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- 详细信息
- 技术资料
- 库存:
939
- 英文名:
HotStar DNA Polymerase
- 保质期:
长期
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
-20℃
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博主要从事生物试剂的生产和销*(代"售"),产品线涵盖北京FastStar热启动DNA聚合酶报价在内的分子生物学试剂产品,还包括PCR及荧光定量PCR、核酸提取试剂盒类、样本核酸保护试剂、核酸提取、克隆与转化、蛋白纯化、蛋白检测、免疫组化、细胞凋亡与抗体等。
名称:FastStar热启动DNA聚合酶
规格:500U|2500U
英文名:HotStar DNA Polymerase
产地:国产|进口
品牌:百奥莱博
编号:WE0122
HotStar DNA Polymerase是抗Taq酶单克隆抗体和WE0101 Taq DNA Polymerase的混合制品,适用于Hot Start PCR。使用Taq酶抗体进行PCR扩增时,高温变性前由于Taq酶抗体与Taq酶结合抑制DNA聚合酶活性,能够在低温条件下有效抑制引物的非特异性退火及引物二聚体引起的非特异性扩增。Taq酶抗体在PCR反应最初的DNA变性步骤中变性,DNA聚合酶活性恢复,达到热启动效果。使用本品无需特殊地对Taq酶抗体失活处理,可以在常规PCR反应条件下使用。
HotStar DNA Polymerase具有5"→3"DNA聚合酶活性和5"→3"外切酶活性,无3"→5"外切酶活性,酶延伸速度2 kb/min,可以扩增长度达5 kb的片段。扩增得到的PCR产物3"端附有一个“A”碱基,因此可直接用于T/A克隆。本产品具有延伸速度快、扩增效率高的特点,主要适用于PCR法扩增DNA片段、DNA序列测定等实验。
产品组成:
| 组份 | 500U | 2500U |
| HotStar DNA Polymerase, 5 U/μl | 100μl | 5×100μl |
| 10×PCR Buffer | 1.8ml | 5×1.8ml |
注意:本产品的10×PCR Buffer中含有15 mM*离子。
活性定义:用活性化的大马哈鱼精子DNA作为模板/引物,在74℃,30分钟内,将10 nmol脱氧核苷酸掺入到酸性不溶物质所需的酶量定义为1个活性单位(U)。
质量控制:
1、经过多次柱纯化,SDS-PAGE检测其纯度大于99%;
2、经检测无外源核酸酶活性;
3、PCR方法检测无宿主残余DNA;
4、能有效地扩增人基因组中的单拷贝基因。
使用方法:
以下举例为以人基因组DNA为模板,扩增1 kb的片段的PCR反应体系和反应条件,实际操作中应根据模板、引物结构和目的片段大小不同进行相应的改进和优化。
1、PCR反应体系
| 试剂 | 50μl反应体系 | 终浓度 |
| 10×PCR Buffer | 5μl | 1× |
| dNTP Mix,10 mM each | 1μl | 200μM each |
| Forward Primer,10μM | 2μl | 0.4μM |
| Reverse Primer,10μM | 2μl | 0.4μM |
| Template DNA | <0.5μg | <0.5μg/50μl |
| HotStar DNA Polymerase,5U/μl | 0.25-0.5μl | 1.25-2.5 U/50μl |
| ddH2O | up to 50μl |
注意:可以在室温下配制反应液,须将试剂置于冰上。
2、PCR反应条件
| 步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
| 预变性 | 94℃ | 2 min | |
| 变性 | 94℃ | 30 s | 25-35个循环 |
| 退火 | 55-65℃ | 30 s | |
| 延伸 | 72℃ | 30 s | |
| 终延伸 | 72℃ | 2 min |
注意:
1)一般实验中退火温度比扩增引物的熔解温度Tm低5℃,无法得到理想的扩增效率时,适当降低退火温度。
2)延伸时间应根据所扩增片段大小设定。
3)可根据扩增产物的下游应用设定循环数。如果循环次数太少,扩增量不足;如果循环次数太多,错配机率会增加,非特异性背景严重。所以在保证产物得率的前提下应尽量减少循环次数。
储存条件:-20℃,避免反复冻融。
关键词:FastStar热启动DNA聚合酶,WE0122,HotStar DNA Polymerase
关于北京FastStar热启动DNA聚合酶报价的更详细说明,请致电我公司咨询,我们将以最饱满的热情为您提供解答,此外,我公司专业供应下列产品:
| 编号 | 名称 |
| WE0401 | 组织样本RNA样品保存管 |
| WE0381 | Cy3标记山羊抗兔IgG(H+L) |
| WE0340 | 抗VSV-G标签单克隆抗体 |
| WE0184 | 唾液基因组DNA提取试剂盒 |
| WE0152 | 快速实时荧光定量PCR的预混体系(荧光探针)(低含量ROX校正染料) |
| WE0385 | FITC标记兔抗山羊IgG(H+L) |
| WE0276 | BCA蛋白定量试剂盒 |
| WE0127 | 全血Taq DNA聚合酶 |
| WE0115 | 尿嘧啶DNA糖基化酶(UDG酶) |
| WE0287 | SDS-PAGE分离胶缓冲液(4×) |
| WE0354 | 抗β-Actin单克隆抗体 |
| WE0314 | 免疫组化试剂盒(兔源一抗) |
| WE0156 | BaldStar TaqMan Mixture(dUTP+UNG酶)(高含量ROX校正染料) |
| WE0119 | 结核分枝杆菌基因分型试剂盒(HV-3) |
| WE0200 | 植物RNA提取试剂盒(含DNase I) |
| WE0242 | UltraStain DNA Marker |
| WE0262 | 哺乳动物蛋白抽提试剂盒 |
| WE0252 | DH5α感受态细胞 |
| WE0319 | EDTA缓冲液(IHC抗原修复液,50×) |
| WE0300 | PVDF膜(0.22μM) |
| WE0246 | 2kb DNA Marker |
| WE0259 | 蛋白酶抑制剂混合物 |
| WE0254 | BL21(DE3)pLysS感受态细胞 |
| WE0258 | RIPA裂解液(强) |
| WE0210 | UltraStain核酸染料 |
| WE0375 | HRP标记山羊抗人IgG(H+L) |
| WE0295 | Western抗体稀释液 |
| WE0155 | BaldStar TaqMan Mixture(dUTP+UNG酶)(低含量ROX校正染料) |
| WE0389 | 生物素化兔抗山羊IgG(H+L) |
| WE0256 | 蛋白*(代"磷")酸酶抑制剂混合物 |
| WE0374 | 罗丹明山羊抗大鼠IgG(H+L) |
| WE0232 | Y染色体人基因组DNA定量试剂盒 |
| WE0337 | 抗Flag标签单克隆抗体 |
| WE0274 | 蛋白标准溶液BSA |
| WE0350 | 抗HA标签多克隆抗体 |
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