北京2×PCR Master Mix(不含染料)价格

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名称：北京2×PCR Master Mix(不含染料)价格
产地：国产|进口
编号：SY0026
品牌：百奥莱博
规格：1ml
英文名：2×PCR Master Mix(No dye)
2×PCR Master Mix(No dye)是即用型的常规PCR预混合溶液，含有Taq DNA Polymerase，dNTP混合物，MgCl2以及优化的缓冲体系，只需加入引物和模板即可进行扩增，大大简化实验的操作步骤，提高了高通量操作和实验结果的重现性。

体系中不含有*酚蓝染料，其中的保护剂使得Master Mix 4ºC条件下长期放置，或经过反复冻融后仍可维持酶的活性以及产品的稳定性。PCR产物具有3’-dA突出端，可轻松克隆至T载体。

活性定义：用活性化的大马哈鱼精子作为模板/引物，在74ºC，30min内摄入10 nmol的全核苷酸为酸性不溶物的活性定义为1个活性单位（U）。

质量控制：
核酸外切酶残留检测：20 μl本品和0.6 μg λ-Hind Ⅲ在74 ºC下孵育1小时，DNA的电泳谱带不发生变化。
核酸内切酶残留检测：20 μl本品和0.6 μg Supercoiled pBR322 DNA在74 ºC下孵育1小时，DNA的电泳谱带不发生变化。
大肠杆菌残留DNA检测: 50 μl体系中，以ddH2O为模板，扩增E.coil 16s rDNA基因。35个循环后扩增产物进行1% 琼脂糖凝胶电泳，EB染色，无扩增条带。
功能检测：50μl体系中，以100 ng人基因组DNA为模板扩增α-1-antitrypsin基因。30个循环后取10% PCR产物进行1% 琼脂糖凝胶电泳，EB染色，观察到单一的360 bp条带。
稳定性检测：2×PCR Master Mix分别在-20 ºC放置1年、4 ºC放置3个月、25 ºC放置1个月后，菌落PCR扩增1.2kb片段。电泳结果显示2×PCR Master Mix具有非常好的稳定性。

 

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·GATA-GFP报告基因质粒
编号：SY0177
英文名称：GATA GFP Reporter Plasmid
规格：1μg
GATA-GFP报告基因是用于检测GATA转录活性水平为目的的报告基因。GATA(globin transcription factor)转录因子家族包括6锌指结合蛋白调控细胞的增殖和分化。GATA家族成员涉及造血、心脏和消化道的发育。

GATA-GFP报告基因主要用于检测细胞中球蛋白信号通路、药物研究、基因过表达和RNAi的表型分析等。

pGMGATA-GFP是我公司改造后的哺乳动物真核表达载体，在其多克隆位点插入了多个GATA结合位点，可以高效地检测GATA的激活水平。由于载体采用了GFP作为报告基因，更便于后续的检测。同时，对载体中预测出的其它转录因子以外的结合位点进行了适当的突变，增加了质粒的转录因子结合特异性。另外，由于质粒体积减小，使得GATA-GFP报告基因更易于转染。

质粒图谱



pGM GATA -GFP质粒测序引物
5’-TAGCAAAATAGGCTGTCCC-3’

使用说明
pGMGATA-GFP可以采用常规转染方法转染哺乳动物细胞。

注意事项
1）本质粒未经我公司允许不得用于任何商业用途，也不得移交给订货人实验室以外的任何人或单位。
2）为了您的健康，实验操作时请穿实验服和带一次性手套。

储存条件：-20℃。


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·重组烟草蚀纹病毒蛋白酶
编号：SY0385
英文名称：rTEV Protease
规格：1000U
重组型TEV蛋白酶（rTEV）是经过基因工程改造和纯化后的重组蛋白酶，不仅保持天然TEV酶的功能活性，且在广谱的温度范围内表现出更好的稳定性和特异性。rTEV是一种用来切除融合蛋白上亲和标签的常用工具酶，具有很强的位点特异性，严格识别七*基酸序列EXXYXQ↓(G/S)，切割位点在谷*酰胺和甘*酸/丝*酸之间。普遍应用的七*基酸序列为：Glu-Asn-Leu-Tyr-Phe-Gln↓-Gly。rTEV在pH 7.0，30℃时可达到最佳活性，但在pH 6.0-8.5和温度4-30℃的广泛范围内皆有活性（见表1），使得反应条件的选择可根据目的蛋白的情况而灵活变动。另外rTEV切割后也能利用其N端的 6×His标签，通过Ni-NTA树脂去除，以达到纯化目的蛋白的目的。

表1. 不同温度下rTEV酶切活性

应时间	不同温度下剪切活性(%)
	4℃	16℃	21℃	30℃
1 h	34	58	56	70
2 h	58	80	78	90
3 h	71	99	99	99
3.5h	84	99	99	99

影响天然TEV酶活性的常见因素：1）PMSF和AEBSF（1 mM），TLCK（1 mM），Bestatin（1 mg/ml）、Pestatin A（1 mM），EDTA（1 mM）以及E-64（3 mg/ml），以上这些蛋白酶抑制剂对rTEV的活性没有影响；2）Zn离子（＞5 mM）对rTEV活性有抑制；3）与半胱*酸反应的试剂也是rTEV的潜在抑制剂。

来源：大肠杆菌
外观：无色透明液体
比活力：5 U/μl
活性定义：在1×rTEV Buffer（50 mM Tris，pH8.0，0.5 mM EDTA，1mM DTT）中，30℃反应1h，剪切>85%的3 μg底物所需要的酶量定义为一个活性单位。
纯化（Purification ）：Ni亲和纯化
纯度：≥95%（by SDS-PAGE）

产品组份：
rTEV Protease（5 U/μl）—————200 μl
rTEV Buffer 1（20×）——————2 ml
rTEV Buffer 2（1000×）—————50μl

储存条件：-20℃，有效期一年。


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