SYA437型猪钩端螺旋体病荧光PCR检测试剂盒(LPP)优

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

北京百奥莱博生产销*(代"售")的SYA437型猪钩端螺旋体病荧光PCR检测试剂盒(LPP)优惠，是高品质的动物疫病PCR检测试剂盒产品，欢迎的您垂询订购。

名称：SYA437型猪钩端螺旋体病荧光PCR检测试剂盒(LPP)优惠
编号：SYA437
品牌：百奥莱博
规格：48次/盒|96次/盒
等级：科研试剂
一、简介：
本试剂盒用一对钩端螺旋体特异性引物，结合一条特异性探针，用荧光PCR技术对钩端螺旋体的核酸进行体外扩增检测，用于临床上对可疑感染者的病原学诊断。

二、用途
本试剂盒适用于检测动物内脏、血液等样本中的钩端螺旋体，用于钩端螺旋体感染的辅助诊断，其检测结果仅供参考。

三、试剂盒组成：

 

组份	数量	规格
Lep反应液(Lep-qPCR MIX)	1管	672μL/管
核酸提取液(DNA Extraction)	2管	1.5mL/管
酶混合物(Enzymes MIX)	1管	48μL/管
阴性对照(NTC)	1管	50μL/管
Lep阳性对照(Lep-PTC)	1管	50μL/管

四、储存条件及有效期：
本试剂盒于-20℃以下保存，有效期为12个月。

五、荧光PCR仪器适用范围：
ABI系列，Roche系列等荧光定量PCR检测仪等。

六、样品的采集与DNA提取
6.1 样品的采集
病死动物取心、肝、脾、肺、肾、淋巴结等组织1g；活动物用无菌注射器抽取3～5mL 血液。
6.2 样品前处理
每份组织分别从3个不同的位置称取样品约1g，手术剪剪碎混匀后取0.05g于研磨器中研磨，加入 1.5mL 生理盐水后继续研磨，待匀浆后转至 1.5mL 灭菌离心管中，8000rpm离心2min，取上清液 100µL于 1.5mL灭菌离心管中；血液样本：取抗凝血下层血细胞 50µL，加入 100µL 双蒸水吹匀。
6.3 DNA提取
6.3.1 对上述处理好的样本加入等体积核酸提取液(固体标本加入50μL核酸提取液)，100℃恒温处理10min，13000rpm离心5min，取上清液转移至新的1.5mL EP管，-20℃保存；
6.3.2 DNA的提取也可以采用商业化DNA提取试剂盒。
 注：阳性对照和阴性对照为已经抽提好的核酸(无需提取)，直接取5µL加入到反应体系中即可。由于阳性对照浓度较高，建议最后在样品制备区域加入阳性对照。

七、检测步骤：
7.1 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光PCR反应液(Lep-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振荡混匀后，10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照)，每个测试反应体系配制如下表：

试剂	每个反应加入的量	N个反应加入的量
荧光PCR反应液	14µL	N×14µL
酶混合物	1 µL	N×1 µL
总量	15 µL	N×15µL

计算好各试剂的使用量，加入一适当体积洁净离心管中，充分混匀，10000rpm离心10s，向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液，向每管中加入处理后样品或阴性对照(NTC)和阳性对照(Lep-PTC)5μL，10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qPCR反应条件
将各反应管放入定量PCR仪器的反应槽内。推荐循环条件：

	1循环	50℃ for 2 min
预变性	1循环	95℃ for 10 min
PCR扩增	40循环	95℃ for 15 sec 60℃ for 60 sec

在60℃延伸时收集荧光信号 。报告基团：设置为FAM。淬灭基团：NONE，请勿选择ROX参比荧光。

八、结果分析：
8.1 结果分析条件设定
直接读取检测结果。基线和阈值设定原则根据仪器噪声情况进行调整，以阈值线刚好超过正常阴性样品扩增曲线的最高点为准。
8.2 试验成立判定
（1）阴性对照(NTC)：不应产生任何的扩增曲线。
（2）阳性对照(Lep-PTC)：均产生扩增曲线。
（3）以上条件应同时满足，否则，此次试验视为无效。
8.3 结果判定
(1)在试验成立的条件下，Ct值≤35，且曲线有明显的指数增长曲线，表明Lep核酸阳性。
（2）Ct值显示为无的样本为阴性样本，表明Lep核酸阴性。
（3）如果Ct值>35，判为可疑样品。对于可疑样品，先看扩增曲线。如果扩增曲线为对数扩增曲线，则为可疑阳性，否则判为阴性。
（4）对于可疑阳性样品，重新抽提核酸，再次进行Lep 检测。如果重复扩增曲线为对数扩增曲线，判为样本阳性，表明Lep核酸阳性；否则判为样本阴性。

九、注意事项：
（1）初次使用前请仔细阅读说明书。并严格按照说明书步骤操作。
（2）所有使用的离心管最好高压灭菌，而且必须不含DNA酶。
（3）PCR操作应严格按照要求分区(试剂配制区、标本处理区、PCR扩增区等)，防止实验室污染。
（4）样本提取、试剂配置、加样需在不同区的超净工作台进行，以免污染。
（5）试剂盒里所有物品应视为污染物对待，并按照卫生部《微生物生物医学实验室生物安全通则》进行处理。

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·猪源性成分单重荧光PCR检测试剂盒
编号：SYA294
等级：科研实验专用
规格：48次/盒
一、简介：
本试剂盒用一对猪源性成分特异性引物，结合一条特异性荧光探针，用荧光PCR技术对猪源性成分DNA进行体外扩增检测。本试剂盒中猪源性成分的探针报告基团为FAM。

二、用途：
该试剂盒适合于各种饲料及其它样品中猪源性成分的检测。

三、试剂盒组成：(40T/Kit)
组份 数量 规格
猪物种荧光qPCR反应液(Pork-qPCR MIX) 1管 720μL/管
DNA抽提液(DNA Extraction) 2管 1.5mL/管
阴性对照(NTC) 1管 50μL/管
阳性对照(Pork-PTC) 1管 50μL/管

四、储存条件及有效期：
本试剂盒于-20℃以下保存，有效期为6个月。

五、荧光PCR仪器适用范围：
ABI系列，Bio-Rad系列，Roche系列等荧光定量PCR检测仪等。

六、样品采集与DNA提取
6.1 样品采集
样品的采集与预培养按照样品的采集按照国家标准《饲料中牛羊源性成分的定性检测定性聚合酶链式反应(PCR)法》(GB/T 20190-2006)要求进行。
6.2 DNA提取
可按常规方法提取，也可采用商品化试剂盒提取DNA。
6.2.1 动物组织、食品或饲料：直接取约50mg上述材料，匀浆后置入洁净的1.5mL离心管中，加50μl DNA抽提液充分混匀(提取液用前需室温溶解并充分混匀)后100℃15min，4℃降温5min，13000rpm离心5min，取上清液5μL进行PCR反应。
6.2.2 血液：取500μL摇匀的抗凝血转至一洁净的1.5mL离心管中，加入1mL双蒸水，剧烈震荡30s，8000rpm离心5min，弃上清。重复清洗至无明显红色沉淀。加入1mL生理盐水，剧烈震荡15s，10000rpm离心5min，弃上清。沉淀加50μl DNA抽提液并与沉淀混匀，100℃恒温15min，4℃降温5min。13000rpm离心5min，取上清5μL进行PCR反应。
 注：阳性对照和阴性对照为已经抽提好的核酸(无需提取)，直接取5µL加入到反应体系中即可。由于阳性对照浓度较高，建议最后在样品制备区域加入阳性对照。

七、检测步骤
7.1 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光PCR反应液(Pork-qPCR MIX)，冰上融化并振荡混匀后，10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照)，每个测试反应体系配制如下表：
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 15µL N×15µL
向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液，向每管中加入处理后样品/阴性对照(NTC)/阳性对照(Pork-PTC)5μL，10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qPCR反应条件
将各反应管放入实时荧光PCR仪器的反应槽内。
推荐循环条件:
1循环 50℃ for 2 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团：设置为FAM

八、结果分析：
8.1 结果分析条件设定
直接读取检测结果。基线和阈值设定原则根据仪器噪声情况进行调整，以阈值线刚好超过正常阴性样品扩增曲线的最高点为准。
8.2 试验成立判定
(1)阴性对照(NTC)：不应产生任何的扩增曲线。
(2)阳性对照(Pork-PTC)：均产生扩增曲线。
(3)以上条件应同时满足，否则，此次试验视为无效。
8.3 结果判定
(1)在试验成立的条件下，Ct值≤35的样本为阳性，表明猪源性成分核酸阳性。
(2)Ct值显示为无的样本为阴性样本，表明猪源性成分核酸阴性。
(3)如果35＜Ct值≤40，判为可疑样品。对于可疑样品，先看扩增曲线。如果扩增曲线为对数扩增曲线，则为可疑阳性，否则判为阴性。
(4)对于可疑阳性样品，重新抽提核酸，再次进行猪源性成分qPCR检测。如果重复扩增曲线为对数扩增曲线，判为样本阳性，表明猪源性成分核酸阳性；否则判为样本阴性。

九、注意事项：
(1)初次使用前请仔细阅读说明书。并严格按照说明书步骤操作。
(2)所有使用的离心管应高压灭菌，而且必须不含DNA酶。
(3)PCR操作应严格按照要求分区(试剂配制区、标本处理区、PCR扩增区等)，防止实验室污染。
(4)样本提取、试剂配置、加样需在不同区的超净工作台进行，以免污染。
(5)试剂盒里所有物品应视为污染物对待，并按照卫生部《微生物生物医学实验室生物安全通则》进行处理。



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·大肠埃希菌O157:H7单重荧光PCR检测试剂盒
编号：SYA008
英文名称：Fluorescent PCR detection kit for Escherichia coli O157:H7
等级：科研实验专用
规格：48次/盒

·登革热Ⅰ/Ⅱ/Ⅲ/Ⅳ病毒四重荧光PCR检测试剂盒
编号：SYA252
英文名称：Fluorescent PCR detection kit for Escherichia coli O157:H7
等级：科研实验专用
规格：48次/盒

·鼻疽伯克霍尔德菌/类鼻疽伯克霍尔德菌双重荧光PCR检测试剂盒
编号：SYA136
英文名称：Fluorescent PCR detection kit for Escherichia coli O157:H7
等级：科研实验专用
规格：48次/盒

·口蹄疫(FMDV)单重凝胶PCR检测试剂盒
编号：SYA556
英文名称：Fluorescent PCR detection kit for Escherichia coli O157:H7
等级：科研实验专用
规格：10次/盒|48次/盒

·高致病性猪蓝耳病毒(hp-PRRSV)单重凝胶PCR检测试剂盒
编号：SYA560
英文名称：Fluorescent PCR detection kit for Escherichia coli O157:H7
等级：科研实验专用
规格：48次/盒

·超广谱β-内酰胺酶(ESBL)肺炎克雷伯菌单重荧光PCR检测试剂盒
编号：SYA050
英文名称：Fluorescent PCR detection kit for Escherichia coli O157:H7
等级：科研实验专用
规格：48次/盒

·副伤寒沙门杆菌单重荧光PCR检测试剂盒(有甲乙丙三型)
编号：SYA060
英文名称：Fluorescent PCR detection kit for Escherichia coli O157:H7
等级：科研实验专用
规格：48次/盒

·牛口蹄疫亚I型抗体ELISA检测试剂盒
编号：SYA662
英文名称：Fluorescent PCR detection kit for Escherichia coli O157:H7
等级：科研实验专用
规格：192次/盒|480次/盒

·猪流行性腹泻(PEDV)单重凝胶PCR检测试剂盒
编号：SYA567
英文名称：Fluorescent PCR detection kit for Escherichia coli O157:H7
等级：科研实验专用
规格：48次/盒

·嗜麦芽窄食单胞菌单重荧光PCR检测试剂盒
编号：SYA047
英文名称：Fluorescent PCR detection kit for Escherichia coli O157:H7
等级：科研实验专用
规格：48次/盒

·恙虫病立克次体单重荧光PCR检测试剂盒
编号：SYA131
英文名称：Fluorescent PCR detection kit for Escherichia coli O157:H7
等级：科研实验专用
规格：48次/盒
一、简介：
本试剂盒用一对恙虫病立克次体特异性引物，结合一条特异性探针，用荧光PCR技术对恙虫病立克次体的核酸进行体外扩增检测，用于临床上对可疑感染者的病原学诊断。

二、用途：
该试剂盒适合于检测全血等样本中的恙虫病立克次体，用于恙虫病立克次体感染的辅助诊断，其检测结果仅供参考。

三、试剂盒组成：(48T)
组份 数量 规格
恙虫病立克次体反应液(qPCR MIX) 1管 720μL/管
DNA抽提液(DNA Extraction) 2管 1.5mL/管
阴性对照(NTC) 1管 50μL/管
恙虫病立克次体阳性对照(PTC) 1管 50μL/管

四、储存条件及有效期：
本试剂盒于-20℃以下保存，有效期为6个月。

五、荧光PCR仪器适用范围：
ABI系列、MJ系列、Roche系列，博日系列及其他荧光定量PCR检测仪。

六、样品采集、前处理与DNA提取
6.1 样品的采集
用注射器取血5mL至EDTA-2Na抗凝管。
6.2 样本前处理
取抗凝血下层血细胞50μL，加入100μL双蒸水吹匀。
6.3 DNA提取
可采用PCR试剂盒配备的DNA抽提液，按以下说明进行DNA核酸的粗提。也可采购北京百奥莱博科技有限公司生产的DNA提取试剂盒(过柱法-荧光配套)或其他合适的商业化产品，并按照相应试剂盒说明进行操作。
对上述处理好的样本加入等体积核酸提取液(固体标本加入50μL核酸提取液)，100℃恒温处理10min，13000rpm离心5min，取上清液转移至新的1.5mL EP管，-20℃保存；
 注：阳性对照和阴性对照为已经抽提好的核酸(无需提取)，直接取5µL加入到反应体系中即可。由于阳性对照浓度较高，建议最后在样品制备区域加入阳性对照。

七、检测步骤
7.1 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光PCR反应液(qPCR MIX)，冰上融化并振荡混匀后，10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照)，每个测试反应体系配制如下表：
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 15µL N×15µL
计算好各试剂的使用量，加入一适当体积洁净离心管中，充分混匀，10000rpm离心10s，向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液，向每管中加入处理后样品/阴性对照(NTC)/阳性对照(PTC)5μL，10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qPCR反应条件
将各反应管放入实时荧光PCR仪器的反应槽内。
推荐循环条件:
1循环 50℃ for 2 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团：设置为FAM。淬灭基团：NONE，请勿选择ROX 参比荧光。

八、结果分析
8.1 结果分析条件设定
直接读取检测结果。基线和阈值设定原则根据仪器噪声情况进行调整，以阈值线刚好超过正常阴性样品扩增曲线的最高点为准。
8.2 试验成立判定
（1） 阴性对照：不应产生任何的扩增曲线。
（2） 阳性对照：均产生扩增曲线。
（3） 以上条件应同时满足 ，否则，此次试验视为无效。
8.3 结果判定
（1） 在试验成立的条件下，Ct值≤35的样本为阳性，表明恙虫病立克次体核酸阳性。
（2） Ct值显示为无的样本为阴性样本，表明恙虫病立克次体核酸阴性。
（3） 如果Ct值>35，判为可疑样品。对于可疑样品，先看扩增曲线。如果扩增曲线为对数扩增曲线，则为可疑阳性，否则判为阴性。
（4） 对于可疑阳性样品，重新抽提核酸，再次进行恙虫病立克次体qPCR检测。如果重复扩增曲线为对数扩增曲线，判为样本阳性，表明恙虫病立克次体核酸阳性；否则判为样本阴性。

九、注意事项：
（1） 初次使用前请仔细阅读说明书。并严格按照说明书步骤操作。
（2） 所有使用的离心管最好高压灭菌，而且必须不含DNA酶。
（3） PCR操作应严格按照要求分区(试剂配制区、标本处理区、PCR扩增区等)，防止实验室污染。
（4） 样本提取、试剂配置、加样需在不同区的超净工作台进行，以免污染。
（5） 试剂盒里所有物品应视为污染物对待，并按照卫生部《微生物生物医学实验室生物安全通则》进行处理。



SYA437型猪钩端螺旋体病荧光PCR检测试剂盒(LPP)优惠关键词：SYA437,猪钩端螺旋体病荧光PCR检测试剂盒,LPP,百奥莱博,猪钩端螺旋体病荧光PCR检测试剂盒(LPP)


·肠出血性大肠杆菌(O104:H4)单重荧光PCR检测试剂盒
编号：SYA083
等级：科研实验专用
规格：48次/盒

·蜱传出脑炎病毒单重荧光PCR检测试剂盒
编号：SYA240
等级：科研实验专用
规格：48次/盒

·副溶血性弧菌/霍乱弧菌双重荧光PCR检测试剂盒
编号：SYA097
等级：科研实验专用
规格：48次/盒

·间日疟原虫单重荧光PCR检测试剂盒
编号：SYA124
等级：科研实验专用
规格：48次/盒
一、简介：
本试剂盒用一对间日疟原虫特异性引物，结合一条特异性荧光探针，用荧光PCR 探针技术进行间日疟原虫的检测。

二、用途：
本试剂盒可用于间日疟原虫检测鉴定及突发公共卫生事件的处置，还可用于间日疟原虫的环境监测、卫生检疫及感染的辅助诊断，其检测结果仅供临床参考。

三、试剂盒组成：(48T)
组份 数量 规格
间日疟原虫荧光PCR 反应液(qPCR MIX) 1管 672μL/管
DNA抽提液(DNA Extraction) 2管 1.5mL/管
酶混合物(DNA Polymerase MIX) 1管 48μL/管
阴性对照(NTC) 1管 50μL/管
间日疟原虫阳性对照(PTC) 1管 50μL/管

四、荧光PCR 仪器适用范围
ABI 系列，Bio-Rad 系列，Roche 系列等荧光定量PCR 检测仪等。

五、储存条件及有效期：
本试剂盒于-20℃保存，避免反复冻融，有效期为6 个月。

六、实验操作步骤
6.1 标本采集
血液：用一次性无菌5ml 注射器抽取疑似人或动物血3-5ml，置于枸橼酸*或EDTA2Na 抗凝管中，摇匀送检。
肺脏等组织：取上述组织1g左右，置于1.5ml洁净EP管中送检。
乳液、体液等标本：取相应标本3-5ml，转至1.5ml洁净EP管中送检。
6.2 DNA提取
可采用PCR试剂盒配备的DNA抽提液，按以下说明进行DNA核酸的粗提。也可采购北京百奥莱博科技有限公司生产的DNA提取试剂盒(过柱法-荧光配套)，并按照相应试剂盒说明进行操作。
血液样本：直接取200μl 抗凝血，转至一洁净的1.5ml 离心管中，加入1ml 双蒸水，剧烈震荡30s，8000rpm 离心5min，弃上清，至无明显红色沉淀。(若沉淀明显，请再重复上述步骤一次)。加入1ml生理盐水，剧烈震荡15s，13000rpm 离心5min，弃上清。沉淀加入50μl 核酸提取液(使用前请室温溶解并充分混匀)并与沉淀混匀，100℃恒温10min，13000rpm 离心3min，取上清4μl进行PCR反应。
肺、淋巴结等固体组织：剪取约0.1g 组织，用生理盐水洗去血污，剪碎加入0.5mL TE转移到匀浆器中匀浆。将匀浆液50μl转移到1.5mL 离心管中，加入50μl 核酸提取液(使用前请室温溶解并充分混匀)并与沉淀混匀，100℃恒温10min，13000rpm 离心3min，取上清4μl进行PCR反应。
乳液等液体标本：取标本2-3mL，13000rpm 离心3min，弃上清，沉淀加入50μl核酸提取液(使用前请室温溶解并充分混匀)并与沉淀混匀，100℃恒温10min，13000rpm离心3min，取上清4μl进行PCR反应。
 注：阳性对照和阴性对照为已经抽提好的核酸(无需提取)，直接取5μL 加入到反应体系中即可。由于阳性对照浓度较高，建议最后在样品制备区域加入阳性对照。

七、检测步骤：
7.1 PCR 扩增
从试剂盒中取出荧光PCR 反应液(间日疟原虫-qPCR MIX)、酶混合物(DNA Polymerase MIX)，室温融化并振荡混匀后，10000rpm 离心10s。
设所需要的PCR 反应管管数为N(N=样本数+1 管阴性对照+1 管阳性对照)，每个测试反应体系配制如下表：
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 14µL N×14µL
酶混合液 1µL N×1µL
总量 15µL N×15µL
计算好各试剂的使用量，加入一适当体积洁净离心管中，充分混匀，10000rpm 离心10s，向设定的N个PCR 反应管中分别加入15μL，向每管中加入处理后样品或阴性对照(NTC)和阳性对照(PTC)5μL，10000rpm 瞬时离心10 秒。
7.2 qPCR反应条件
将各反应管放入定量PCR仪器的反应槽内。
推荐循环条件:
1循环 50℃ for 2 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团：设置为FAM。淬灭基团：NONE，请勿选择ROX参比荧光。

八、结果分析：
8.1 结果分析条件设定
直接读取检测结果。基线和阈值设定原则根据仪器噪声情况进行调整，以阈值线刚好超过正常阴性样品扩增曲线的最高点为准。
8.2 试验成立判定
(1)阴性对照(NTC)：不应产生任何的扩增曲线。
(2)阳性对照(PTC)：均产生扩增曲线。
(3)以上条件应同时满足，否则，此次试验视为无效。
8.3 结果判定
(1)在试验成立的条件下，Ct值≤35的样本为阳性，表明间日疟原虫核酸阳性。
(2)Ct值显示为无的样本为阴性样本，表明间日疟原虫核酸阴性。
(3)如果35＜Ct值≤40，判为可疑样品。对于可疑样品，先看扩增曲线。如果扩增曲线为对数扩增曲线，则为可疑阳性，否则判为阴性。
(4)对于可疑阳性样品，重新抽提核酸，再次进行间日疟原虫real time PCR检测。如果重复扩增曲线为对数扩增曲线，判为样本阳性，表明间日疟原虫核酸阳性；否则判为样本阴性。

九、注意事项：
(1)初次使用前请仔细阅读说明书。并严格按照说明书步骤操作。
(2)所有使用的离心管应高压灭菌，而且必须不含DNA 酶。
(3)PCR 操作应严格按照要求分区(试剂配制区、标本处理区、PCR 扩增区等)，防止实验室污染。
(4)样本提取、试剂配置、加样需在不同区的超净工作台进行，以免污染。
(5)试剂盒里所有物品应视为污染物对待，并按照卫生部《微生物生物医学实验室生物安全通则》进行处理。

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