肠产毒性大肠杆菌荧光PCR检测试剂盒(ETEC)(国产,进口

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北京百奥莱博致力于最快速、最有效的检测产品，包括肠产毒性大肠杆菌荧光PCR检测试剂盒(ETEC)(国产,进口)在内的细菌PCR检测试剂盒产品是我公司倾力打造的优势产品，欢迎选购。

名称：肠产毒性大肠杆菌荧光PCR检测试剂盒(ETEC)(国产,进口)
产地：国产|进口
品牌：百奥莱博
规格：48次/盒
编号：SYA088

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ARB14187 小鼠雄激素受体(AR)尿液中含量检测 
ARB11388 人活化凝血因子Ⅻ(FⅫA)检测服务 Human activated coagulation factor Ⅻ,fⅫa ELISA KIT
ARB11854 人糖化白蛋白(GA)elisa测定使用说明书 Human glycated albumin,ga ELISA KIT
ARB10412 人可溶性腺苷酸环化酶(sAC)ELISA代测服务 Human soluble adenylate cyclase,sac ELISA KIT
ARB14164 小鼠流行性出血热(EHF)elisa检测操作说明书 
ARB14023 植物生长素(AuxIn)酶联免疫定量检测 
牛磺脱氧胆酸* 5-FOA 1180-95-6
ARB11764 人腺苷三磷酸结合盒转运体G2(ABCG2)Elisa分析 Human atp-binding cassette transporter g2,abcg2 ELISA KIT
BTN130516 羧基磁珠 Magnetic beads,Carboxylic
E0502 抗凝驴血(无菌 袋装)
地衣红乙醇溶液(1%)   50ml
碱性红1:1 DL-3-Aminoisobutyric acid 3068-39-1
F030234 HRP标记山羊抗人IgG抗体 HRP*Polyclonal Goat Anti-Human IgG
BL1356 高效RIPA组织/细胞快速裂解液
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BL1233 7.5% BSA溶液(细胞培养级)
BTN130813 DNA磷酸化试剂盒 DNA Phosphorylation Kit
ARB12511 大鼠载脂蛋白A1(Apo-A1)elisa检测操作说明书 Rat apoprotein a1,apo-a1 ELISA KIT
总蛋白提取试剂盒 Total protein extraction kit  50T|100T
BL1298 10×多聚赖*酸
ARB10893 人抗唾液腺导管组织抗体(SDA)免费代测 Human salivary duct autoantibody,sda ELISA KIT
甘油溶液(75%,无菌)   100ml
ARB13256 小鼠嗜环蛋白/亲环素A(CyPA)血清中含量检测 Mouse cyclophilin a,cypa ELISA KIT
9014-01-1 碱性蛋白酶
PY02-064  抗生素检定培养基Ⅱ号(PH6.5-6.6)  250克  
C1801 巴比西鼠血清(无菌过滤)
ARB10421 人丙*(代"酮")酸脱*酶E1(PDH E1)酶标法分析 Human pyruvate dehydrogenase-e1,pdh e1 ELISA KIT
ARB12676 大鼠颗粒酶A(Gzms-A)elisa检测操作说明书 Rat granzymes a,gzms-a ELISA KIT
T7 DNA聚合酶 TTAB
ARB12106 大鼠可溶性CD14(sCD14)定量分析 Rat soluble cluster of differentiation 14,scd14 ELISA KIT
BL1325 dGTP(100mM)
枸橼酸*抗凝剂(3.2%,无菌)   100ml
腐殖酸 Barium diphenylamine sulfonate 1415-93-6
钼酸铵 9-Aminoacridine hydrochloride monohydrate 12054-85-2
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·腮腺炎/乙脑/肠道病毒三重荧光PCR检测试剂盒
编号：SYA223
等级：科研实验专用
规格：48次/盒

·鸡肠炎沙门氏菌(SPP.E)单重凝胶PCR检测试剂盒
编号：SYA544
等级：科研实验专用
规格：48次/盒

·大肠杆菌O104/O157双重荧光PCR检测试剂盒
编号：SYA106
等级：科研实验专用
规格：48次/盒

·流感嗜血杆菌/肺炎链球菌双重荧光PCR检测试剂盒
编号：SYA055
等级：科研实验专用
规格：48次/盒

·猪伪狂犬野毒(gE)抗体ELISA检测试剂盒
编号：SYA644
等级：科研实验专用
规格：192次/盒

·立氏立克次体/莫氏立克次体双重荧光PCR检测试剂盒
编号：SYA139
等级：科研实验专用
规格：48次/盒

·H7/H9型流感病毒双重荧光PCR检测试剂盒
编号：SYA168
等级：科研实验专用
规格：48次/盒

·脑脊髓炎病毒单重荧光PCR检测试剂盒
编号：SYA241
等级：科研实验专用
规格：48次/盒
一、简介：
本试剂盒用一对禽脑脊髓炎病毒特异性引物，结合一条特异性探针，用一步法荧光RT-PCR 技术对禽脑脊髓炎病毒RNA 进行体外扩增检测，用于临床上对可疑感染者的病原学诊断。

二、用途：
该试剂盒适合于检测脑组织、内脏组织、血液等标本中禽脑脊髓炎病毒(AEV)RNA，用于禽脑脊髓炎病毒(AEV)感染的辅助诊断及流行病学调查，其检测结果仅供参考

三、试剂盒组成：(48T)
组份 数量 规格
禽脑脊髓炎荧光qRT-PCR反应液(AEV-qRT-PCR MIX) 1管 672μL/管
酶混合物(Enzymes MIX) 1管 48μL/管
无核酸酶水(Nuclease-Free Water) 1管 500μL/管
阴性对照(NTC) 1管 50μL/管
阳性对照(AEV-PTC) 1管 50μL/管

四、储存条件及有效期：
本试剂盒于-20℃以下保存，有效期为6个月。

五、荧光PCR仪器适用范围：
ABI系列，Roche系列等荧光定量PCR检测仪等。

六、样品的采集与RNA提取
6.1 样品的采集
病死或扑杀禽的脑部组织2g；待检活禽，用注射器取血5mL 至EDTA-2Na 抗凝管。
6.1.1 血清：用一次性无菌注射器抽取静脉血2mL，注入无菌的干燥玻璃管，室温(22-25℃)放置30-60min，血标本可自发完成凝集析出血清，或直接使用水平离心机，3000rpm离心5min，吸取上层血清，转移至1.5mL灭菌离心管。
6.1.2 血浆：用一次性无菌注射器抽取静脉血2mL，注入含EDTA2Na(乙二*(代"胺")四乙酸二*)或柠檬酸*抗凝剂的玻璃管，立即轻轻颠倒玻璃管混合5-10次，使抗凝剂与静脉血充分混匀，5-10min后即可分离出血浆，转移至1.5mL灭菌离心管。
6.1.3 拭子、分泌物等样品：在装有拭子或分泌物的离心管中加入500μL PBS或生理盐水，剧烈振荡30s。
棉拭子尽量挤出液体转移到无RNA酶污染的离心管中，6000rpm离心20s，取上清备用。
6.1.4 病灶组织样品：每份组织分别从3个不同的位置称取样品约1g，手术剪剪碎混匀后取0.5g于研磨器中研磨，加入1.5mL生理盐水后继续研磨，待匀浆后转至1.5mL灭菌离心管中，8000rpm 离心2min，取上清液100μL 于1.5mL灭菌离心管中。
6.2 RNA提取
可采购北京百奥莱博科技有限公司生产的RNA提取试剂盒(过柱法-荧光配套)或其他合适的商业化产品，并按照相应试剂盒说明进行操作。
 注：阳性对照和阴性对照为已经抽提好的核酸(无需提取),直接取5μL加入到反应体系中即可。由于阳性对照浓度较高，建议最后在样品制备区域加入阳性对照。

七、检测步骤：
7.1 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光qRT-PCR 反应液(AEV-qRT-PCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振荡混匀后，10000rpm 离心10s。
设所需要的PCR 反应管管数为N(N=样本数+1 管阴性对照+1 管阳性对照)，每个测试反应体系配制如下表：
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 14µL N×14µL
酶混合液 1µL N×1µL
总量 15µL N×15µL
计算好各试剂的使用量，加入一适当体积洁净离心管中，充分混匀，10000rpm 离心10s，向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL，向每管中加入处理后样品/阴性对照(NTC)/阳性对照(AEV-PTC)5μL，10000rpm 瞬时离心10秒。
7.2 qRT-PCR反应条件
将各反应管放入实时荧光PCR仪器的反应槽内。
推荐循环条件:
反转录(Reverse Transcription) 1循环 45℃ for 10 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 45 sec
在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团：设置为FAM，淬灭基团：NONE，请勿选择ROX参比荧光。

八、结果分析：
8.1 结果分析条件设定
直接读取检测结果。基线和阈值设定原则根据仪器噪声情况进行调整，以阈值线刚好超过正常阴性样品扩增曲线的最高点为准。
8.2 试验成立判定
(1) 阴性对照(NTC)：不应产生任何的扩增曲线。
(2) 阳性对照(AEV-PTC)：均产生扩增曲线。
(3) 以上条件应同时满足，否则，此次试验视为无效。
8.3 结果判定
(1) 在试验成立的条件下，Ct值≤35的样本为阳性，表明AEV核酸阳性。
(2) Ct值显示为无的样本为阴性样本，表明AEV核酸阴性。
(3) 如果35＜Ct值≤40，判为可疑样品。对于可疑样品，先看扩增曲线。如果扩增曲线为对数扩增曲线，则为可疑阳性，否则判为阴性。
(4) 对于可疑阳性样品，重新抽提核酸，再次进行AEV qRT-PCR检测。如果重复扩增曲线为对数扩增曲线，判为样本阳性，表明AEV核酸阳性；否则判为样本阴性。

九、注意事项：
(1) 初次使用前请仔细阅读说明书。并严格按照说明书步骤操作。
(2) 所有使用的离心管最好高压灭菌，而且必须不含RNA酶。
(3) PCR操作应严格按照要求分区(试剂配制区、标本处理区、PCR扩增区等)，防止实验室污染。
(4) 样本提取、试剂配置、加样需在不同区的超净工作台进行，以免污染。
(5) 试剂盒里所有物品应视为污染物对待，并按照卫生部《微生物生物医学实验室生物安全通则》进行处理。

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