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- 详细信息
- 技术资料
- 库存:
639
- 英文名:
Protein Silver Stain Kit
- 保质期:
长期
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
室温
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专注于生命科学和生物技术领域,致力于为客户提供包括WE0281型蛋白银染试剂盒现货价格在内的一系列分子生物学试剂产品,并提供一系列相关的技术服务。
名称:WE0281型蛋白银染试剂盒现货价格
编号:WE0281
英文名:Protein Silver Stain Kit
品牌:百奥莱博
规格:20次
本试剂盒采用高灵敏度的银染染料,可应用于变性胶及非变性胶的蛋白染色,具有目的条带清晰、背景低,操作时间可灵活控制的优点。另外,本试剂盒增加了一步短时敏化作用步骤,可明显降低背景及提升目的条带的亮度。
试剂盒组成:
| 组份 | 20次 |
| Silver Stain Sensitizer(500×) | 2×1ml |
| Silver Stain Enhancer | 3ml |
| Silver Stain | 2×250ml |
| Silver Stain Developer | 4×125ml |
注意事项:
1、请提前准备50ml固定液(超纯水:乙醇:冰醋酸=6:3:1)、50ml洗脱液(10%乙醇)和50ml终止液(5%的冰醋酸)。
2、操作时请使用去离子水和洁净的玻璃或塑料器皿,须戴一次性手套进行操作。
3、整个银染过程需在摇床上进行,摇床转速约60 rpm左右。
4、需自备乙醇,冰醋酸。
操作步骤:
以下操作步骤中各溶液的用量以大小为8.5×5.5 cm、厚度为1.0 mm的凝胶为例,以凝胶全部浸没到溶液为准,置于摇床上操作,一般用量25ml。对于大型凝胶,各溶液的使用量需按凝胶体积的比列放大。
请提前准备好50ml固定液(超纯水:乙醇:冰醋酸=6:3:1)、50ml洗脱液(10%乙醇)和50ml终止液(5%的冰醋酸)。
1、水洗:电泳完成后,用超纯水洗胶2次,每次洗涤5分钟。
2、固定:用25ml固定液固定凝胶2次,每次固定15分钟。
3、洗脱:用洗脱液洗胶2次,每次洗涤5分钟。
4、水洗:用超纯水洗胶2次,每次洗涤5分钟。
5、增敏:将上一步洗好的凝胶置于银染增敏工作液中,室温下准确孵育1分钟后用超纯水洗胶3次,每次洗涤20秒。
银染增敏工作液的配制:取50μl Silver Stain Sensitizer(500×)加入到25ml超纯水中,混匀。
6、银染:弃去超纯水,将凝胶置于银染工作液中孵育30分钟。
银染工作液的配制:取25ml Silver Stain加入50μl Silver Stain Enhancer混匀。
7、水洗:用超纯水快速洗胶2次,每次洗涤准确控制为20秒。
8、显影:立即将洗好的凝胶浸没在显影液中,室温孵育2-3分钟,直至蛋白条带显示清晰。
显影液的配制:取25ml Silver Stain Developer加入30μl Silver Stain Enhancer混匀。
注意:显影30秒内,蛋白条带开始显现,继续显影至2-3分钟。若蛋白条带显色较浅,可适当延长显影时间至5分钟及以上。
9、终止:用终止液洗去凝胶上的显影液后,将凝胶浸泡在新的终止液中反应10分钟。
实验图例
BSA蛋白样品经过10%的SDS-PAGE凝胶电泳后银染结果
BSA蛋白分子量约为66 kD,上样量从左到右分别为50ng,10ng,5ng
储存条件:室温。
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WE0281型蛋白银染试剂盒现货价格关键词:蛋白银染试剂盒,Protein Silver Stain Kit,WE0281
·酵母质粒提取试剂盒
编号:WE0165
英文名称:Yeast Plasmid Extraction Kit
规格:50次
本试剂盒在普通碱裂解法的基础上进行了改进,全新的Lyticase可以有效的破除酵母细胞壁,新型硅基质膜和缓冲液系统能高效专一的结合质粒DNA,同时可以最大限度的去除蛋白及其他杂质,整个过程方便快捷,不需使用有毒有害试剂,可以同时处理多个样品。除适用于酵母细胞外,也可用于大肠杆菌。使用本试剂盒提取的质粒DNA可用于各种分子生物学实验,如连接、转化、测序和文库筛选等。
试剂盒组成:
| 组份 | 50次 |
| Buffer P1 | 15ml |
| Buffer P2 | 15ml |
| Buffer N3 | 20ml |
| Buffer PS | 15ml |
| Buffer PB | 10ml |
| Buffer PW(浓缩液) | 10ml |
| Buffer EB | 10ml |
| RNase A(10 mg/ml) | 150μl |
| 玻璃珠 | 2g |
| 吸附柱DM及收集管 | 50套 |
自备试剂:无水乙醇,异丙醇。
实验前准备及重要注意事项/strong>:
1、所有组分可在干燥、室温(15~30℃)环境稳定保存1年,将吸附柱置于2~8℃可保存更长时间,加入RNase A的Buffer P1 置于2~8℃可稳定保存6个月。
2、第一次使用前,将RNase A溶液全部加入到Buffer P1中,混匀,置于2–8℃保存。
3、第一次使用前应按照试剂瓶标签的说明先在Buffer PW中加入无水乙醇。
4、使用前请检查Buffer P2、Buffer N3是否出现结晶或者沉淀,如有结晶或者沉淀现象,可在37℃水浴几分钟,即可恢复澄清。
5、注意不要直接接触Buffer P2和Buffer N3,使用后应立即盖紧盖子。
6、提取的质粒量与酵母菌株、质粒拷贝数、培养条件等因素有关,通常酵母质粒拷贝数都很低,通过电泳或分光光度计法都很难检测到。
操作步骤:
1、取1-5ml酵母培养物(最多不超过5×107个酵母细胞,一般对于酿酒酵母OD600=1.0时,相当于1-2×107细胞/ml)加入离心管(自备)中,12000rpm(~~13400×g)离心30秒,收集菌体沉淀,尽量吸弃上清。
2、向菌体中加入250μl Buffer P1(请先检查是否已加入RNase A),重悬沉淀。
3、在以上混合物中加入40 mg的玻璃珠(Glass Beads),涡旋震荡10分钟。
4、向离心管中加入250μl Buffer P2,温和地上下颠倒混匀6-8次,室温放置5-10分钟,此时菌液应变得清亮粘稠。
注意:温和混匀,不要剧烈震荡,以免打断基因组DNA,造成提取的质粒中混有基因组DNA片段。如果溶液未变得清亮,提示可能菌量过大,裂解不彻底,应减少菌体量。
5、向离心管中加入350μl Buffer N3,立即温和地上下颠倒混匀6-8次,此时出现白色絮状沉淀,12000rpm离心20分钟。
注意:Buffer N3加入后应立即混匀,避免产生局部沉淀。
6、柱平衡: 向已装入收集管的吸附柱DM中加入200μl Buffer PS,12000rpm离心1分钟,倒掉收集管中的废液,将吸附柱重新放回收集管中。
7、将步骤5所得上清加入到已装入收集管的吸附柱中,注意不要吸出沉淀。
注意:吸附柱的最大容积为750μl,溶液分2次过柱。
8、12000rpm离心1分钟,倒掉收集管中的废液,将吸附柱放回收集管中。
9、向吸附柱加入150μl Buffer PB,12000rpm离心1分钟,倒掉收集管中的废液,将吸附柱重新放回收集管中。
10、向吸附柱中加入750μl Buffer PW(请先检查是否已加入无水乙醇),12000rpm离心1分钟,倒掉收集管中的废液。
11、将吸附柱重新放回收收集管中,12000rpm离心2分钟,倒掉废液。将吸附柱置于室温数分钟,以彻底晾干。
注意:这一步的目的是将吸附柱中残余乙醇去除,乙醇残留会影响后续的酶促反应(酶切、PCR等)。
12、将吸附柱置于一个新的离心管中,向吸附膜的中间部位悬空滴加50-100μl Buffer EB,室温放置数分钟,13000rpm离心1分钟,将质粒溶液收集到离心管中。-20℃保存质粒。
注意:
1)为了增加质粒的回收效率,可将得到的溶液重新加入到吸附柱中,室温放置数分钟,13000rpm离心1分钟,将质粒溶液收集到离心管中。
2)质粒拷贝数较低或>10 kb时,Buffer EB在65-70℃水浴预热,可以增加提取效率。
3)通常酵母质粒拷贝数很低,通过电泳或者分光光度计法都很难检测到。提取的质粒如果用于下一步实验,通常建议使用量为:用作PCR模板可使用1–5μl质粒,用于转化大肠杆菌可使用5–10μl质粒。
4)转化大肠杆菌时应使用商业化高转化效率的感受态细胞。
储存条件:室温(15~30℃)
WE0281型蛋白银染试剂盒现货价格关键词:蛋白银染试剂盒,Protein Silver Stain Kit,WE0281
·Tris-甘*酸转膜缓冲液(pH8.3,10×)
编号:WE0311
英文名称:Tris-Glycine Transfer Buffer(pH8.3, 10×)
规格:500ml
·HRP标记山羊抗小鼠IgG(H+L)
编号:WE0393
英文名称:Goat Anti-Mouse IgG, HRP Conjugated
规格:100μl
本产品为辣根过氧化物酶标记的经亲和纯化的山羊抗体,特异识别小鼠IgG重链和轻链,检测灵敏度高,本底低,对其他种属IgG无明显交叉反应,可用于Western Blot、ELISA和免疫组化检测。酶标记抗体,是一类广泛用于免疫学、分子生物学及临床医学各个分支学科中的免疫化学制剂,具有特异、敏感和安全的特点。
免疫原:小鼠IgG
缓冲液:0.01M PBS,50%甘油,pH7.6
稳定剂:15 mg/ml BSA(不含IgG和蛋白酶)
防腐剂:无(叠氮*是HRP抑制剂,抗体稀释液中请避免使用叠氮*作为防腐剂)
应用范围:
WB(1:2000-10000)
ELISA(1:2000-20000)
IHC(1:100-200)
·游离DNA样本保存管(10ml)
编号:WE0398
英文名称:Cell-Free DNA Storage Tube(10ml)
规格:5ml×5支|5ml×50支
游离DNA保存管可直接用于血样的采集与运输,并稳定其中的游离DNA(Cell-Free DNA),是由EDTA抗凝剂和特殊的保护剂组成,能够有效抑制血浆中的核酸酶,并避免血液有核细胞中基因组DNA的释放。该产品适用于无创产前筛查与一些疾病的早期诊断相关的研究。
游离DNA保存管中血液样本可按大多数商业化试剂盒进行游离DNA提取,提取后的游离DNA可应用于下游的检测与分析。同时,该产品也能够用于血液有核细胞中的基因组DNA的保存。
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