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北京现货2×Babuddy MasterMix(含染料)特价

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  • ¥180 - 1780
  • 百奥莱博
  • WE0110-CWZ
  • 北京
  • 2025年07月14日
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    • 详细信息
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      477

    • 英文名

      2×Babuddy MasterMix(With Dye)

    • 保质期

      长期

    • 供应商

      北京百奥莱博科技有限公司

    • 保存条件

      -20℃

    特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

    北京现货2×Babuddy MasterMix(含染料)特价促销由专业试剂供应商北京百奥莱博提供,用于科研目的生化试验项目,本产品质量好,且极具价格优势,深为用户称道,了解更多2×Babuddy MasterMix(含染料)等核酸扩增(PCR)产品请联*(代"系")我司咨询订购。


    名称:北京现货2×Babuddy MasterMix(含染料)特价促销
    规格:1ml|5ml
    产地:国产|进口
    品牌:百奥莱博
    英文名:2×Babuddy MasterMix(With Dye)
      本品是由Babuddy Super Fidelity DNA Polymerase、PCRBuffer、Mg2+、dNTPs以及PCR稳定剂和增强剂组成的预混体系,浓度为2×。Babuddy Super Fidelity DNA Polymerase是一种快速、高扩增效率的高保真DNA聚合酶,具有5"-3"DNA聚合酶活性和3"-5"外切核酸酶活性。经过改造的聚合酶其活性区域融合有一段聚合增强结构域,独特的结构极大提升了保真性和延伸速度。Babuddy Super Fidelity DNA Polymerase的保真性是普通Taq DNA Polymerase的50倍,是普通Pfu的6倍。其延伸速率为15-30s/kb,成功克服了普通Pfu酶扩增效率低、扩增速度慢的缺陷,大大缩短了反应时间。
      本品特别适合于在基因克隆实验中扩增长片段DNA,尤其在扩增>10 kb的DNA片段时,优势更加明显,所扩增的片段最长可达20 kb。预配好的PCR混合液使操作更加简单快捷,可最大限度地减少人为误差和污染。
      使用本产品扩增得到的PCR产物的3"端不带有“A”碱基,可直接克隆于平末端载体中。如需进行T/A克隆,需在PCR产物末端添加“A”后进行克隆。本产品具有延伸速度快、扩增效率高、保真性强的特点。适用于基因克隆、基因定点突变、SNP等实验。本产品已加入染料(蓝色),反应结束后可直接进行电泳检测,无需再使用上样缓冲液。

    产品特点
    1、高保真性:保真性是普通Taq DNA Polymerase的50倍,普通Pfu的6倍。
    2、扩增速度快:其延伸速率为15-30sec/kb,成功克服了普通Pfu酶扩增效率低、扩增速度慢的缺陷。
    3、特别适合于扩增长片段:扩增的片段长度可长达20kb。

    产品组成

     
    组份 1ml 5ml
    2×Babuddy MasterMix(With Dye) 1ml 5×1ml
    ddH2O 1ml 5×1ml

    注意:2×Babuddy MasterMix含有Babuddy DNA Polymerase,2×PCR Buffer, 3 mM MgCl2和400μM dNTP mix。

    使用方法
    以下举例为常规PCR反应体系和反应条件,实际操作中应根据模板、引物结构和目的片段大小不同进行相应的改进和优化。

    1、PCR反应体系
    试剂 20μl反应体系 50μl反应体系 终浓度
    2×Babuddy MasterMix 10μl 25μl
    Forward Primer,10μM 1μl 2.5μl 0.5μM
    Reverse Primer,10μM 1μl 2.5μl 0.5μM
    Template DNA 适量 适量 <250ng
    ddH2O up to 20μl up to 50μl  

    a.模板:在50μl PCR反应体系中,DNA模板的建议用量为低复杂度模板(如质粒DNA,λDNA等)1 pg- 10ng,高复杂模板(如基因组DNA)50-250ng。
    b.引物:引物浓度请以终浓度0.2-1.0μM作为设定范围的参考,推荐终浓度为0.5μM。扩增效率不高的情况下,可提高引物的浓度;发生非特异性反应时,可降低引物浓度,由此优化反应体系。

    2、PCR反应条件
    常规三步法PCR反应:
    步骤 温度 时间 循环数
    预变性 98℃ 30 s-3 min  
    变性 98℃ 5-10 s 25-35 个循环
    退火 45-72℃ 10-30 s
    延伸 72℃ 2-4 kb/min
    终延伸 72℃ 5-10 min  

    a.变性:简单模板的预变性温度为98℃,预变性时间为30 s。对于比较复杂的模板,预变性时间可延长至3分钟。
    b.退火:使用本产品时,退火温度设定的基本原则是,当引物长度小于或等于20 nt时,退火温度为引物最低的Tm;当引物长度大于20 nt时,退火温度应在最低Tm的基础上以Tm+3℃退火10-30 s。当无法得到理想的扩增效率时,应以最低的Tm值逐步提升至模板延伸温度。对于Tm高的引物可以使用两步法PCR。
    c.延伸:本产品中所包含的Babuddy DNA Polymerase的扩增效率为2-4 kb/min,复杂性低的模板可用4 kb/min,复杂性高的基因组DNA模板,延伸时间则应为2 kb/min,对于一些cDNA模板,延伸时间可增加到1.5 kb/min。
    d.循环次数:可根据扩增产物的下游应用设定循环数。如果循环次数太少,扩增量不足;如果循环次数太多,错配机率会增加,非特异性背景严重。所以,在保证产物得率的前提下,应尽量减少循环次数。

    当引物的退火温度较高时,建议使用两步法进行PCR扩增:
    步骤 温度 时间 循环数
    预变性 98℃ 30 s-3 min  
    变性 98℃ 5-10 s 25-35 个循环
    延伸 72℃ 2-4 kb/min
    终延伸 72℃ 5-10 min  


    储存条件:-20℃,避免反复冻融。

    更多有关北京现货2×Babuddy MasterMix(含染料)特价促销的价格及使用说明等,请联*(代"系")我们的业务经理王欣女士咨询,我公司还销*(代"售")以下产品:

    ·抗His标签抗体琼脂糖介质
    编号:WE0330
    英文名称:Anti-His Mouse Monoclonal Antibody Agarose
    规格:100μl|500μl
    抗His标签免疫亲和介质是将抗His标签的单克隆抗体共价偶联到琼脂糖上,这种琼脂糖能进行免疫沉淀或者免疫共沉淀,能检测包含有His标签的蛋白。

    抗体类型:鼠单克隆抗体IgG1
    免疫原:人工合成多肽序列
    应用范围:IP

    ·超纯RNA提取试剂盒(DNase I)
    编号:WE0193
    英文名称:SuperPure RNA Extraction Kit(DNase I)
    规格:50次
      本试剂盒是基于TRIzon改进后的柱式总RNA提取试剂盒,本制品可以从动物组织、植物材料、各种微生物及培养细胞等样品中提取总RNA。首先裂解液充分裂解并匀质化样本,在特有的高盐状态下,RNA特异性地与硅基质结合,在极大程度减少了蛋白污染的同时有效去除了有机溶剂的污染,得到的RNA纯度更好,质量更高。本产品可从各细胞或组织中快速提取总RNA,每次可处理 30-50 mg组织或 5×106 细胞,可同时处理多个不同样品。如果是对微量DN非常敏感的RNA实验,残留的DNA可利用无RNase的DNase在柱上进行消化去除,提取后的RNA可直接应用于RT-PCR、Northern Blot、Dot Blot、体外翻译等实验。

    试剂盒组成
     
    组份 50次
    DNase I 1000 U
    10×Reaction Buffer 1000μl
    TRIzon Reagent 60ml
    Buffer RW1 40ml
    Buffer RW2(浓缩液) 11ml
    RNase-Free Water 10ml
    吸附柱RM及收集管 50套
    RNase-Free离心管(1.5ml) 50个

    保存条件:DNase I及10×Reaction Buffer -20℃保存,TRIzon Reagent 2~8℃避光保存,其它组分室温(15~30℃)。

    自备试剂:*仿(新开封或提取RNA专用)、70%乙醇(无RNase水配制)、无水乙醇。

    实验前准备及重要注意事项/strong>:
    1、预防RNase污染,应注意以下几方面:
    1)使用无RNase的塑料制品和枪头,避免交叉污染。
    2)配制溶液应使用无RNase的水。
    3)操作人员戴一次性口罩和手套,实验过程中要勤换手套。
    2、样品应避免反复冻融,否则影响RNA提取得率和质量。
    3、使用前若发现TRIzon Reagent有沉淀,可置于56℃水浴几分钟,即可溶解。
    4、第一次使用前应按照试剂瓶标签说明在Buffer RW2中加入无水乙醇。
    5、所有离心步骤若无特殊说明均在室温下进行,且所有操作步骤动作要迅速。

    操作步骤
    1、样品处理
    ① 组织:30-50 mg组织在液氮中充分研磨后加入1ml TRIzon Reagent,或在组织样品中加入1ml TRIzon Reagent后匀浆处理。
    注意:样品体积不超过TRIzon Reagent体积的10%。
    ② 单层培养细胞:吸去培养液,加入适量 ,每10cm2加入1ml TRIzon Reagent。
    ③ 细胞悬液:离心收集细胞。每5×106细胞加入1ml TRIzon Reagent。
    2、样品中加入TRIzon Reagent后反复吹打几次,使样本充分裂解。室温放置5分钟,使蛋白核酸复合物完全分离。
    3、以每1ml TRIzon Reagent加入200μl*仿的比例加入*仿,盖好管盖,剧烈振荡15秒,室温放置2分钟。
    4、4℃ 12000rpm(~~13400×g)离心10分钟,此时样品分为三层:红色有机相,中间层和上层无色水相,RNA主要在上层水相中,将上层水相移到一个新的RNase-Free离心管(自备)中。
    5、在得到的水相溶液中加入等体积的70%乙醇(无RNase水配制),颠倒混匀。
    6、将上步所得溶液全部加入到已装入收集管的吸附柱中。若一次不能加完溶液,可分多次转入。12000rpm离心20秒,倒掉收集管中的废液,将吸附柱重新放回收集管中。
    7、向吸附柱中加入350μl Buffer RW1,12000rpm离心20秒,倒掉收集管中的废液,将吸附柱重新放回收集管中。
    8、配制DNase I 混合液:取52μl RNase-Free Water,向其中加入8μl 10×Reaction Buffer和20μl DNase I(1 U/μl),混匀, 配制成终体积为80μl的反应液。
    9、向吸附柱中直接加入80μl DNase I 混合液,20-30℃孵育15分钟。
    10、向吸附柱中加入350μl Buffer RW1,12000rpm离心1分钟,弃废液,将吸附柱重新放回收集管中。
    11、向吸附柱中加入500μl Buffer RW2(使用前检查是否已加入无水乙醇),12000rpm离心20秒,倒掉收集管中的废液,将吸附柱重新放回收集管中。
    12、重复步骤11。
    13、12000rpm离心2 分钟,倒掉收集管中废液。将吸附柱置于室温数分钟,彻底晾干。
    注意:这一步的目的是将吸附柱中残余的乙醇去除,乙醇的残留会影响后续的酶促反应(酶切、PCR 等)。
    14、将吸附柱置于一个新的无RNase离心管中,向吸附柱的中间部位加入30-50μl RNase-Free Water,室温放置1分钟,12000rpm离心1分钟,收集RNA溶液,-70℃保存RNA,防止降解。
    注意:
    1)RNase-Free Wate体积不应小于30μl,体积过小影响回收率。
    2)如果要提高RNA的产量,可用30-50μl新的RNase-Free Water重复步骤14。
    3)如果要提高RNA浓度,可将得到的溶液重新加入到吸附柱中,重复步骤14。

    储存条件:室温(15~30℃)。


    北京现货2×Babuddy MasterMix(含染料)特价促销关键词:2×Babuddy MasterMix(With Dye),2×Babuddy MasterMix(含染料),WE0110


    ·TBST(pH8.0,10×)
    编号:WE0310
    规格:500ml

    ·口腔拭子基因组DNA提取试剂盒
    编号:WE0179
    英文名称:Swab Genomic DNA Extraction Kit
    规格:50次|200次
      本试剂盒提供一种简单快速分离纯化口腔拭子样本总DNA的方法。该试剂盒采用可特异性结合DNA的硅基质膜和独特的缓冲系统,高效专一吸附DNA,每个拭子可得到0.5-3.5μg基因组DNA,提取的DNA片段大、纯度高、质量稳定可靠。适用于酶切、PCR、文库构建、Southern杂交等实验。

    试剂盒组成
    组份 50次 200次
    Buffer GR 25ml 120ml
    Buffer GL 25ml 120ml
    Buffer GW1(浓缩液) 13ml 52ml
    Buffer GW2(浓缩液) 15ml 75ml
    Buffer GE 15ml 60ml
    蛋白酶K 25mg 90mg
    蛋白酶K 储存液 1.25ml 5ml
    吸附柱DS及收集管 50套 200套
    离心管(1.5ml) 50个 200个


    产品特点
    1、采用硅基质膜原理,简单、快速从口腔拭子中提取基因组DNA。
    2、提取的基因组DNA片段大、纯度高。
    3、单个拭子样本得率达到0.5-3.5μg。

    自备试剂:无水乙醇。

    实验前准备及重要注意事项/strong>:
    1、向蛋白酶K 中加入指定用量(1.25ml/5ml)的蛋白酶K 储存液使其溶解,-20℃保存。配制好的蛋白酶K 勿长时间室温放置,避免反复冻融,以免影响其活性。
    2、第一次使用前应按照试剂瓶标签说明在Buffer GW1和Buffer GW2中加入无水乙醇。
    3、使用前若发现Buffer GL有沉淀,请将Buffer GL于56℃水浴溶解。
    4、全部离心步骤可在室温下进行。
    5、取样:使用口腔拭子在口腔内壁擦拭6次,晾干2小时保存,为确保样本不被食物或饮料污染,取样前30分钟内请勿进食和饮水。

    操作步骤

    1.将口腔拭子的棉签用剪刀从杆上剪下,置于2ml的离心管(自备)中,加入400μl Buffer GR。
    注意:如需无RNA污染的基因组DNA,可加入4μl浓度为100 mg/ml 的RNase A溶液(货号:WE0225S),震荡混匀。
    2.加入20μl 蛋白酶K 和 400μl Buffer GL,立即涡旋震荡15秒,充分混匀。
    注意:加入Buffer GL后立即充分混匀;不可将蛋白酶K 直接加入Buffer GL中使用。
    3.56℃放置10分钟,短暂离心,使管壁上的溶液收集到管底。
    4.加入400μl无水乙醇,涡旋震荡充分混匀,短暂离心,使管壁上的溶液收集到管底。
    注意:加入无水乙醇后可能会产生白色沉淀,不会影响后续实验。
    5.将上步所得溶液和沉淀分两次加入到已装入收集管的吸附柱中,一次最多不超过700μl 。12000rpm(~~13400×g)离心1分钟,倒掉收集管中的废液,将吸附柱重新放回收集管中。
    6.向吸附柱中加入500μl Buffer GW1(使用前检查是否已加入无水乙醇),12000rpm离心1分钟,倒掉收集管中的废液,将吸附柱重新放回收集管中。
    7.向吸附柱中加入500μl Buffer GW2(使用前检查是否已加入无水乙醇),12000rpm离心3分钟,倒掉收集管中的废液,将吸附柱重新放回收集管中。
    注意:如需进一步提高DNA纯度,可重复步骤7。
    8.12000rpm离心1分钟,倒掉收集管中的废液。将吸附柱置于室温数分钟,以彻底晾干。
    注意:这一步的目的是将吸附柱中残余的乙醇去除,乙醇的残留会影响后续的酶促反应(酶切、PCR等)。
    9.将吸附柱置于一个新的1.5ml离心管中,向吸附柱的中间部位悬空加入50μl Buffer GE或灭菌水,室温放置2-5分钟,12000rpm离心1分钟,收集DNA溶液,-20℃保存。
    注意:
    1)如果下游实验对pH值或EDTA敏感,可以用灭菌水洗脱。洗脱液的pH值对洗脱效率有很大影响,若用水做洗脱液应保证其pH值在7.0-8.5(可以用NaOH将水的pH值调到此范围),pH值低于7.0时洗脱效率不高。
    2)若需长期保存,推荐用Buffer GE洗脱并于-20℃保存。

    储存条件:室温(15~30℃)。



    北京现货2×Babuddy MasterMix(含染料)特价促销关键词:2×Babuddy MasterMix(With Dye),2×Babuddy MasterMix(含染料),WE0110

    ARB13534 兔乙酰胆碱受体抗体(AChRAb)血清中含量检测 Rabbit acetylcholine receptor antibody,achrab ELISA KIT
    DEPC-PBS溶液(活跃)   500ml
    1,2-茚满二酮 Brilliant green 16214-27-0
    ARB11954 大鼠Ⅱ型胶原(Col Ⅱ)酶免分析 Rat collagen type Ⅱ,col Ⅱ ELISA KIT
    BTN120692 硫*(代"酸")庆大霉素溶液 Gentamycin Sulfate Solution
    75621-03-3 CHAPS
    D-正缬*酸 Chitodextrinase 2013-12-9
    BTN131222 咪唑溶液 Imidozol Solution
    BTN100826 穿刺培养基 Stab Medium
    632-99-5 碱性品红 Magenta Red
    Spinner盐溶液(含酚红)  1×|10× 500ml
    PY01-043  铬酸*  500克  
    N-羟基琥珀酰亚胺 Lithium acetate dihydrate 6066-82-6
    107-43-7 Betaine 甜菜碱
    明胶水溶液(2%,无菌)   100ml
    ARB10077 人CD4分子(CD4)elisa检测操作说明书 Human cluster of differentiation,cd4 ELISA KIT
    ARB12945 小鼠血红素氧合酶2(HO-2)Elisa定量检测 Mouse heme oxygenase 2,ho-2 ELISA KIT
    人血清白蛋白(组份五) NTA 70024-90-7
    72-19-5 L-Threonine L-苏*酸
    N-乙酰-L-谷*酰胺 Cytochalasin B 2490-97-3
    5-硝基愈创木酚* N-Acetyl-L-Proline 67233-85-6
    L-来苏糖 CHAPS 1949-78-6

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