pET-N-GST-PreScission

pET-N-GST-PreScission

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  • ¥888
  • 联迈生物
  • LM2916
  • 中国/上海
  • 2025年07月12日
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    • 英文名：

      pET-N-GST-PreScission

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      一年

    • 供应商：

      上海联迈生物工程有限公司

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    • 规格：

      1μg

    pET-N-GST-PreScission
    产品编号 产品名称 产品包装 产品价格
    LM2916 pET-N-GST-PreScission 1μg 888.00元
          pET-N-GST-PreScission是一种用于表达N端含有GST标签(Glutathione S-transferase tag, GST tag)的目的蛋白的原核表达质粒。本质粒N端GST标签后含有PreScission酶切位点，可通过PreScission Protease (P2302/P2303)切除N端的GST标签。
    本质粒为卡那霉素抗性。
          本质粒含有T7启动子/lac操纵子，可以在异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)的诱导下高效启动目的蛋白表达。在多克隆位点的前面有一个GST标签的编码序列。因此在多克隆位点根据读码框插入目的基因就可以表达N端含有GST标签的目的蛋白。
          本载体在N端GST标签与多克隆位点之间含有PreScission蛋白酶识别的八肽序列LEVLFQGP，对应的核酸序列为
    CTGGAAGTTCTGTTCCAGGGGCCC，因此在目的蛋白纯化后可以利用PreScission Protease切除N端的GST标签。PreScission
    蛋白酶酶切发生在八肽序列的Q和G之间，因此在酶切去除GST标签的时候目的蛋白的N端留下两个额外的氨基酸残基GP。
          通常可以采用如BeyoGold™ GST-tag Purification Resin (LM2251/LM2253/LM2255)和GST标签蛋白纯化试剂盒(LM2262)等纯化本质粒表达的目的蛋白，也可以使用GST抗体(LM768/LM0174)检测和少量地分离纯化目的蛋白。
          pET-N-GST-PreScission质粒的主要信息如下：
    Feature Nucleotide Position
    f1 origin 12-467
    Kanamycin resistance ORF 563-1645
    PBR 322 origin 2084
    LacI coding sequence 3518-4597
    T7 promoter 4988-5004
    GST tag coding sequence 5076-5732
    PreScission recognition site sequence 5733-5756
    Multiple cloning site(BamHI-XhoI) 5757-5804
    T7 Terminator 5872-5918
          pET-N-GST-PreScission质粒(5943bp)的图谱如下：
    https://img1.dxycdn.com/p/s14/2024/0418/233/0650160410503370871.jpg
          pET-N-GST-PreScission的多克隆位点的详细图谱如下：
      XbaI       rbs    NdeI   
    5026   AATTCCCCTC   TAGAAATAAT   TTTGTTTAAC  
    TTTAAG AAGG  
    AG ATATACAT
    		      
       
      TTAAGGGGAG ATCTTTATTA AAACAAATTG
    AAATTC TTCC  
    TC TATATGTA
    		   
      GST tag  
    5076 ATGATGTCCC CTATACTAGG TTATTGGAAA ATTAAGGGCC TTGTGCAACC    
       
      TACTACAGGG GATATGATCC AATAACCTTT TAATTCCCGG AACACGTTGG    
       
    5126 CACTCGACTT CTTTTGGAAT ATCTTGAAGA AAAATATGAA GAGCATTTGT    
       
      GTGAGCTGAA GAAAACCTTA TAGAACTTCT TTTTATACTT CTCGTAAACA    
       
    5176 ATGAGCGCGA TGAAGGTGAT AAATGGCGAA ACAAAAAGTT TGAATTGGGT    
       
      TACTCGCGCT ACTTCCACTA TTTACCGCTT TGTTTTTCAA ACTTAACCCA    
       
    5226 TTGGAGTTTC CCAATCTTCC TTATTATATT GATGGTGATG TTAAATTAAC    
       
      AACCTCAAAG GGTTAGAAGG AATAATATAA CTACCACTAC AATTTAATTG    
       
    5276 ACAGTCTATG GCCATCATAC GTTATATAGC TGACAAGCAC AACATGTTGG    
       
      TGTCAGATAC CGGTAGTATG CAATATATCG ACTGTTCGTG TTGTACAACC    
       
    5326 GTGGTTGTCC AAAAGAGCGT GCAGAGATTT CAATGCTTGA AGGAGCGGTT    
       
      CACCAACAGG TTTTCTCGCA CGTCTCTAAA GTTACGAACT TCCTCGCCAA    
       
    5376 TTGGATATTA GATACGGTGT TTCGAGAATT GCATATAGTA AAGACTTTGA    
       
      AACCTATAAT CTATGCCACA AAGCTCTTAA CGTATATCAT TTCTGAAACT    
       
    5426 AACTCTCAAA GTTGATTTTC TTAGCAAGCT ACCTGAAATG CTGAAAATGT    
       
      TTGAGAGTTT CAACTAAAAG AATCGTTCGA TGGACTTTAC GACTTTTACA    
       
    5476 TCGAAGATCG TTTATGTCAT AAAACATATT TAAATGGTGA TCATGTAACC    
       
      AGCTTCTAGC AAATACAGTA TTTTGTATAA ATTTACCACT AGTACATTGG    
       
    5526 CATCCTGACT TCATGTTGTA TGACGCTCTT GATGTTGTTT TATACATGGA    
       
      GTAGGACTGA AGTACAACAT ACTGCGAGAA CTACAACAAA ATATGTACCT    
       
    5576 CCCAATGTGC CTGGATGCGT TCCCAAAATT AGTTTGTTTT AAAAAACGTA    
       
      GGGTTACACG GACCTACGCA AGGGTTTTAA TCAAACAAAA TTTTTTGCAT    
       
    5626 TTGAAGCTAT CCCACAAATT GATAAGTACT TGAAATCCAG CAAGTATATA    
       
      AACTTCGATA GGGTGTTTAA CTATTCATGA ACTTTAGGTC GTTCATATAT    
       
    5676 GCATGGCCTT TGCAGGGCTG GCAAGCCACG TTTGGTGGTG GCGACCATCC    
       
      CGTACCGGAA ACGTCCCGAC CGTTCGGTGC AAACCACCAC CGCTGGTAGG    
        PreScission         PstI    
      ↓      BamHI HindIII EcoRI
    		 
       
    5726
    TCCAAAA CTG
    		GAAGTTCTGT TCCAGGGGCC CGGATCCAAG CTTCTGCAGG    
     
    AGGTTTT GAC
    		CTTCAAGACA AGGTCCCCGG GCCTAGGTTC GAAGACGTCC    
       EcoRV   SalI  BglII   XhoI     
    5776 AATTCGATAT CGTCGACAGA TCTCTCGAGT GAGATCCGGC TGCTAACAAA    
      TTAAGCTATA GCAGCTGTCT AGAGAGCTCA CTCTAGGCCG ACGATTGTTT    
          pET-N-GST-PreScission中没有的酶切位点(Restriction enzymes that do not cut pET-N-GST-PreScission)包括：
    AatII Acc65I AflII AgeI AhdI AleI AscI
    AvrII BaeI BbvCI BfuAI BmgBI BmtI BsaI
    BseRI BsiWI BspMI BsrGI Bsu36I CspCI EagI
    Eco53kI FseI KpnI MfeI NcoI NheI NotI
    PacI PmeI PmlI PspXI RsrII SacI SacII
    SbfI SexAI SfiI SnaBI SpeI SrfI StuI
    ZraI
          pET-N-GST-PreScission中的单酶切位点(Restriction enzymes that cut pET-N-GST-PreScission once)包括：
    DraIII CAC,NNN`GTG 242 MluI A`CGCG,T 4242
    PsiI TTA|TAA 370 BstAPI GCAN,NNN`NTGC 4563
    PvuI CG,AT`CG 943 SphI G,CATG`C 4771
    AsiSI GCG,AT`CGC 943 SgrAI CR`CCGG,YG 4923
    SmaI CCC|GGG 1067 XbaI T`CTAG,A 5034
    XmaI C`CCGG,G 1067 NdeI CA`TA,TG 5074
    TspMI C`CCGG,G 1069 MscI TGG|CCA 5286
    NruI TCG|CGA 1286 BstBI TT`CG,AA 5476
    AcuI CTGAAG(N)14,NN` 1597 SwaI ATTT|AAAT 5506
    AlwNI CAG,NNN`CTG 1729 ScaI AGT|ACT 5652
    BssSI C`ACGA,G 1968 BamHI G`GATC,C 5757
    BstZ17I GTA|TAC 2374 HindIII A`AGCT,T 5763
    Tth111I GACN`N,NGTC 2399 PstI C,TGCA`G 5769
    PflFI GACN`N,NGTC 2399 EcoRI G`AATT,C 5775
    PpuMI RG`GWC,CY 3136 EcoRV GAT|ATC 5783
    FspI TGC|GCA 3164 SalI G`TCGA,C 5787
    BglI GCCN,NNN`NGGC 3182 BglII A`GATC,T 5793
    PshAI GACNN|NNGTC 3401 XhoI C`TCGA,G 5799
    HpaI GTT|AAC 3740 PaeR7I C`TCGA,G 5799
    BssHII G`CGCG,C 3831 BlpI GC`TNA,GC 5860
    NmeAIII GCCGAG(N)19,NN` 4041 StyI C`CWWG,G 5882
    BstEII G`GTNAC,C 4060
          pET-N-GST-PreScission质粒中推荐使用的测序引物序列如下：
          pET-F primer (5619-5638): 5′- AAACGTATTGAAGCTATCCC-3′
          pET-R primer (5857-5876): 5′-TGCTAGTTATTGCTCAGCGG-3′
          pET-N-GST-PreScission的全序列信息：LM2916 pET-N-GST-PreScission.txt。 
          不同原核表达质粒的比较和选择，以及标签、蛋白酶切位点和蛋白共表达的考虑可以参考如下网页：
          http://www.beyotime.com/support/prokaryotic-plasmids.htm
    包装清单：
    产品编号 产品名称 包装
    LM2916 pET-N-GST-PreScission 1μg
    — 说明书 1份
    保存条件：
          -20℃保存。
    注意事项：
          本质粒未经联迈生物书面许可不得用于任何商业用途，也不得移交给订货人所在实验室外的任何个人或单位。
          本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
          为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

     

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