北京现货布鲁氏杆菌荧光PCR检测试剂盒折扣价

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

北京百奥莱博生产销*(代"售")的北京现货布鲁氏杆菌荧光PCR检测试剂盒折扣价，是高品质的细菌PCR检测试剂盒产品，欢迎的您垂询订购。

名称：北京现货布鲁氏杆菌荧光PCR检测试剂盒折扣价
等级：科研试剂
产地：国产|进口
规格：48次/盒
品牌：百奥莱博
编号：SYA115
本试剂盒适用于检测头部、乳腺、生殖器淋巴结、脾、怀孕后期或生产后早期的子宫、乳房组织、流产的胎儿组织、胎膜、阴道分泌物、精液、关节炎和水囊瘤液等样本中的布氏杆菌(BS)，用于布氏杆菌(BS)感染的辅助诊断，其检测结果仅供临床参考。

本试剂盒用一对布氏杆菌特异性引物，结合一条特异性探针，用荧光PCR技术对布氏杆菌核酸进行体外扩增检测，用于临床上对可疑感染者的病原学诊断。

试剂盒组成：

 

组份	数量	规格
布氏杆菌反应液(BS-qPCR MIX)	1管	672μL/管
DNA抽提液(DNA Extraction)	2管	1.5mL/管
酶混合物(Enzymes MIX)	1管	48μL/管
阴性对照(NTC)	1管	50μL/管
布氏杆菌阳性对照(BS-PTC)	1管	50μL/管

储存条件：-20℃以下，有效期6个月。

使用方法：

一、样品采集：死亡或扑杀动物，取头部、乳腺、生殖器淋巴结、脾、怀孕后期或生产后早期的子宫、乳房组织、流产的胎儿组织、胎膜、阴道分泌物、精液、关节炎和水囊瘤液。

二、样品处理：
➤组织样品：每份组织分别从3个不同的位置称取样品约1g，手术剪剪碎混匀后取0.05g于研磨器中研磨，加入1.5mL生理盐水后继续研磨，待匀浆后转至1.5mL灭菌离心管中，8000rpm离心2min，取上清液100μL于1.5mL灭菌离心管中；
➤阴道拭子样品、精液、关节炎和水囊瘤液直接取100μL于1.5mL灭菌离心管中。

三、DNA提取：
可采用PCR试剂盒配备的DNA抽提液，按以下说明进行DNA核酸的粗提。也可采购北京百奥莱博科技有限公司生产的DNA提取试剂盒(过柱法-荧光配套)或其他合适的商业化产品，并按照相应试剂盒说明进行操作。
对上述处理好的样本加入40uL核酸提取液，100℃恒温处理10min，13000rpm离心5min，取上清液转移至新的1.5mL EP管，-20℃保存；
 注：阳性对照和阴性对照为已经抽提好的核酸(无需提取)，直接取5µL加入到反应体系中即可。由于阳性对照浓度较高，建议最后在样品制备区域加入阳性对照。

四、检测步骤：
1．试剂的准备
从试剂盒中取出荧光PCR反应液(BS-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振荡混匀后，10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照)，每个测试反应体系配制如下表：

试剂	每个反应加入的量	N个反应加入的量
荧光PCR反应液	14µL	N×14µL
酶液	1µL	N×1µL
总量	15µL	N×15µL

计算好各试剂的使用量，加入一适当体积洁净离心管中，充分混匀，10000rpm离心10s，向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液，向每管中加入处理后样品/阴性对照(NTC)/阳性对照(BS-PTC)5μL，10000rpm瞬时离心10秒。
2．qPCR反应条件
将各反应管放入实时荧光PCR仪器的反应槽内。推荐循环条件：

	1循环	50℃ for 2 min
预变性	1循环	95℃ for 10 min
PCR扩增	40循环	95℃ for 15 sec 60℃ for 60 sec

在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团：设置为FAM。淬灭基团：NONE，请勿选择ROX参比荧光。

五、结果分析：
1．结果分析条件设定
直接读取检测结果。基线和阈值设定原则根据仪器噪声情况进行调整，以阈值线刚好超过正常阴性样品扩增曲线的最高点为准。
2．试验成立判定
➤阴性对照(NTC)：不应产生任何的扩增曲线。
➤阳性对照(BS-PTC)：均产生扩增曲线。
➤以上条件应同时满足，否则，此次试验视为无效。
3．结果判定
➤在试验成立的条件下，Ct值≤35的样本为阳性，表明BS核酸阳性。
➤Ct值显示为无的样本为阴性样本，表明BS核酸阴性。
➤如果35＜Ct值，判为可疑样品。对于可疑样品，先看扩增曲线。如果扩增曲线为对数扩增曲线，则为可疑阳性，否则判为阴性。
➤对于可疑阳性样品，重新抽提核酸，再次进行BS qPCR检测。如果重复扩增曲线为对数扩增曲线，判为样本阳性，表明BS核酸阳性；否则判为样本阴性。

六、注意事项：
➤初次使用前请仔细阅读说明书。并严格按照说明书步骤操作。
➤所有使用的离心管应高压灭菌，而且必须不含DNA酶。
➤PCR操作应严格按照要求分区(试剂配制区、标本处理区、PCR扩增区等)，防止实验室污染。
➤样本提取、试剂配置、加样需在不同区的超净工作台进行，以免污染。
➤试剂盒里所有物品应视为污染物对待，按照卫生部《微生物生物医学实验室生物安全通则》进行处理。

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·呼肠孤病毒单重荧光PCR检测试剂盒
编号：SYA767
等级：科研实验专用
规格：48次/盒
一、简介：
本试剂盒用一对呼肠孤病毒特异性引物，结合一条特异性探针，用一步法荧光qRT-PCR 技术对呼肠孤病毒核酸进行体外扩增检测，用于临床上对可疑感染者的病原学诊断。

二、用途：
该试剂盒适用于检测咽拭子等样本中的呼肠孤病毒(AR)的特异性检测。用于呼肠孤病毒(AR)感染的辅助诊断，其检测结果仅供临床参考。

三、试剂盒组成：(48T)
组份 数量 规格
呼肠孤病毒反应液(AR - qRT-PCR MIX) 1管 672μL/管
酶混合物(Enzymes MIX) 1管 48μL/管
无核酸酶水(Nuclease-Free Water) 1管 500μL/管
阴性对照(NTC) 1管 50μL/管
阳性对照(JEV-PTC) 1管 50μL/管

四、荧光PCR 仪器适用范围
ABI 系列、MJ 系列、Roche 系列，博日系列及其他荧光定量PCR 检测仪。

五、储存条件及有效期：
本试剂盒于-20℃以下保存，有效期为6 个月。

六、样品采集、前处理与RNA 提取
6.1 样品采集
采集禽的咽拭子标本，应使用专用采样拭子，适度拭抹咽后壁和扁桃体部位，应避免触及舌部，迅速将拭子放入标本采集管中，旋紧管盖并密封，以防干燥。
6.2 样本前处理：
6.2.1 拭子、分泌物等样品：在装有拭子或分泌物的离心管中加入500μL PBS或生理盐水，剧烈振荡30s。
棉拭子尽量挤出液体转移到无RNA酶污染的离心管中，6000rpm离心20s，取上清备用。
6.2.2 病灶组织样品：称取组织约0.1g于研磨器或组织匀浆器中研磨(最好置于冰上或加入液氮)，再加1mL生理盐水研磨至无块状物，然后将样品转至1.5mL灭菌离心管中，8000rpm离心2min，取上清液于1.5mL灭菌离心管中。
6.3 RNA提取
可采购北京百奥莱博科技有限公司生产的RNA提取试剂盒(过柱法-荧光配套)或其他合适的商业化产品，并按照相应试剂盒说明进行操作。
 注：阳性对照和阴性对照为已经抽提好的核酸(无需提取)，直接取5μL 加入到反应体系中即可。由于
阳性对照浓度较高，建议最后在样品制备区域加入阳性对照。

七、检测步骤：
7.1 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光PCR 反应液(AR- qRT-PCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振荡混匀后，10000rpm 离心10s。
设所需要的PCR 反应管管数为N(N=样本数+1 管阴性对照+1 管阳性对照)，每个测试反应体系配制如下表：

试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 14µL N×14µL
酶混合液 1µL N×1µL
总量 15µL N×15µL
计算好各试剂的使用量，加入一适当体积洁净离心管中，充分混匀，10000rpm离心10s，向设定的N个PCR 反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液，向每管中加入处理后样品/阴性对照(NTC)/阳性对照(AR-PTC)5μL，10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qRT-PCR反应条件
将各反应管放入实时荧光PCR仪器的反应槽内。
推荐循环条件:
反转录(Reverse Transcription) 1循环 45℃ for 10 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 94℃ for 15 sec
60℃ for 45 sec
在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团：设置为FAM。淬灭基团：NONE，请勿选择ROX参比荧光。

八、结果分析：
8.1 结果分析条件设定
直接读取检测结果。基线和阈值设定原则根据仪器噪声情况进行调整，以阈值线刚好超过正常阴性样品扩增曲线的最高点为准。
8.2 试验成立判定
(1) 阴性对照(NTC)：不应产生任何的扩增曲线。
(2) 阳性对照(AR-PTC)：均产生扩增曲线。
(3) 以上条件应同时满足，否则，此次试验视为无效。
8.3 结果判定
(1) 在试验成立的条件下，Ct值≤35的样本为阳性，表明呼肠孤病毒核酸阳性。
(2) Ct值显示为无的样本为阴性样本，表明呼肠孤病毒核酸阴性。
(3) 如果35＜Ct值≤40，判为可疑样品。对于可疑样品，先看扩增曲线。如果扩增曲线为对数扩增曲线，则为可疑阳性，否则判为阴性。
(4) 对于可疑阳性样品，重新抽提核酸，再次进行呼肠孤病毒qRT-PCR检测。如果重复扩增曲线为对数扩增曲线，判为样本阳性，表明呼肠孤病毒核酸阳性；否则判为样本阴性。

九、注意事项：
(1) 初次使用前请仔细阅读说明书。并严格按照说明书步骤操作。
(2) 所有使用的离心管应高压灭菌，而且必须不含RNA酶。
(3) PCR 操作应严格按照要求分区(试剂配制区、标本处理区、PCR 扩增区等)，防止实验室污染。
(4) 样本提取、试剂配置、加样需在不同区的超净工作台进行，以免污染。
(5) 试剂盒里所有物品应视为污染物对待，并按照卫生部《微生物生物医学实验室生物安全通则》进行处理。

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