0102型2×Taq MasterMix(含染料)特价优惠在内的分子生物学试剂产品,还包括PCR及荧光定量PCR、核酸提取试剂盒类、样本核酸保护试剂、核酸提取、克隆与转化、蛋白纯化、蛋白检测、免疫组化、细胞凋亡与抗体等。
名称:2×Taq MasterMix(含染料)
规格:1ml|5ml|25ml
英文名:2×Taq MasterMix(With Dye)
产地:国产|进口
编号:WE0102
品牌:百奥莱博
Taq MasterMix是由Taq DNA Polymerase、PCR Buffer、Mg2+、dNTPs以及PCR稳定剂和增强剂组成的预混体系,浓度为2×。预配好的PCR混合液可根据使用量的多少调节扩增产物的特异性和得率,使操作更加简单快捷,并可最大限度地减少人为误差和污染。独创的MasterMix配方使扩增产物得率高,重复性强,稳定性好。本产品已加入染料(蓝色),反应结束后可直接进行电泳检测,无需再使用上样缓冲液。扩增得到的PCR产物3"端附有一个“A”碱基,因此可直接用于T/A克隆。主要适用于PCR法扩增DNA、DNA序列测定等实验。
产品组成:
| 组份 | 1ml | 5ml | 25ml |
| 2×Taq MasterMix(With Dye) | 1ml | 5×1ml | 5×5ml |
| ddH2O | 1ml | 5×1ml | 5×5ml |
注意:2×Taq MasterMix含有Taq DNA Polymerase, 3 mM MgCl2 和400μM each dNTP。
质量控制:
1、经检验无外源核酸酶活性;
2、PCR方法检测无宿主残余DNA;
3、能有效地扩增多种基因组中的单拷贝基因。
使用方法:
以下举例为以人基因组DNA为模板,扩增1 kb的片段的PCR反应体系和反应条件,实际操作中应根据模板、引物结构和目的片段大小不同进行相应的改进和优化。
1、PCR反应体系:
| 试剂 | 50μl反应体系 | 终浓度 |
| 2×Taq MasterMix(With Dye) | 25μl | 1× |
| Forward Primer,10μM | 2μl | 0.4μM |
| Reverse Primer,10μM | 2μl | 0.4μM |
| Template DNA | <0.5μg | <0.5μg/50μl |
| ddH2O | up to 50μl |
注意:引物浓度请以终浓度0.1-1.0μM作为设定范围的参考。扩增效率不高的情况下,可提高引物的浓度;发生非特异性反应时,可降低引物浓度,由此优化反应体系。
2、PCR反应条件:
| 步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
| 预变性 | 94℃ | 2 min | |
| 变性 | 94℃ | 30 s | 25-35 个循环 |
| 退火 | 55-65℃ | 30 s | |
| 延伸 | 72℃ | 30 s | |
| 终延伸 | 72℃ | 2 min |
注意:
1)一般实验中退火温度比扩增引物的熔解温度Tm低5℃,无法得到理想的扩增效率时,适当降低退火温度;发生非特异性反应时,提高退火温度,由此优化反应条件。
2)延伸时间应根据所扩增片段大小设定,本产品Taq DNA Polymerase的扩增效率为2 kb/min。
3)可根据扩增产物的下游应用设定循环数。如果循环次数太少,扩增量不足;如果循环次数太多,错配机率会增加,非特异性背景严重。所以在保证产物得率的前提下应尽量减少循环次数。
储存条件:-20℃,避免反复冻融。
关键词:2×Taq MasterMix(With Dye),WE0102,2×Taq MasterMix(含染料)
关于北京现货WE0102型2×Taq MasterMix(含染料)特价优惠的更详细说明,请致电我公司咨询,我们将以最饱满的热情为您提供解答,此外,我公司专业供应下列产品:
| 编号 | 名称 |
| WE0341 | HRP标记抗His标签多克隆抗体 |
| WE0307 | 低背景ECL化学发光检测试剂盒 |
| WE0172 | 新型固定组织基因组DNA提取试剂盒 |
| WE0402 | 唾液DNA样本保存管 |
| WE0195 | miRNA提取试剂盒 |
| WE0164 | 高纯质粒大提试剂盒 |
| WE0168 | 琼脂糖凝胶DNA回收试剂盒 |
| WE0346 | 抗GFP标签单克隆抗体 |
| WE0284 | 1.5 M Tris-HCl缓冲液(pH8.8) |
| WE0160 | 超纯dNTP混合液(10 mM) |
| WE0327 | Alexa Fluor 488/PI细胞凋亡检测试剂盒 |
| WE0111 | BaldStar Taq DNA Polymerase |
| WE0314 | 免疫组化试剂盒(兔源一抗) |
| WE0350 | 抗HA标签多克隆抗体 |
| WE0286 | SDS-PAGE浓缩胶缓冲液(4×) |
| WE0363 | HRP标记兔抗绵羊IgG(H+L) |
| WE0367 | 罗丹明标记驴抗小鼠IgG(H+L) |
| WE0143 | 快速实时荧光定量PCR预混体系(高含量ROX校正染料) |
| WE0154 | BaldStar TaqMan Mixture(dUTP+UNG酶) |
| WE0150 | 一步法逆转录实时荧光定量PCR试剂盒(高含量ROX校正染料) |
| WE0318 | 柠檬酸缓冲液(IHC抗原修复液,100×) |
| WE0233 | DNA文库定量试剂盒(Ion Torrent平台) |
| WE0181 | 酵母基因组DNA提取试剂盒 |
| WE0358 | DyLight594标记山羊抗人IgG(H+L) |
| WE0186 | 鼠尾基因组DNA提取试剂盒 |
| WE0206 | 磁珠法琼脂糖凝胶DNA回收试剂盒 |
| WE0328 | Annexin V-PE/7-AAD凋亡流式检测试剂盒 |
| WE0179 | 口腔拭子基因组DNA提取试剂盒 |
| WE0329 | 抗c-Myc标签抗体琼脂糖介质 |
| WE0371 | 生物素化驴抗人IgG(H+L) |
| WE0382 | RRX标记山羊抗兔IgG(H+L) |
| WE0325 | Annexin V-FITC/PI细胞凋亡检测试剂盒 |
| WE0374 | 罗丹明山羊抗大鼠IgG(H+L) |
| WE0370 | HRP标记驴抗鸡IgY(IgG)(H+L) |
| WE0103 | Bes Taq DNA Polymerase |
| WE0214 | 溶菌酶 |
| WE0145 | 实时荧光定量PCR的预混体系(探针法)(低含量ROX校正染料) |
| WE0299 | NC膜(0.22μM) |
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Real-time qPCR 手册——手把手教你从菜鸟到高手
反应条件不够优化:可适当降低退火温度或改为三步扩增法。 反应体系中有 PCR 反应抑制物:一般是加入模板时所引入,应先把模板适度稀释,再加入反应体系中,减少抑制物的影响。 7. 同一试剂在不同仪器上产生不同的曲线,如何判断? 判断标准:扩增效率,灵敏度,特异性 如果扩增效率在 90%-110%,都是特异性扩增,都可以把数据用于分析。 8. 扩增曲线的异常?比如「S」型曲线? 参比染料设定不正确 (MasterMix 不加参比染料时,选 NONE) 模板的浓度
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