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- sciencell
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- YS-0054X
- 2025年07月12日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
10
- 物种来源：
犬
- 运输方式：
原代冻存干冰运输，传代室温运输
- 年限：
一年
- 规格：
1×106cells/T25培养瓶
细胞名称：DH82犬巨噬细胞/狗肾恶性组织细胞增生症细胞
生长特性：贴壁 悬浮 半悬浮半贴壁（详情可咨询我们）
生长条件：详情联系我们索取该产品说明书
培养条件：90%DMEM/F12+10%FBS+1%P/S
培养温度：37℃
空气条件：5% CO2,95% AIR
传代方法：1:2传代，2~3天换液
冻存条件：0%FBS+10%DMSO
DH82犬巨噬细胞/狗肾恶性组织细胞增生症细胞，使用方法
1、您收到细胞后，请按照以下方法进行操作：
取出25cm2培养瓶，75%酒精擦拭培养瓶，拆下封口膜，放入37℃，5%CO2细胞培养箱中静置3-4小时以稳定细胞状态，然后换用新鲜完全培养液继续培养或进行传代。
2、细胞传代：
1）细胞生长至覆盖培养瓶的80%面积时，弃25cm2培养瓶中的培养液，用PBS清洗细胞一次；
2）添加0.25%胰蛋白酶消化液约1ml至培养瓶中，倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后加入完全培养液终止消化，再轻轻吹打细胞使之脱落，然后将悬液转移至15ml离心管中，1000rpm离心5min；
3）弃上清，沉淀细胞用12ml完全培养基重悬，然后按1:2比例进行分瓶传代，最后放入37℃，5%CO2细胞培养箱中培养；
4）待细胞完全贴壁后，观察培养结果，之后进行换液培养或传代。
3、细胞冻存：
1）细胞生长至覆盖培养瓶的80%面积时，弃25cm2培养瓶中的培养液，用PBS清洗细胞一次；
2）添加0.25%胰蛋白酶消化液约1ml至培养瓶中，倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后加入完全培养液终止消化，轻轻吹打细胞使之脱落，然后将悬液转移至15ml离心管中，1000rpm离心5min；
3）用适量的冻存液（FBS：DMSO=9 ：1）重悬细胞，并放置于冻存管中；
4）先将细胞冻存管放置于-20℃ 1.5h，然后将其移入-80℃过夜，24h后转入液氮中进行长期保存。使用程序降温盒可直接放入-80℃。
4、细胞复苏：
1）从液氮中取出细胞冻存管（注意：佩戴防爆管面具），快速将其置入37℃水浴中解冻，直至冻存管中无结晶，然后用75%的酒精擦拭冻存管外壁；
2）将冻存管中的细胞移至含5ml完全培养基的15ml离心管中， 1000rpm离心5min；
3）弃上清，沉淀用5ml完全培养基重悬，接种25cm2培养瓶，于37℃，5%CO2细胞培养箱中培养；
4）第二天，换用新鲜完全培养基继续培养。
DH82犬巨噬细胞/狗肾恶性组织细胞增生症细胞，原代细胞与细胞系有什么区别？细胞培养物来源于原代外植体或分散的细胞悬液。通常在这样的培养物中细胞增殖形成汇合地单层细胞或密集地细胞悬液。根据传统定义，第一次收获和接种的细胞被称为原代细胞[Freshney, R.I. (1987). Culture of Animal Cells. A Manual of Basic Technique. (New York, Alan R. Liss, Inc.)]. 这类细胞生命周期有限，在有限的生命周期内需掌握好细胞最大的生长空间，以保持细胞群中基因型和表型的一致性。细胞系是不断生长，分化的细胞群，因其经过遗传改造，致使其具有无限增长的潜能。体外生长的细胞系用于医疗或科研。实际上，连续细胞系可以用大量次培养基培养，随着代数的增加细胞的基因型和表型都有可能发生改变。需要指出的是，在不同的科研小组中这些术语的定义会有所不同。许多研究员不用细胞系这个词表示细胞群除非细胞经过了遗传改造。
1、倍增和代数有什么区别？倍增是培养物中细胞总数加倍，通常是指细胞指数或对数生长期。代数是指细胞群从培养瓶中移出，传代培养过程的次数，传代培养的目的是使细胞处于低密度以刺激其进一步生长。
2、接收到的冻存细胞该如何处理？收到包装箱后，立即将冻存细胞从干冰移入液氮中冻存。此过程尽量快以避免升温。不要将细胞储存在-80℃，这样会对细胞造成不可挽回的伤害。
3、有多少经验才能开始正常人类细胞培养？推荐有经验者在无菌环境下用层流净化罩工作，如果有经验的话对其它细胞类型也是很有利的。如果你是细胞培养的初学者或打算建立细胞培养实验室，我们会为你提供帮助。请联系我们的细胞培养专家。 
DH82犬巨噬细胞/狗肾恶性组织细胞增生症细胞，部分相关产品如下：
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iBMDM 和犬的巨噬样细胞 DH82。结果表明小鼠巨噬细胞感染 2 小时后开始裂解，而犬的巨噬样细胞经过 12 小时仍存活，表明犬的细胞对于鼠伤寒沙门菌的耐受性更高。接着，研究者在小鼠模型上通过 CRISPR-Cas9 技术构建了与 caspase-1/-4 融合蛋白催化作用相当的重组蛋白。小鼠细胞在脂多糖（LPS）刺激下很快裂解，而犬的巨噬样细胞对于 LPS 的刺激则无反应。进一步的体外实验表明，caspase-1/-4 融合蛋白能激活 IL-1β 并且同时切割消皮素 D。图片来源：Cell
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准确，且动物处于较少的生理扰乱下，用这种方法制备的模型进行实验研究，结果相对准确，误差小。齐淑英等利用铜圈置入法制备急性心肌缺血动物模型，其机理可能在于铜圈作为异物被置入冠脉内，会诱发冠脉内血栓形成，堵塞冠脉而发生急性心肌缺血。选健康杂种犬，体重19±4kg，硫喷妥钠10mg/kg静脉注射麻醉动物，左侧卧位固定于实验台上。右颈部常规备皮消毒，横行切开皮肤，逐层分离皮下组织，暴露右侧颈总动脉，结扎其远心端，近心端剪开直径约1/2，送入8F动脉穿刺器，Ｘ线下沿穿刺器送入7F 预塑形左冠脉主干，注射38
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