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795
- 英文名:
Nourseothricin Sulfate
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长期
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
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2~8℃
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产供应诺尔丝菌素试剂价格,我公司销*(代"售")高质量、高纯度的生化试剂,同时价格极具竞争力,满心期待您的咨询订购。
名称:诺尔丝菌素试剂价格
品牌:百奥莱博
产地:国产|进口
编号:QN0024
规格:100mg|1g
CAS:96736-11-7
分子式:C31H58N12O10 C19H34N8O8 H2SO4
分子量:1359.47
纯度:98%
储存条件:2~8℃
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·dCTP(100mM)
编号:QN0523
规格:400μl
本品为dCTP水溶液,浓度为100mM,配合dGTP、dTTP、dATP用于PCR反应。
·凝血酶
编号:QN0462
英文名称:Thrombin from bovine plasma
规格:1000u
说明:催化纤维蛋白原变成纤维蛋白而促使血液凝固,用于止血。
别名:凝血酵素;Factor IIa
英文名称:Thrombin from bovine plasma
CAS号:9002-04-4
储存条件:−20℃
酶活:20.74 mg solid;96.0 NIH units/mg protein;48.0NIH units/mg solid
性状:白色、浅黄色或浅灰色冻干粉
·麦芽三糖
编号:QN0138
英文名称:Maltotriose
规格:1g
CAS号:1109-28-0
分子式:C18H32O16
分子量:504.44
储存条件:室温
性状:白色或类白色粉末或结晶粉末
溶解性:溶于水50mg/ml
熔点:132-135℃
比重:1.8
比旋光度:160 (C=2, H2O)
·核蛋白提取试剂盒
编号:QN1079
英文名称:Nuclear Protein Extraction Kit
规格:50T|100T
本核蛋白提取试剂盒提供了一种简单、方便的从培养细胞或新鲜组织中抽提核蛋白的方法。整个过程只需约60分钟就可以将核蛋白和浆蛋白从细胞中分离出来。得到的蛋白可以用于Western blot等实验。本试剂盒通过浆蛋白抽提试剂使细胞膨胀破裂,释放出胞浆蛋白,再通过离心得到细胞核。然后通过核蛋白抽提试剂抽提得到细胞核蛋白。本试剂盒可以抽提50/100个样品(每个样品约2×106个Hela细胞或40mg组织)。
体外培养细胞的操作方法(裂解蛋白的所有步骤都需在冰上或4℃进行):
1.根据用量取适当的浆蛋白抽提试剂和核蛋白抽提试剂加入PMSF,使PMSF的最终浓度为1mM。PMSF需现用现加,若目标蛋白含有丰富的半胱*酸,可以在两种蛋白抽提液中加入DTT至终浓度0.5mM。
2.对于贴壁细胞,去除培养液,用PBS洗一遍,用细胞刮刀收集细胞,或用EDTA消化后吹打下细胞(最好不用胰酶硝化,以免胰酶消化目的蛋白)。500g离心2~3分钟收集细胞,吸尽上清留下沉淀备用。
3.对于悬浮细胞:用PBS洗一遍,500 g离心2~3分钟收集细胞,吸尽上清,留下细胞沉淀备用。
4.每20μl细胞沉淀加入200μl浆蛋白抽提试剂(2×106个细胞沉淀的体积约20μl或40mg)。
5.用移液器吹打或高速涡旋15秒(可适当延长),必须使细胞沉淀完全分散开成单细胞悬液。细胞沉淀分散不完全会导致蛋白产量降低。
6.冰浴10分钟。
7.最高转速剧烈涡旋10秒,4℃,12000~16000g离心10分钟。
8.上清即为抽提得到的细胞浆蛋白,立即吸取上清至预冷的样品管中备用,进行后续的PAGE、Western等实验,但蛋白浓度较低,可根据需要进行相应浓缩。
9.沉淀即为细胞核,要完全吸尽残余的上清(避免细胞浆蛋白的污染),加入50-100μl核蛋白抽提试剂。
10.用移液器吹打或高速涡旋15秒(可适当延长)至沉淀完全分散,冰浴10分钟。
11.最高转速剧烈涡旋10秒,4℃,12000~16000g离心10分钟。
12.立即吸取上清至预冷的样品管中,此即为抽提得到的细胞核蛋白。可进行后续实验或-70℃冻存。 对于组织样品:把组织称重后,尽可能切成非常细小的碎片,按每50mg组织加入200μl~500μl PBS,用匀浆器冰上匀浆制成细胞悬液,500g离心2~3分钟收集细胞,吸尽上清,收集沉淀。加入200μl浆蛋白抽提试剂后接上述步骤5。
注意事项:
1.裂解得到的蛋白样品,由于含有较高浓度的去垢剂干扰,不能用Bradford法测定蛋白浓度,可以选用本公司生产的BCA蛋白定量试剂盒(货号QN1075)测定蛋白浓度。
2.对于组织样品,本试剂盒适用于新鲜组织,对冻存组织抽提效果较差。
3.为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
储存条件:核/浆蛋白抽提试剂4℃保存,PMSF于-20℃保存。
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