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693
- 英文名:
ECL Western Blotting Detection Kit(Mouse/Rabbit IgG)
- 保质期:
一年
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
-20℃
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京ECL化学发光法检测试剂盒(小鼠/兔IgG)厂家的品牌:百奥莱博,是优质的蛋白质研究产品,用于科研目的生化试验项目,本产品质量好,且极具价格优势,深为用户称道,了解更多ECL化学发光法检测试剂盒(小鼠/兔IgG)等蛋白质研究产品请联*(代"系")我司咨询订购。
名称:北京ECL化学发光法检测试剂盒(小鼠/兔IgG)厂家
规格:1盒
英文名:ECL Western Blotting Detection Kit(Mouse/Rabbit IgG)
产地:国产|进口
编号:QN1155
品牌:百奥莱博
本试剂盒主要用于western blotting的化学发光显色,含有HRP标记抗小鼠/兔IgG二抗。
SDS-PAGE电泳后,蛋白质按照分子量大小分离,转移到固相载体(例如硝酸纤维素薄膜)后,固相载体以非共价键形式吸附蛋白质,以固相载体上的蛋白质或多肽作为抗原,与对应的抗体起免疫反应,再与酶标记的第二抗体起反应,加入发光底物后,能让胶片感光。经显影和定影后,可以在胶片上显示出条带(抗原所在位置)。
试剂盒组分:
封闭试剂———————————30g(可配制400ml)
10倍浓缩抗体稀释液——————50ml
HRP标记小鼠/兔IgG二抗-————0.3ml,效价1:500~1000
ECL显色液-——————————25mlA+25mlB
常规电泳转膜后:
1)清洗转印膜:将膜剥离下后,作好标记,一般在左上角剪一缺口。室温用TBS-T漂洗3次每次5min,以尽量洗去转印膜上的SDS,防止影响后面的抗体结合。
2)按5g封闭试剂加100ml双蒸水计,配制膜封闭液,配好的膜封闭液为乳白色悬液,将漂洗过的转印膜放入封闭液内,置摇床孵育,室温封闭30min。用TBS-T缓冲液(PH7.6)洗膜,室温漂洗3次每次5min。
3)将10×抗体稀释液用双蒸水稀释成1×(10ml,10×抗体稀释液加入90ml双蒸水,混匀,可4℃保存三个月)。此稀释液可作为一抗和二抗的稀释液。
4)用1×的抗体稀释液稀释一抗。根据用量以及一抗的推荐稀释浓度来稀释一抗。将杂交膜放入杂交袋中,加入一抗工作液,封口,4℃孵育过夜或37℃摇动孵育2h。此用过的抗体一般可回收第二天再使用一次。
注:如果所加一抗不同,可在此步将膜沿电泳方向剪成条,分别作好标记,分开孵育。
5)用TBS-T缓冲液(PH7.6)洗膜,室温漂洗3次每次5min。
6)用1×的抗体稀释液稀释二抗。根据用量,按10ml抗体稀释液加入15ul的HRP标记二抗的比例,配制二抗工作液。将杂交膜放入杂交袋中,加入二抗工作液,封口,37℃摇动孵育1h。此用过的抗体一般可回收第二天再使用一次。
7)用TBS-T缓冲液(PH7.6)洗膜,室温漂洗3次每次10min。
8)根据用量,取ECL发光液A、B等量混匀,加在膜正面,暗室显色1~5分种。倾去显色液,小心用纸吸去显色液,在上面盖一层平整的透明纸。再取出感光胶片,做好标记,轻轻的放在膜上,显色30秒到1分钟,取出胶片浸入显影液中,观察显色情况,再放入定影液中1分钟。根据条带强弱,再次感光时可减短或者加长感光时间(从5秒到30分钟)以期达到理想结果。
注意事项:
1.请根据一抗来源选择试剂盒。
2.可以根据显色结果来优化实验反应时间。如背景过深,可延长膜封闭时间,加长最终漂洗次数与时间。如果
条带过弱,可增加抗体浓度,可延长抗体孵育时间或加长感光时间。
3.TBS-T(0.01M,PH7.6)配制方法:称取NaCl 8.5g,Tris 1.21g,用800ml的双蒸水溶解,用盐*(代"酸")调PH到7.6,再加入0.5ml Tween-20,用双蒸水加至1000ml,混匀即可。(也可按照自己的配制习惯来配制)
储存条件:-20℃避光,有效期一年。
更多有关北京ECL化学发光法检测试剂盒(小鼠/兔IgG)厂家的价格及使用说明等,请联*(代"系")我们的业务经理王欣女士咨询,我公司还销*(代"售")以下产品:
·封闭用兔血清(原液)
编号:QN1244
英文名称:Normal Rabbit Serum
规格:10mL|100mL
封闭血清适用于免疫组化或者免疫荧光实验中样本的封闭。可以封闭待检样本中与蛋白质非特异性结合的位点,另外还可以封闭样品中内源性的Fc片段结合位点,阻断抗体与样品中的Fc受体结合,从而降低背景,减少假阳性。在选择封闭血清时,要注意封闭用血清中不能含有目标蛋白,且封闭血清来源不能与一抗来源相同,可用与二抗相同来源的封闭血清。
使用方法:
使用时,用PBS(0.01mol/L pH7.2-7.4)将封闭血清原液稀释10或20倍,配成10%或者5%的工作液,直接滴加在组织切片或者细胞涂片上,37℃度孵育10-30分钟,清除血清,勿洗,滴加适当比例稀释的一抗工作液,37℃孵育1-2h或4℃过夜。
储存条件:-20℃保存,有效期5年。
·植酸*
编号:QN0580
英文名称:Phytic acid sodiu*(代"m") salt hydrate
规格:10g
CAS号:14306-25-3
别名:植酸十二*
分子式:C6H6Na12O24P6
分子量:923.82
·羧苄青霉素溶液
编号:QN0089
英文名称:Phytic acid sodiu*(代"m") salt hydrate
规格:10mL
本品对绿脓杆菌及部分变形杆菌、大肠杆菌由抗菌性
浓度:50mg/ml
储存条件:—20℃,避光
·蛋白酶K溶液(10mg/ml)
编号:QN0429
英文名称:Proteinase K Solution(10mg/ml)
规格:1ml|5*1ml
本品不含DNase,不含RNase,可直接使用。可以用于消化各种蛋白。用于各种常见的分子生物学、细胞生物学等相关实验,例如基因组DNA抽提、酶的消化去除等。 在很宽的pH范围内有效,有效的pH范围为pH4.0-12.5,最佳pH范围为pH7.5-8.0。蛋白酶K的最佳反应温度为65℃,但在65℃或更高的温度蛋白酶K自身的也非常迅速地降解。很多时候反应温度选择50-55℃。
酶活力:30U/mg
储存条件:-20℃,有效期12个月
在0.2-1%SDS或约10mM尿素存在的情况下,蛋白酶K显示更高的酶活性。蛋白酶K的常用工作浓度为0.05-1mg/ml,根据所用缓冲液是否含有SDS、尿素、pH是否适合、温度是否适合等因素确定具体的工作浓度。 常用浓度的EDTA、Triton X-100、Tween 20、Sarkosyl、盐*(代"酸")胍对蛋白酶K的活力影响不大。
酶活定义:在37ºC,pH7.5条件下,每分钟可水解底物酪蛋白生成1 µmol酪*酸所需蛋白酶K的量,定义为一个单位(U)蛋白酶K酶活力。
北京ECL化学发光法检测试剂盒(小鼠/兔IgG)厂家关键词:ECL Western Blotting Detection Kit(Mouse/Rabbit Ig,ECL化学发光法检测试剂盒,小鼠/兔IgG,ECL化学发光法检测试剂盒(小鼠/兔IgG),QN1155
·辅羧酶(TPP)
编号:QN0428
英文名称:Cocarboxylase
规格:1g
本品仅供科研,参与糖代谢中丙*(代"酮")酸或α— 酮戊二酸的氧化脱羧反应和醛基转移作用。
别名:焦磷酸硫胺素;*化脱羧辅酶;TPP
CAS号:154-87-0
分子式:C12H19N4O7P2S·Cl
分子量:460.77
储存条件:2~8℃
纯度:≥98%
性状:白色或类白色结晶粉末
·β-葡聚糖酶 9万u/g
编号:QN0407
英文名称:Cocarboxylase
规格:500g
本品系由里氏木霉代谢生产的β-葡聚糖酶制剂,它能水解β-葡聚糖,生成寡糖,葡萄糖。本产品为食品级产品,符合相关国际国内标准。
CAS号:9025-70-1
储存条件:低温、干燥
酶活:9万u/g
pH有效范围:3.5~5.5,最适合PH范围4.8~5.5
有效温度范围:30~70℃,最佳50~60℃。
酶活定义:1g酶粉(或1ml酶液)于50℃、pH4.8条件下1min水解1%β-葡聚糖溶液产生1μg葡萄糖的酶量为1个β-葡聚糖酶活力单位。
·头孢拉定
编号:QN0045
英文名称:Cefradine
规格:1g
CAS:38821-53-3
分子式:C16H19N3O4S
分子量:349.40
储存条件:0~10℃,干燥、阴凉处,避免受热。
纯度:>99%
性状:本品为类白色结晶性粉末;
·果胶酶
编号:QN0372
英文名称:Cefradine
规格:500g
CAS号:9032-75-1
北京ECL化学发光法检测试剂盒(小鼠/兔IgG)厂家关键词:ECL Western Blotting Detection Kit(Mouse/Rabbit Ig,ECL化学发光法检测试剂盒,小鼠/兔IgG,ECL化学发光法检测试剂盒(小鼠/兔IgG),QN1155
ARB12287 大鼠抗子宫内膜抗体(EMAb)ELISA检测服务 Rat endometrium antibody,emab ELISA KIT
ARB11045 人青少年2型血色素沉着症/幼年型血色病相关蛋白2(HFE2)含量分析 Human hemochromatosis type 2/uvenile-uman homolog,hfe2 lisa kit
ARB13829 猪Bcl-2相关X蛋白(BAX)Elisa定量检测 Porcine bcl-2 assaciated x protein,bax ELISA KIT
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L-缬*醇 Chloroiodide 2026-48-4
Nα-FMOC-Nω-PBF-D-精*酸 CBZ-L-Threonine 187618-60-6
D-*丙*醇 Glyphosate 5267-64-1
BFD029 三聚*胺快速检测试剂盒
002018 EDTA抗凝牛血
ARB13324 山羊褪黑素(MT)ELISA检测服务
A2801-12 新生牛血清 100ml|500ml
BL1149 10×DNA上样缓冲液
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文献和实验化学发光法 ECL Kit Amersham 飞克级 化学发光法
发光仪(北京科美东雅生物技术有限公司生产)。 1.3 试剂 乙肝标志物酶法检测试剂由上海科华生物工程股份有限公司提供,批号20080810;化学发光法为北京科美东雅生物技术有限公司提供的配套试剂,批号20081208。 1.4 方法 对上述标本分别用ELISA法和化学发光法进行检测,均严格按照各自的试剂盒说明书操作。 1.5 数据处理 使用SPSS13.0统计软件对两种方法检测结果进行χ 2检验。 2 结果 两种方法对乙型肝炎病毒标志物的对比检测结果见表
当抗体孵育、TBST漂洗结束后,进入ECL显影步骤。当然,目前国内一些实验室已经换用仪器扫描荧光信号,而我们更是二抗直接连荧光蛋白连ECL和常规的底片显影都省略了,因此以下所讨论的某些细节问题可能不再出现。 首先坛子上还有少数实验室处于DAB显色时代,奉劝一句,都走到最后一步了就不要节省了;DAB显色的灵敏性是远远不够的。目前较为流行的仍是化学发光法,下面简述一下其原理: 交联在二抗上的HRP酶能够特异水解过氧化物产生化学能;ECL中主要包含两种成分,催化剂和中间递质(白色瓶子主要
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