- ¥140 - 2430
- 百奥莱博
- QN0095-YXA
- 北京
- 2025年07月14日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
600
- 英文名：
Hygromycin B
- CAS号：
31282-04-9
- 保质期：
长期
- 供应商：
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件：
2～8℃
特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产销*(代"售")潮霉素B试剂厂家价格，我公司是生物试剂、化学试剂专业供应商，立足北京，服务全国的高校、研究所、医院、企业科研部门，欢迎各位老师来电垂询订购。
名称：潮霉素B试剂
品牌：百奥莱博
编号：QN0095
规格：1g
产地：国产|进口
英文名：Hygromycin B
本品由吸水链霉菌代谢产生的一种*基糖苷类抗生素，通过干扰70S核糖体易位和诱导对mRNA模板的错读而抑制蛋白合成，从而杀死原核(如细菌)、真核(如酵母菌，真菌)和高等哺乳动物真核细胞。本品是无菌的潮霉素B溶液(100mg/ml)，可直接用培养液稀释使用。
CAS：31282-04-9
分子式：C20H37N3O13
分子量：527.52
储存条件：2～8℃
性状：澄清或轻微浑浊黄色溶液
大肠杆菌( Escherichia coli.)来源的潮霉素抗性基因(hyg或hph)，编码潮霉素B磷酸转移酶，将潮霉素B转化成不具有生物活性的磷酸化产物，从而起到解毒作用。针对这一原理，潮霉素B是一种非常有用的选择性标记，用来筛选和维持培养成功转染潮霉素抗性基因的原核或者真核细胞。另外，由于作用模式的差异，常与G418，Zeocin™ 和Blasticidin S联合使用进行双抗性阳性细胞株的选择。潮霉素B还能用作抗病毒剂，因其选择性渗透进入因病毒感染增强通透性的细胞，且具有抑制翻译的功效。还可混合入动物饲料中起到驱虫功能。
使用方法：
1. 常用筛选浓度
注意：潮霉素B用来筛选稳转株的工作浓度需要根据细胞类型，培养基，生长条件和细胞代谢率而变化，推荐使用浓度为50-1000μg/mL。对于第一次使用的实验体系建议通过建立杀灭曲线(kill curve)，即剂量反应性曲线，来确定最佳筛选浓度。
一般而言，哺乳动物细胞50-500μg/mL;细菌/植物细胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。
2. 杀灭曲线的建立
注意：为了筛选得到稳定表达目的蛋白的细胞株，需要确定能够杀死未转染宿主细胞的抗生素最低浓度，可通过建立杀灭曲线(剂量反应曲线)来实现，至少选择5个浓度。
1)第一天：未转化的细胞按照20-25%的细胞密度铺在合适的培养板上，37℃，CO2培养过夜;注：对于需要更高密度来检测活力的细胞，可增加接种量。
2)根据细胞类型，设定合适范围内的浓度梯度。以哺乳动物细胞为例，可设定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去离子水或者PBS buffer按照1:10的比例将母液稀释到5 mg/ml，然后按照下表稀释到相应浓度的工作液。
| 终浓度(μg/mL) | 培养基体积(ml) | 5mg/ml潮霉素B加入体积(ml) |
| 50 | 9.9 | 0.1 |
| 100 | 9.8 | 0.2 |
| 250 | 9.5 | 0.5 |
| 500 | 9.0 | 1.0 |
| 750 | 8.5 | 1.5 |
| 1000 | 8.0 | 2.0 |
3)第二天：替换旧的培养基，换用新鲜配制的含有相应浓度药物的培养基。每个浓度做三个平行孔。
4)接下来每3-4天更换新的含药物培养基。
5)按照固定的周期(如每2天)进行活细胞计数来确定阻止未转染细胞生长的恰当浓度。选择在理想的天数(通常是7-10天)内能够杀死绝大多数细胞的最低浓度为稳定转染细胞筛选用的工作浓度。
3. 稳定转染细胞的筛选
1)转染48h后，用含有适当浓度的潮霉素B筛选培养基来传代细胞(直接传代或者稀释后传代)。
注意：细胞处于活跃分裂状态时抗生素的杀伤效果最好。则当细胞过于稠密，其效率会降低。为了得到较好的筛选效果，最好将细胞稀释至丰度不超过25%。
2)每隔3-4天更换含有药物的筛选培养液。
3)筛选7天后观察并评估细胞克隆(集落)的形成情况。集落的形成可能还需要一周或者更多的时间，这取决于宿主细胞类型，转染，以及筛选效果。
4)挑取并转移5-10个抗性克隆于35mm细胞培养板，继续用含药物的筛选培养液维持培养7天。
5)之后更换正常培养基培养即可。
关键词：潮霉素B试剂,31282-04-9,Hygromycin B
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| 编号 | 名称 |
| QN1281 | 变性蛋白预制胶(8～20%) |
| QN1018 | 5×TBE 缓冲液 |
| QN0199 | 直链淀粉 |
| QN0796 | 乙酸-1-*酯 |
| QN1073 | BSA标准品(5mg/ml) |
| QN0617 | 盐*(代"酸")多巴胺 |
| QN0966 | dNTPs Mix(10mM each) |
| QN0958 | 通用引物 27F |
| QN0575 | 8-氮杂鸟嘌呤 |
| QN0343 | DL-苹果酸 |
| QN0747 | 二甲基亚砜 |
| QN0291 | 乙酰化低密度脂蛋白(Ac-LDL) |
| QN0733 | 水合*醛 |
| QN0319 | FN纤粘连蛋白(来源人血) |
| QN0377 | 碱性磷酸酶 |
| QN0167 | 乳果糖 |
| QN0608 | 棕榈酸 |
| QN0612 | N-羟基丁二酰亚胺 |
| QN0089 | 羧苄青霉素溶液 |
| QN0430 | SUMO蛋白酶 |
| QN0382 | 肌酸酶 |
| QN0569 | 腺苷-5"-二磷酸二*盐 |
| QN1267 | PBS缓冲液干粉 |
| QN0759 | PyBOP |
| QN0844 | 丙*(代"烷")磺酸吡*(代"啶")盐 |
| QN0781 | 阿司匹林 |
| QN0188 | 硫*(代"酸")葡聚糖 |
| QN0471 | 果胶酶 |
| QN0538 | 黄嘌呤 |
| QN0898 | 酵母质粒小量提取试剂盒 |
| QN0359 | L-盐*(代"酸")半胱*酸无水物 |
| QN1017 | 50×TAE 缓冲液 |
| QN0711 | 聚乙二醇 PEG 6000 |
| QN0157 | 1,5-二磷酸-D-核酮糖 |
| QN1227 | SABC免疫组化试剂盒(兔IgG)(FITC显色) |
| QN1274 | 非变性蛋白预制胶(4～15%) |
| QN0015 | 替米考星 |
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