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北京百奥莱博科技有限公司
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冷藏
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博生产销*(代"售")的脑膜炎奈瑟菌荧光PCR检测试剂盒厂家现货,是高品质的细菌PCR检测试剂盒产品,欢迎的您垂询订购。
名称:脑膜炎奈瑟菌荧光PCR检测试剂盒厂家现货
规格:48次/盒
产地:国产|进口
品牌:百奥莱博
欲咨询购买脑膜炎奈瑟菌荧光PCR检测试剂盒厂家现货,请致电北京百奥莱博科技有限公司,为您提供最全面周到的产品服务,除此之外,我公司正在促销以下产品:
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脑膜炎奈瑟菌荧光PCR检测试剂盒厂家现货关键词:SYA111,百奥莱博,脑膜炎奈瑟菌荧光PCR检测试剂盒
·鸡白痢沙门氏菌(SPP.P)单重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA387
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
·副猪嗜血杆菌(HPS)单重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA486
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
一、简介:
本试剂盒用一对副猪嗜血杆菌特异性引物,结合一条特异性探针,用荧光PCR技术对副猪嗜血杆菌核酸进行体外扩增检测,用于临床上对可疑感染者的病原学诊断。
二、用途:
该试剂盒适用于检测气管分泌物拭子、肺组织、关节液等样本中的副猪嗜血杆菌(HPS),用于副猪嗜血杆菌(HPS)感染的辅助诊断,其检测结果仅供临床参考。
三、试剂盒组成:
| 组份 | 数量 | 规格 |
| HPS反应液(HPS-qPCR MIX) | 1管 | 672μL/管 |
| DNA抽提液(DNA Extraction) | 2管 | 1.5mL/管 |
| 酶混合物(Enzymes MIX) | 1管 | 48μL/管 |
| 阴性对照(NTC) | 1管 | 50μL/管 |
| HPS阳性对照(HPS-PTC) | 1管 | 50μL/管 |
四、荧光PCR仪器适用范围:
ABI系列、MJ系列、Roche系列,博日系列及其他荧光定量PCR检测仪。
五、储存条件及有效期:
本试剂盒于-20℃以下保存,有效期为6个月。
六、样品采集、前处理与DNA提取
6.1 样品采集
病死或扑杀猪,无菌采集肺病变部位或病变/非病变部位交界处的样品;生猪灭菌棉拭子沾取气管分泌物,放入无菌试管中;若有关节囊肿,在囊肿表面常规碘酊消毒,用2mL或5mL灭菌注射器穿刺,无菌吸取1-2mL关节渗出液。
6.2 样品前处理
组织样品:每份组织分别从3个不同的位置称取样品约1g,手术剪剪碎混匀后取0.05g于研磨器中研磨,加入1.5mL生理盐水后继续研磨,待匀浆后转至1.5mL灭菌离心管中,8000rpm离心2min,取上清液100μL于1.5mL灭菌离心管中;关节渗出液:直接取100μL进行提取。
6.3 DNA提取
可采用PCR试剂盒配备的DNA抽提液,按以下说明进行DNA核酸的粗提。也可采购北京百奥莱博科技有限公司生产的DNA提取试剂盒(过柱法-荧光配套)或其他合适的商业化产品,并按照相应试剂盒说明进行操作。
对上述处理好的样本加入40uL核酸提取液,100℃恒温处理10min,13000rpm离心5min,取上清液转移至新的1.5mL EP管,-20℃保存;
注:阳性对照和阴性对照为已经抽提好的核酸(无需提取),直接取5µL加入到反应体系中即可。由于阳性对照浓度较高,建议最后在样品制备区域加入阳性对照。
七、检测步骤:
7.1 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光PCR反应液(HPS-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振荡混匀后,10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照),每个测试反应体系配制如下:
| 试剂 | 每个反应加入的量 | N个反应加入的量 |
| 荧光PCR反应液 | 14µL | N×14µL |
| 酶混合物 | 1µL | N×1µL |
| 总量 | 15µL | N×15µL |
计算好各试剂的使用量,加入一适当体积洁净离心管中,充分混匀,10000rpm离心10s,向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液,向每管中加入处理后样品或阴性对照(NTC)和阳性对照(HPS-PTC)5μL,10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qPCR反应条件
将各反应管放入实时荧光PCR仪器的反应槽内。推荐循环条件:
| 1循环 | 50℃ for 2 min | |
| 预变性 | 1循环 | 95℃ for 10 min |
| PCR扩增 | 40循环 | 95℃ for 15 sec 60℃ for 60 sec |
在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团:设置为FAM。淬灭基团:NONE,请勿选择ROX参比荧光。
八、结果分析:
8.1 结果分析条件设定
直接读取检测结果。基线和阈值设定原则根据仪器噪声情况进行调整,以阈值线刚好超过正常阴性样品扩增曲线的最高点为准。
8.2 试验成立判定
(1)阴性对照(NTC):不应产生任何的扩增曲线。
(2)阳性对照(HPS-PTC):均产生扩增曲线。
(3)以上条件应同时满足,否则,此次试验视为无效。
8.3 结果判定
(1)在试验成立的条件下,Ct值≤35的样本为阳性,表明副猪嗜血杆菌核酸阳性。
(2)Ct值显示为无的样本为阴性样本,表明副猪嗜血杆菌核酸阴性。
(3)如果Ct值>35,判为可疑样品。对于可疑样品,先看扩增曲线。如果扩增曲线为对数扩增曲线,则为可疑阳性,否则判为阴性。
(4)对于可疑阳性样品,重新抽提核酸,再次进行副猪嗜血杆菌qPCR检测。如果重复扩增曲线为对数扩增曲线,判为样本阳性,表明副猪嗜血杆菌核酸阳性;否则判为样本阴性。
九、注意事项:
(1)初次使用前请仔细阅读说明书。并严格按照说明书步骤操作。
(2)所有使用的离心管应高压灭菌,而且必须不含DNA酶。
(3)PCR操作应严格按照要求分区(试剂配制区、标本处理区、PCR扩增区等),防止实验室污染。
(4)样本提取、试剂配置、加样需在不同区的超净工作台进行,以免污染。
(5)试剂盒里所有物品应视为污染物对待,并按照卫生部《微生物生物医学实验室生物安全通则》进行处理。
脑膜炎奈瑟菌荧光PCR检测试剂盒厂家现货关键词:SYA111,百奥莱博,脑膜炎奈瑟菌荧光PCR检测试剂盒
·禽流感病毒(AIV)通用单重凝胶PCR检测试剂盒
编号:SYA534
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
·冠状病毒(HKU)单重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA180
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规格:48次/盒
·小肠结肠炎耶尔森菌/弯曲菌双重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA099
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
·鸡白痢沙门氏菌(SPP.P)单重凝胶PCR检测试剂盒
编号:SYA543
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
·禽流感H7N7病毒双重荧光PCR检测试剂盒
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规格:48次/盒
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·牛源性成分单重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA290
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
一、简介
本试剂盒用一对牛源性成分特异性引物,结合一条特异性荧光探针,用荧光PCR技术对牛源性成分DNA进行体外扩增检测。本试剂盒中牛源性成分的探针报告基团为FAM。
二、用途
该试剂盒适合于各种饲料及其它样品中牛源性成分的检测。
三、试剂盒组成(48T)
组成成分 数量 规格
牛物种荧光qPCR反应液(Bos-qPCR MIX) 1管 600μL/管
阴性对照(NTC) 1管 50μL/管
阳性对照(Bos-PTC) 1管 50μL/管
四、储存条件及有效期
本试剂盒于-20℃以下保存,有效期为6个月。
五、荧光PCR仪器适用范围
ABI系列,Bio-Rad系列,Roche系列等荧光定量PCR检测仪等。
六、样品采集与DNA提取
6.1 样品采集
样品的采集按照国家标准《饲料中牛羊源性成分的定性检测定性聚合酶链式反应(PCR)法》(GB/T 20190-2006)要求进行。
6.2 DNA提取
可采购北京百奥莱博科技有限公司生产的DNA提取试剂盒(过柱法-荧光配套)或其他合适的商业化产品,并按照相应试剂盒说明进行操作。
注:阳性对照和阴性对照为已经抽提好的核酸(无需提取),直接取5µL加入到反应体系中即可。由于阳性对照浓度较高,建议最后在样品制备区域加入阳性对照。
七、检测步骤:
7.1 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光PCR反应液(Bos-qPCR MIX),冰上融化并振荡混匀后,10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照),每个测试反应体系配制如下表:
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 15µL N×15µL
向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液,向每管中加入处理后样品/阴性对照(NTC)/阳性对照(Bos-PTC)5μL,10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qPCR反应条件
将各反应管放入实时荧光PCR仪器的反应槽内。
推荐循环条件:
1循环 50℃ for 2 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃ 延伸时收集荧光信号。报告基团:设置为FAM,淬灭基团:NONE,请勿选择ROX 参比荧光。
八、结果分析
8.1 结果分析条件设定
直接读取检测结果。基线和阈值设定原则根据仪器噪声情况进行调整,以阈值线刚好超过正常阴性样品扩增曲线的最高点为准。
8.2 试验成立判定
(1) 阴性对照(NTC):不应产生任何的扩增曲线。
(2) 阳性对照(Bos-PTC):均产生扩增曲线。
(3) 以上条件应同时满足,否则,此次试验视为无效。
8.3 结果判定
(1) 在试验成立的条件下,Ct值≤35的样本为阳性,表明牛源性成分核酸阳性。
(2) Ct值显示为无的样本为阴性样本,表明牛源性成分核酸阴性。
(3) 如果35<Ct值≤40,判为可疑样品。对于可疑样品,先看扩增曲线。如果扩增曲线为对数扩增曲线,则为可疑阳性,否则判为阴性。
(4) 对于可疑阳性样品,重新抽提核酸,再次进行牛源性成分qPCR检测。如果重复扩增曲线为对数扩增曲线,判为样本阳性,表明牛源性成分核酸阳性;否则判为样本阴性。
九、注意事项:
(1) 初次使用前请仔细阅读说明书。并严格按照说明书步骤操作。
(2) 所有使用的离心管应高压灭菌,而且必须不含DNA酶。
(3) PCR操作应严格按照要求分区(试剂配制区、标本处理区、PCR扩增区等),防止实验室污染。
(4) 样本提取、试剂配置、加样需在不同区的超净工作台进行,以免污染。
(5) 试剂盒里所有物品应视为污染物对待,并按照卫生部《微生物生物医学实验室生物安全通则》进行处理。
北京百莱博科技有限公司专业生产细菌PCR检测试剂盒产品,欢迎来电咨询选购脑膜炎奈瑟菌荧光PCR检测试剂盒厂家现货。
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