Annexin V-PE/7-AAD细胞凋亡检测试剂盒北京厂

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

Annexin V-PE/7-AAD细胞凋亡检测试剂盒北京厂家的品牌：百奥莱博，是优质的细胞凋亡与增殖产品，用于科研实验，本产品质量好，且极具价格优势，深为用户称道，了解更多Annexin V-PE/7-AAD细胞凋亡检测试剂盒等细胞凋亡与增殖产品请联*(代"系")我司咨询订购。

名称：Annexin V-PE/7-AAD细胞凋亡检测试剂盒北京厂家
产地：国产|进口
规格：20T
英文名：Annexin V-PE/7-AAD Apoptosis Detection Kit
品牌：百奥莱博
编号：SY0479
Annexin V-PE/7-AAD细胞凋亡检测试剂盒是用红色荧光染料PE（Phycoerythrin）标记的Annexin V作为探针，来检测细胞早期凋亡的发生，可用荧光显微镜、流式细胞仪或其他荧光检测设备进行检测。

其检测原理为：在正常的活细胞中，磷脂酰丝*酸（phosphotidylserine，PS）位于细胞膜的内侧，但在早期凋亡的细胞中，PS 从细胞膜的内侧翻转到细胞膜的表面，暴露在细胞外环境中。Annexin-Ⅴ（膜联蛋白-V）是一种分子量为35-36KD的Ca2+ 依赖性磷脂结合蛋白，能与PS高亲和力结合。可通过细胞外侧暴露的磷脂酰丝*酸与凋亡早期细胞的胞膜结合。

另外，本试剂盒中提供的7-AAD可用来区分存活的早期细胞和坏死或晚期凋亡细胞。7-AAD是一种核酸染料，同PI有着相似的荧光特性，但其发射光谱较PI窄，对其他检测通道的干扰更小，在多色荧光分析中是PI的最佳替代品，可与Annexin V联合使用。该染料不能透过正常细胞或早期凋亡细胞的完整的细胞膜，但可穿透晚期凋亡细胞或者坏死细胞并与其内的DNA结合。因此将Annexin V-PE与7-AAD联合使用时，7-AAD则被排除在活细胞（Annexin V-/7-AAD-）和早期凋亡细胞（Annexin V+/7-AAD-）之外，而晚期凋亡细胞和坏死细胞同时被Annexin V-PE和7-AAD结合染色呈现双阳性（Annexin V+/7-AAD+）。

试剂盒组份：
重组人Annexin V/PE（rh Annexin V/PE）—————100µl
7-AAD Viability Staining Solution（20µg/ml）——200µl
4×Binding Buffer————————————————4ml

注意事项

1) 试剂在开盖前请短暂离心，将盖内壁上的液体甩至管底，避免开盖时液体洒落。
2) 由于细胞凋亡是一个快速的过程，建议样品在染色后1小时之内进行分析。
3) 对于贴壁细胞，消化是一个关键步骤。贴壁细胞诱导细胞凋亡时如有漂浮细胞，需收集漂浮细胞和贴壁细胞后合并染色。处理贴壁细胞时要小心操作，尽量避免人为的损伤细胞。胰酶消化时间过短，细胞需要用力吹打才能脱落，容易造成细胞膜的损伤，7-AAD摄入过多；消化时间过长，细胞膜同样易造成损伤，甚至会影响细胞膜上磷脂酰丝*酸与Annexin V-PE的结合。消化时将胰酶铺满孔板底后，轻摇时胰酶与细胞充分接触，然后倒掉大部分胰酶，利用剩余的少量胰酶再消化一段时间，待细胞间空隙增大，瓶底呈花斑状即可终止。在消化液中尽量不用EDTA，EDTA会影响Annexin V与PS的结合。
4) 如果样品来源于血液，请务必除去血液中的血小板。因为血小板含有PS，能与Annexin V结合，从而干扰实验结果。可以使用含有EDTA的缓冲剂并低速离心（200×g）洗去血小板，然后用Annexin V结合缓冲液清洗细胞，以避免残留的EDTA会螯合Ca2+。
5) 7-AAD为潜在致癌物，操作时请采取防护措施，穿防护服、戴手套等。
6) Annexin V-PE和7-AAD是光敏物质，在操作时请注意避光。

储存条件：4℃，有效期一年。

Annexin V-PE/7-AAD细胞凋亡检测试剂盒北京厂家极具性价比，此外，我公司正火爆促销以下产品：

·碱性磷酸酶活性检测试剂盒
编号：SY0467
英文名称：Alkaline Phosphatase Activity Detection Kit
规格：100T
本品为碱性磷酸酶活性检测试剂盒，可快速、便捷地检测细胞或组织裂解液/匀浆液、血清、血浆、尿液、纯化酶等样品中的ALP活性。该试剂盒包括标准品和空白对照，可进行达100个样品的检测。

碱性磷酸酶（Alkaline Phosphatase，简写为ALP或AKP），又称碱性磷酸酯酶，是一组同工酶，目前已发现六种ALP1-ALP6。广泛分布于人体肝脏、骨骼、肠、肾和胎盘等组织，是经肝脏向胆外排出的一种酶。碱性条件下可催化磷酸酯键的水解，从而将底物分子上的磷酸基团去除，转化为羟基。此类底物包括核酸（DNA、RNA）、蛋白、生物碱等。常见的有肠道碱性磷酸酶、非组织特异性碱性磷酸酶、胎盘碱性磷酸酶等；生物学中碱性磷酸酶（ALP）水平的变化及其活性的高低常被作为一种检测组织行为的指标，如：1）作为iPS成功诱导的标志；ALP在大多数细胞类型中均有表达，但是在iPS细胞内的表达水平明显升高；2）结肠癌细胞分化程度定性和定量的指标；3）血清中碱性磷酸酯酶的升高可导致高碱性磷酸酶血症，常被认为和恶性胆管阻塞，原发性硬化胆管炎，肝癌，肝硬化等肝胆疾病密切相关；4）血清中碱性磷酸酶活性升高还和骨骼损伤导致的骨生成，以及骨骼疾病如纤维骨炎、佝偻病、成骨不全等密切相关；5）碱性磷酸酶水平也会出现一些病理性降低的情况，多见于重症慢性肾炎、儿童甲状腺机能不全、贫血等。对于正常成人来说，血清内ALP的范围为40-150U/L。

对硝基*(代"*")磷酸（p-nitrophenyl phosphate, pNPP）是一种常用的磷酸酶显色底物，碱性条件下，可在ALP作用下生成对硝基*(代"*")酚（p-nitrophenol, pNP），后者在碱性环境下呈黄色产物，并在405nm处可检测到最大吸收峰。产物黄色越深，说明ALP活性越高，反之则活性越低。因此，通过检测OD405吸光值即可计算ALP活性水平。

产品规格：

 

ALP反应缓冲液 ALP Assay Buffer	15ml	-20℃
显色底物 pNPP Substrate	2管	-20℃避光
pNP标准品溶液p-nitrophenol Standard	100ul (10mM)	-20℃避光
反应终止液 Stop Solution	12ml	-20℃

储存条件：-20℃，有效期一年。

注意事项
1） 如果进行酶活力的绝对定量，进行酶反应时必须注意精确计时。此时推荐孵育30min等较长时间，以减小操作过程中的时间误差。如果样品中酶活性较高，则可以预先适当稀释样品。
2）样品溶液中须避免出现EDTA、*离子、柠檬酸盐等碱性磷酸酶抑制剂。
3）ALP反应缓冲液和p-nitrophenol标准品溶液对人体有害，请注意适当防护。反应终止液有腐蚀性，请小心操作。
4）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

1. 试剂准备
将所有试剂取出，恢复至室温使用。
1） 显色底物溶液：取一管显色底物，溶解于2.5ml的ALP反应缓冲液中，充分溶解和混匀，冰上放置。注意：新鲜配制的显色底物溶液需在数小时（≤ 6h）内使用。
2） 标准品工作液：取10μl p-nitrophenol标准品溶液(10mM)，用ALP反应缓冲液稀释至0.2ml，使得终浓度为0.5mM。

2．样品准备
1） 细胞或组织裂解液的准备：采用适当细胞或组织裂解液裂解细胞和组织，如果有必要需进行适当匀浆，随后离心取上清，用于ALP活性的检测。注意：裂解液中不能含有磷酸酶抑制剂。样品可以-80℃冻存，避免反复冻融。
2） 血浆、血清和尿液的准备：血浆和血清按照常规方法制备后可以直接用于本试剂盒的测定，但为了消除样品本身颜色的干扰，需设置加了血浆或血清但不加底物的对照。注意：血浆制备不能用含EDTA和柠檬酸盐的抗凝管。尿液通常也可以直接用于测定。上述样品可以-80℃冻存，避免反复冻融。
3） 样品的稀释：若样品中含有较高活性的ALP，可以使用原有的裂解液或PBS等进行稀释，也可以采用试剂盒中的ALP反应缓冲液进行稀释。若使用上述反应缓冲液进行稀释，需保留足够的缓冲液用于试剂盒的检测过程。

3．加样
参考下表使用96孔板设置空白对照孔、标准品孔和样品孔。标准品的用量分别为4、8、16、24、32和 40μl，样品通常可以直接加50μl。如果样品中的碱性磷酸酶活性过高，可以减少样品用量或适当稀释后再进行测定。

表1 各组分加样数据表

	空白对照（Blank）	标准品（Standard）	样品（Sample）
ALP反应缓冲液	50μl	(100-x)μl	(50-y) μl
显色底物	50μl	－	50μl
样品	－	－	yμl
标准品工作液	－	xμl	－

4. 混匀：用枪头轻轻吹打混匀，也可借助摇床进行混匀。

5. 孵育：37℃孵育5-10min。（待测样品中ALP活性较低时，可适当延长孵育时间至30min）

6. 终止：每孔加入100μl反应终止液终止反应。此时，标准品或有ALP活性的孔会呈现不同深浅的黄色。

7. 检测：405nm测定吸光度。如果不能测定405nm，也可以在400-415nm范围内检测吸光度。如果不能立即测定，可以在数小时内完成测定，所显现的黄色在数小时（≤ 6h）内稳定。

8. 结果分析
碱性磷酸酶活性单位的定义：在pH9.8的二乙醇胺（diethanolamine, DEA）缓冲液中，37℃条件下，每分钟水解pNPP显色底物产生1μm p-nitrophenol所需的ALP量定义为一个酶活力单位，也被称作一个DEA酶活力单位。在pH9.6的甘*酸缓冲液中，25℃条件下，每分钟水解pNPP显色底物产生1μm p-nitrophenol所需的ALP量定义为一个酶活力单位，也被称作一个甘*酸酶活力单位。一个甘*酸酶活力单位约相当于3个DEA酶活力单位。本试剂盒测定的是DEA酶活力单位。

最后，根据酶活性单位的定义，计算出样品中的碱性磷酸酶活性。


Annexin V-PE/7-AAD细胞凋亡检测试剂盒北京厂家关键词：Annexin V-PE/7-AAD Apoptosis Detection Kit,SY0479,Annexin V-PE/7-AAD细胞凋亡检测试剂盒

ARB13758 鸭γ干扰素(IFN-γ)Elisa定量检测 Duck interferon γ ,ifn-γ ELISA KIT
ARB14222 人肌酸激酶同工酶MM(CK-MM)代做ELISA实验 
乙酰胆碱酯酶 SDP 9000-81-1
ARB13235 小鼠淋巴细胞趋化因子(Lptn/LTN/XCL1)免费代测 Mouse lymphotactin,lptn/ltn ELISA KIT
琥珀酸脱*酶染色液(四唑盐法)   60ml
粘蛋白胭脂红 GDH-TPI 51395-97-2
ARB10654 人血管生成素样蛋白3(ANGPTL3)elisa检测 Human angiopoietin-like protein 3,angptl3 ELISA KIT
淀粉酶(AMS)检测试剂盒(碘-淀粉比色法)   100T|200T
腺苷脱*酶 Spectinomycin HCl 9026-93-1
ARB11289 人*调结合蛋白(CALD)Elisa方法检测 Human caldesmon,cald ELISA KIT
PY08-069  四硫*(代"磺")酸盐亮绿培养基 10ml  20支/盒，用于沙门氏菌选择性增菌培养
ARB13137 小鼠前列腺素E2(PGE2)酶免分析 Mouse prostaglandin e2，pg-e2 ELISA KIT
A6806-11 胎牛血清Fetal Bovine Serum
ARB13342 牛CD8分子(CD8)免费代测 
明胶包被液   100ml
CBZ-D-丙*酸 Decyltrimethylammonium bromide 26607-51-2
BL0985 Carrageenan 卡拉胶
盐*(代"酸")环丙沙星溶液(50mg/ml) Natamycin 50mg/ml 10ml
F030242 HRP标记小鼠抗鸭IgY(IgG)抗体 HRP*Monoclonal Mouse Anti-Duck IgY
ARB11612 人脱氧胶原吡*(代"啶")交联(DPD)elisa检测 Human deoxypyridinoline crosslinks,dpd ELISA KIT
Annexin V-PE/7-AAD细胞凋亡检测试剂盒北京厂家关键词：Annexin V-PE/7-AAD Apoptosis Detection Kit,SY0479,Annexin V-PE/7-AAD细胞凋亡检测试剂盒


·ERRE-Luc荧光素酶报告基因质粒
编号：SY0127
英文名称：ERRE Luciferase Reporter Plasmid
规格：1μg
ERRE-Luc荧光素酶报告基因质粒（ERRE luciferase reporter plasmid）是用于检测ERRE转录活性水平为目的的报告基因。ERRE(ERR alpha response element) 是ERRα反应元件, ERRα优先结合ERRE中的位点。

ERRE-Luc荧光素酶报告基因质粒主要应用于Estrogen Receptor Related Receptor信号通路、药物研究、相关基因的调控和功能的研究。

pGMERRE-Lu是我公司改造后的哺乳动物真核表达载体，在其多克隆位点插入了多个ERRE结合位点，可以高灵敏度地检测ERRE的激活水平。同时，对载体中预测出的其它转录因子以外的结合位点进行了适当的突变，增加了质粒的转录因子结合特异性。另外，由于质粒体积减小，使得ERRE报告基因质粒更易于转染。

质粒图谱



使用说明
pGMERRE-Lu可以采用常规转染方法转染哺乳动物细胞。用荧光素酶检测试剂盒或双荧光素酶检测试剂盒进行检测。

注意事项
本质粒未经我公司允许不得用于任何商业用途，也不得移交给订货人实验室以外的任何人或单位。
为了您的健康，实验操作时请穿实验服和带一次性手套。

储存条件：-20℃。

我公司正在火爆促销细胞凋亡与增殖系列产品，欢迎您的垂询选购Annexin V-PE/7-AAD细胞凋亡检测试剂盒北京厂家。