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676
- 英文名:
Anti-His Mouse Monoclonal Antibody Agarose
- 保质期:
长期
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专业生产销*(代"售")WE0330型抗His标签抗体琼脂糖介质厂家价格,我公司供应的细胞生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:WE0330型抗His标签抗体琼脂糖介质厂家价格
英文名:Anti-His Mouse Monoclonal Antibody Agarose
规格:100μl|500μl
编号:WE0330
产地:国产|进口
抗His标签免疫亲和介质是将抗His标签的单克隆抗体共价偶联到琼脂糖上,这种琼脂糖能进行免疫沉淀或者免疫共沉淀,能检测包含有His标签的蛋白。
抗体类型:鼠单克隆抗体IgG1
免疫原:人工合成多肽序列
应用范围:IP
关于WE0330型抗His标签抗体琼脂糖介质厂家价格的更详细说明,请致电我公司咨询,我们将以最饱满的热情为您提供解答,此外,我公司专业供应下列产品:
·SuperSYBR Mixture(低含量ROX校正染料)
编号:WE0134
英文名称:SuperSYBR Mixture(Low ROX)
规格:1ml|5ml
本品是专用于染料法(SYBR Green I)实时荧光定量PCR的预混体系,浓度为2×,包含 BaldStar Taq DNA Polymerase、PCR Buffer、dNTPs、SYBR Green I 荧光染料、Mg2+和ROX I 校正染料,操作简单方便。主要用于基因组DNA靶序列和RNA反转录后cDNA靶序列的检测。
本品所含的荧光染料SYBR Green I可以与所有的双链DNA结合,使该产品可用于不同靶序列的检测而不需合成特异性标记探针。本品含有的BaldStar Taq DNA Polymerase是一种经化学修饰的、全新高效热启动酶,在常温下没有聚合酶活性,有效避免在常温条件下由引物和模板非特异性结合或引物二聚体而产生的非特异性扩增,酶的激活须在95℃下孵育10分钟。独特的PCR缓冲体系与热启动酶的组合,有效抑制了非特异性的PCR扩增,显著提高了PCR的扩增效率。
所含的ROX染料可校正定量PCR仪孔与孔之间产生的荧光信号误差,本试剂盒中ROX校正染料含量较较低,适用于ABI Prism7500/7500 Fast,QuantStudio® 3 System,QuantStudio® 5 System,QuantStudio® 6 Flex System,QuantStudio® 7 Flex System,ViiA 7 system,Stratagene Mx3000/Mx3005P,Corbett Rotor Gene 3000等需要较低ROX信号校正的荧光定量PCR仪。
试剂盒组成:
| 组份 | 1ml | 5ml |
| 2×SuperSYBR Mixture(Low ROX) | 1ml | 5×1ml |
| ddH2O | 1ml | 5×1ml |
产品特点
1、本产品中使用了全新高效热启动酶BaldStar Taq DNA Polymerase与独特的PCR缓冲体系,显著提高PCR的扩增效率,具有高灵敏度和特异性强的特点。
2、适用于荧光定量PCR检测,能够准确地对目的基因进行定量和检测。
注意事项:
1、使用前请上下颠倒轻轻混匀,尽量避免起泡,并经短暂离心后使用。
2、本产品中含有SYBR Green I荧光染料和ROX染料,保存本产品或配制PCR反应液时应避免强光照射。
3、避免反复冻融本品,反复冻融可能使产品性能下降。
4、本品不能用于探针法荧光定量PCR。
5、配制反应液时,请使用新的或者无污染的枪头和离心管,尽量防止污染。
操作步骤:
以下举例为常规PCR反应体系和反应条件,实际操作中应根据模板、引物结构和目的片段大小不同进行相应的改进和优化。
1、PCR反应体系
| 试剂 | 50μl反应体系 | 终浓度 |
| 2×SuperSYBR Mixture(Low ROX) | 2 5μl | 1× |
| Forward Primer,10μM | 1μl | 0.2μM |
| Reverse Primer,10μM | 1μl | 0.2μM |
| Template DNA | 2μl | |
| ddH2O | up to 50μl |
注意:
1)通常引物浓度以0.2μM可得到较好结果,可以终浓度0.1-1.0μM作为设定范围的参考。
2)通常DNA模板的量以10-100ng基因组DNA或1-10ng cDNA为参照,因不同物种的模板中含有的目的基因拷贝数不同,可对模板进行梯度稀释,以确定最佳的模板使用量。
3)推荐反应体系为50μl,也可以根据实际实验需求按比例扩大或者缩小反应体系。
2、PCR反应程序:
注意!本产品预变性反应必须在95℃ 10分钟下完成!
建议采用下表显示的两步法PCR进行程序设定,本程序是以ABI7500荧光定量PCR仪为例。若因Tm值较低的引物等原因,得不到良好的实验结果时,可尝试进行三步法PCR 扩增,三步法操作步骤详见《反应条件的优化》。
| 步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
| 预变性 | 95℃ | 10 min | |
| 变性 | 95℃ | 15 s | 35-40 个循环 |
| 退火/延伸 | 60℃ | 1 min | |
| 融解曲线分析 | 95℃ | 15 s | |
| 60℃ | 1 min | ||
| 95℃ | 15 s | ||
| 60℃ | 15 s |
注意:
1)本产品所采用的热启动酶须在预变性95℃、10 min条件下实现酶的活化。
2)退火温度请以60-64℃作为设定范围的参考,发生非特异性反应时,可提高退火温度。
3)本程序是以ABI 7500荧光定量PCR仪为参照设定,融解曲线分析请以所使用的荧光定量PCR仪推荐的程序进行设定。
反应条件的优化:
在荧光定量反应条件优化时,应从引物浓度、退火温度、延伸时间等方面进行考虑,以提高反应特异性和扩增效率。
1、反应特异性和扩增效率高的实验体系应具备以下条件:
1)反应特异性高:阴性对照无引物二聚体等非特异性扩增;不产生目的片段以外扩增。
2)扩增效率高:Ct值低;PCR扩增效率高,接近理论值100%。
2、反应条件优化方法:
1)引物浓度:通常引物浓度以0.2μM可得到较好结果,可以终浓度0.1-1.0μM作为设定范围的参考。若提高反应特异性,可降低引物浓度;若提高扩增效率,可增加引物的浓度,由此优化反应体系。
2)退火温度:建议采用两步法PCR,退火温度60℃进行反应。若提高反应特异性,可提高退火温度,以60-64℃作为设定范围的参考。若因使用Tm值较低的引物等原因,得不到良好的实验结果时,可尝试进行三步法PCR扩增,三步法的退火温度请以56℃-64℃的范围作为设定参考。
3)延伸时间:建议采用两步法PCR,延伸时间1 min进行反应。若提高扩增效率,可尝试将延伸时间增加,或尝试三步法PCR。
注意!本产品预变性反应必须在95℃ 10分钟下完成!
三步法荧光定量PCR(本程序是以ABI7500荧光定量PCR仪为例):
| 步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
| 预变性 | 95℃ | 10 min | |
| 变性 | 95℃ | 10 s | 35-40个循环 |
| 退火 | 56-64℃ | 30s | |
| 延伸 | 72℃ | 32s | |
| 融解曲线分析 | 95℃ | 15s | |
| 60℃ | 1 min | ||
| 95℃ | 15 s | ||
| 60℃ | 15 s |
注意:
1)本产品所采用的热启动酶须在预变性95℃、10 min条件下实现酶的活化。
2)无法得到理想的扩增效率时,适当降低退火温度;发生非特异性反应时,提高退火温度。
3)若需提高反应扩增效率,可适当增加延伸时间。
4)本程序是以ABI 7500荧光定量PCR仪为参照设定,融解曲线分析请以所使用的荧光定量PCR仪推荐的程序进行设定。
储存条件:-20℃,避免反复冻融
WE0330型抗His标签抗体琼脂糖介质厂家价格关键词:Anti-His Mouse Monoclonal Antibody Agarose ,抗His标签抗体琼脂糖介质,WE0330
·抗GST标签单克隆抗体
编号:WE0352
英文名称:Anti GST-Tag Mouse Monoclonal Antibody
规格:100μl
该抗体为高纯度的鼠单克隆抗体,与GST结构域具有高亲和性,可灵敏特异地检测各种GST编码载体表达的GST-Tag融合蛋白。
抗体类型:鼠单克隆抗体IgG1
免疫原:人工合成多肽
应用范围:WB(1:500-5000)、ELISA(1:200-20000)
·通用型免疫组化试剂盒(鼠兔源一抗)
编号:WE0316
英文名称:Rabbit & Mouse HRP Kit(DAB)
规格:3ml
本试剂盒根据生物素与链霉亲和素具有很强亲和力的原理设计。 在兔源或鼠源的一抗与相应的靶抗原结合后,本试剂盒中的生物素化抗兔/鼠通用型二抗与一抗特异结合;二抗上标记的生物素与标记了过氧化物酶(HRP)的链霉亲和素结合,形成抗原~特异性一抗~生物素化的二抗~HRP标记的链霉亲和素复合物。HRP可以催化底物显色,从而推断待检抗原的存在及分布。该试剂盒使用的生物素化二抗、SA-HRP,均采用优化的标记和纯化技术,使得其染色有更高灵敏度和更低的背景,适合于检测福尔马林固定石蜡包埋组织切片,以及冰冻切片、细胞爬片、新鲜制备的血涂片等。兔/鼠通用型Streptavidin-HRP试剂盒适合与百奥莱博即用型或浓缩型抗体配套使用。
试剂盒组成:
| 组份 | 3ml |
| Solution A(Endogenous Peroxydase Enzymes Blocking Buffer,White Solution) | 3ml |
| Solution B(Normal Goat Serum For Blocking,White Solution) | 3ml |
| Solution C(Goat anti-Rabbit/Mouse IgG,Biotin,Ready to Use,Yellow Solution) | 3ml |
| Solution D(Streptavidin-HRP,Ready to Use,Red Solution) | 3ml |
| DAB-A(20×) | 250μl |
| DAB-B(1×) | 5ml |
注意事项:
1、以每张切片加入1滴(约50μl)计算,3ml可做60张切片, 18ml可做360张切片。
2、对于内源性生物素含量比较丰富的组织,使用本试剂盒时最好用内源性生物素阻断剂进行封闭。
3、DAB工作液现配现用,配制好的工作液2~8℃避光1小时内有效。
4、实验过程中避免组织片干燥,因此各步孵育时工作液用量必需充足,保证完全覆盖组织样本,且尽量在湿盒中进行孵育。
5、为获得最佳实验结果,请务必优化实验条件及试剂用量。
6、DAB为可疑致癌物,使用时请采取必要的防护措施。
7、本产品仅用于科研,不能用于人体反应或人体治疗。
操作步骤:
1、常规处理欲检测的石蜡或冰冻组织切片或细胞爬片等样本。
1)组织切片或细胞爬片染色前处理:
a. 石蜡切片
脱蜡水化:60ºC烤片1小时,二甲*脱蜡二次,每次5分钟;再依次浸入梯度乙醇(无水乙醇-无水乙醇-95%-85%-75%乙醇)和蒸馏水中各5分钟水化。
b. 冰冻切片和细胞爬片
切片(或爬片)浸于0.01 M pH7.4 PBS洗涤3次×5分钟。然后用0.1%Triton X-100覆盖组织(或细胞)浸润15分钟,0.01 M pH7.4 PBS洗涤2次×5分钟。
2)石蜡切片的抗原修复:绝大大多数情况下,石蜡组织切片用柠檬酸缓冲液高压修复都是适合的。
修复工作液配制:1 L去离子水中加入10ml柠檬酸缓冲液(IHC抗原修复液, 100×)(Cat#:WE0318),混匀即可。
修复过程:修复液加入高压锅内,待修复切片浸于修复液中(必需没过组织),盖上压力锅盖,加热至均匀喷汽,从喷汽开始计时,1~2分钟后压力锅离开热源,自然冷却至室温,取出切片,蒸馏水淋洗后,再用PBS(0.01 M pH7.4)漂洗2次,每次3分钟。
2、滴加适量Solution A白色溶液,即内源性过氧化物酶封闭液室温孵育10分钟,PBS充分淋洗。
3、滴加适量Solution B白色溶液,即封闭用正常羊血清工作液,室温孵育10分钟,甩干。
4、滴加适量一抗工作液(商品化即用型抗体或适当比例稀释的浓缩抗体),按实验要求孵育,然后PBS充分淋洗。
5、滴加适量Solution C黄色溶液,即生物素标记羊抗兔/鼠二抗工作液,室温孵育10分钟,PBS充分淋洗。
6、滴加适量Solution D红色溶液,即HRP标记的链霉亲和素,室温孵育10分钟,PBS充分淋洗。
7、DAB显色工作液配制:根据需要量,将DAB-A和DAB-B以1:19的体积比混匀后即为DAB显色工作液。也可选择每毫升试剂B中滴加1滴(约50μl)试剂A,混匀即可。
8、显色:加适量的DAB显色工作液于需要显色的组织切片或细胞爬片上即可显色,显色时间一般为1-5分钟。显微镜下观察控制显色时间,当达到最佳显色效果后,自来水冲洗终止显色。显色后的切片经复染、脱水透明,封片后可长期保存。
储存条件:2~8℃
WE0330型抗His标签抗体琼脂糖介质厂家价格关键词:Anti-His Mouse Monoclonal Antibody Agarose ,抗His标签抗体琼脂糖介质,WE0330
·免疫组化试剂盒(鼠源一抗)
编号:WE0315
英文名称:Mouse HRP Kit(DAB)
规格:3ml
本试剂盒根据生物素与链霉亲和素具有强亲和力的原理设计。在鼠源的一抗与相应的靶抗原结合后,本试剂盒中的生物素标记羊抗鼠二抗与一抗特异结合;二抗上标记的生物素与标记过氧化物酶(HRP)的链霉亲和素结合,形成抗原~特异性一抗~生物素化的二抗~HRP标记的链霉亲和素复合物。HRP可以催化底物显色,从而推断待检抗原的存在及分布。该试剂盒使用的生物素化二抗、SA-HRP,均采用优化的标记和纯化技术,使得其染色有更高灵敏度和更低的背景,适合于检测福尔马林固定石蜡包埋组织切片,以及冰冻切片、细胞爬片、新鲜制备的血涂片等。鼠Streptavidin-HRP试剂盒适合与百奥莱博即用型或浓缩型抗体配套使用。
试剂盒组成:
| 组份 | 3ml |
| Solution A(Endogenous Peroxydase Enzymes Blocking Buffer,White Solution) | 3ml |
| Solution B(Normal Goat Serum For Blocking,White Solution) | 3ml |
| Solution C(Goat anti-Mouse IgG,Biotin,Ready to Use,Yellow Solution) | 3ml |
| Solution D(Streptavidin-HRP,Ready to Use,Red Solution) | 3ml |
| DAB-A(20×) | 250μl |
| DAB-B(1×) | 5ml |
注意事项:
1、本试剂盒仅适用于一抗为的鼠源抗体的IHC实验。
2、以每张切片加入1滴(约50μl)计算,3ml可做60张切片,18ml可做360张切片。
3、对于内源性生物素含量比较丰富的组织,使用本试剂盒时最好用内源性生物素阻断剂进行封闭。
4、DAB工作液现配现用,配制好的工作液2~8℃避光1小时内有效。
5、实验过程中避免组织片干燥,因此各步孵育时工作液用量必需充足,保证完全覆盖组织样本,且尽量在湿盒中进行孵育。
6、为获得最佳实验结果,请务必优化实验条件及试剂用量。
7、DAB为可疑致癌物,使用时请采取必要的防护措施。
8、本产品仅用于科研,不能用于人体反应或人体治疗。
操作步骤:
1、常规处理欲检测的石蜡或冰冻组织切片或细胞爬片等样本。
1)组织切片或细胞爬片染色前处理:
a. 石蜡切片
脱蜡水化:60ºC烤片1小时,二甲*脱蜡二次,每次5分钟;再依次浸入梯度乙醇(无水乙醇-无水乙醇-95%-85%-75%乙醇)和蒸馏水中各5分钟水化。
b. 冰冻切片和细胞爬片
切片(或爬片)浸于0.01 M pH7.4 PBS洗涤3次×5分钟。然后用0.1%Triton X-100覆盖组织(或细胞)浸润15分钟,0.01 M pH7.4 PBS洗涤2次×5分钟。
2)石蜡切片的抗原修复:绝大大多数情况下,石蜡组织切片用柠檬酸缓冲液高压修复都是适合的。
修复工作液配制:1 L去离子水中加入10ml柠檬酸缓冲液(IHC抗原修复液, 100×)(Cat#:WE0318),混匀即可。
修复过程:修复液加入高压锅内,待修复切片浸于修复液中(必需没过组织),盖上压力锅盖,加热至均匀喷汽,从喷汽开始计时,1~2分钟后压力锅离开热源,自然冷却至室温,取出切片,蒸馏水淋洗后,再用PBS(0.01 M pH7.4)漂洗2次,每次3分钟。
2、滴加适量Solution A白色溶液,即内源性过氧化物酶封闭液室温孵育10分钟,PBS充分淋洗。
3、滴加适量Solution B白色溶液,即封闭用正常羊血清工作液,室温孵育10分钟,甩干。
4、滴加适量一抗工作液(商品化即用型抗体或适当比例稀释的浓缩抗体),按实验要求孵育,然后PBS充分淋洗。
5、滴加适量Solution C黄色溶液,即生物素标记羊抗鼠二抗工作液,室温孵育10分钟,PBS充分淋洗。
6、滴加适量Solution D红色溶液,即HRP标记的链霉亲和素,室温孵育10分钟,PBS充分淋洗。
7、DAB显色工作液配制:根据需要量,将DAB-A和DAB-B以1:19的体积比混匀后即为DAB显色工作液。也可选择每毫升试剂B中滴加1滴(约50μl)试剂A,混匀即可。
8、显色:加适量的DAB显色工作液于需要显色的组织切片或细胞爬片上即可显色,显色时间一般为1-5分钟。显微镜下观察控制显色时间,当达到最佳显色效果后,自来水冲洗终止显色。显色后的切片经复染、脱水透明,封片后可长期保存。
储存条件:2~8℃
北京百莱博科技有限公司专业生产供应销*(代"售")生物试剂、化学试剂、抗原抗体、血清血浆、Elisa试剂盒,更多试剂产品需求,欢迎来电咨询选购WE0330型抗His标签抗体琼脂糖介质厂家价格。
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