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- 联迈生物
- LM2626-1μg
- 中国/上海
- 2025年07月15日
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- 英文名：
pCMV-C-EGFP
- 保质期：
一年
- 供应商：
上海联迈生物工程有限公司
- 保存条件：
-20℃保存
- 规格：
1μg
pCMV-C-EGFP (绿色荧光蛋白)
pCMV-C-EGFP是联迈生物自行研发的哺乳动物细胞表达质粒，用于表达C端含EGFP(Enhanced GreenFluorescent Protein, 增强绿色荧光蛋白)标签的融合蛋白。该质粒含有CMV启动子，可以高效启动目的蛋白在细胞中的表达。在多克隆位点的后面有一个EGFP的完整编码序列，因此在多克隆位点根据阅读框插入目的基因就可以表达C端含有EGFP标签的融合蛋白。利用EGFP的荧光特性可以比较容易地观察融合蛋白的表达水平和细胞内定位，也可以利用EGFP抗体来检测或免疫沉淀融合蛋白。该质粒为卡那霉素抗性。转染细胞后，可以使用G418筛选稳定表达目的蛋白的细胞株。
pCMV-C-EGFP质粒的主要信息如下：
pCMV-C-EGFP质粒(5010bp)的图谱如下：
pCMV-C-EGFP的多克隆位点的详细图谱如下：
pCMV-C-EGFP中没有的酶切位点(Restriction enzymes that do not cut pCMV-C-EGFP)包括：
pCMV-C-EGFP中的单酶切位点(Restriction enzymes that cut pCMV-C-EGFP once)包括：
pCMV-C-EGFP质粒中推荐使用的测序引物序列如下：
T3 primer (620-639): 5′-AATTAACCCTCACTAAAGGG-3′
C-EGFP primer (852-873): 5′-GGGTCAGCTTGCCGTAGGTGGC-3′
pCMV-C-EGFP的全序列信息：LM2626 pCMV-C-EGFP-seq.txt
pCMV-C-EGFP质粒转染细胞后的表达效果请参考图1。
图1. pCMV-C-EGFP质粒转染细胞后的表达效果图。左侧为明场照片，右侧为荧光照片。
包装清单:
保存条件：
-20℃保存。
注意事项：
本质粒未经联迈生物书面许可不得用于任何商业用途，也不得移交给订货人所在实验室外的任何个人或单位。
本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
| 产品编号 | 产品名称 | 产品包装 | 产品价格 |
| LM2626-1μg | pCMV-C-EGFP (绿色荧光蛋白) | 1μg | 888.00元 |
pCMV-C-EGFP质粒的主要信息如下：
| Feature Nucleotide | Position |
| CMV promoter | 1-602 |
| T3 promoter and T3 primer binding site | 620-639 |
| Multiple cloning site | 651-740 |
| EGFP | 741-1460 |
| T7 promoter and T7 primer binding site | 1510-1531 |
| SV40 polyAsignal | 1543-1926 |
| f1 origin of ss-DNA replication | 2064-2370 |
| bla promoter | 2395-2519 |
| SV40 promoter | 2539-2877 |
| Neomycin/kanamycin resistance ORF | 2912-3703 |
| HSV-thymidine kinase (TK) polyA signal | 3704-4162 |
| pUC origin | 4291-4958 |
pCMV-C-EGFP的多克隆位点的详细图谱如下：
| SmaIPstI | |||||||
| SacI SacII NotI XmaI BamHI HindIII | |||||||
| 651 | GAGCTCCACC | GCGGTGGCGG | CCGCTCTAGC | CCGGGCGGAT | CCAAGCTTCT | ||
| CTCGAGGTGG | CGCCACCGCC | GGCGAGATCG | GGCCCGCCTA | GGTTCGAAGA | |||
| EcoRI EcoRV SalI BglII XhoI XbaI EGFP | |||||||
| 701 | GCAGGAATTC | GATATCGTCG | ACAGATCTCT | CGAGTCTAGA |
|
||
| CGTCCTTAAG | CTATAGCAGC | TGTCTAGAGA | GCTCAGATCT |
|
|||
| 751 | AGGGCGAGGA | GCTGTTCACC | GGGGTGGTGC | CCATCCTGGT |
|
||
| TCCCGCTCCT | CGACAAGTGG | CCCCACCACG | GGTAGGACCA |
|
|||
| 801 | GGCGACGTAA | ACGGCCACAA | GTTCAGCGTG | TCCGGCGAGG |
|
||
| CCGCTGCATT | TGCCGGTGTT | CAAGTCGCAC | AGGCCGCTCC |
|
|||
| 851 | TGCCACCTAC | GGCAAGCTGA | CCCTGAAGTT | CATCTGCACC |
|
||
| ACGGTGGATG | CCGTTCGACT | GGGACTTCAA | GTAGACGTGG |
|
|||
| 901 | TGCCCGTGCC | CTGGCCCACC | CTCGTGACCA | CCCTGACCTA |
|
||
| ACGGGCACGG | GACCGGGTGG | GAGCACTGGT | GGGACTGGAT |
|
|||
| 951 | TGCTTCAGCC | GCTACCCCGA | CCACATGAAG | CAGCACGACT |
|
||
| ACGAAGTCGG | CGATGGGGCT | GGTGTACTTC | GTCGTGCTGA |
|
|||
| 1001 | CGCCATGCCC | GAAGGCTACG | TCCAGGAGCG | CACCATCTTC |
|
||
| GCGGTACGGG | CTTCCGATGC | AGGTCCTCGC | GTGGTAGAAG |
|
|||
| 1051 | ACGGCAACTA | CAAGACCCGC | GCCGAGGTGA | AGTTCGAGGG |
|
||
| TGCCGTTGAT | GTTCTGGGCG | CGGCTCCACT | TCAAGCTCCC |
|
|||
| 1101 | GTGAACCGCA | TCGAGCTGAA | GGGCATCGAC | TTCAAGGAGG |
|
||
| CACTTGGCGT | AGCTCGACTT | CCCGTAGCTG | AAGTTCCTCC |
|
|||
| 1151 | CCTGGGGCAC | AAGCTGGAGT | ACAACTACAA | CAGCCACAAC |
|
||
| GGACCCCGTG | TTCGACCTCA | TGTTGATGTT | GTCGGTGTTG |
|
|||
| 1201 | TGGCCGACAA | GCAGAAGAAC | GGCATCAAGG | TGAACTTCAA |
|
||
| ACCGGCTGTT | CGTCTTCTTG | CCGTAGTTCC | ACTTGAAGTT |
|
|||
| 1251 | AACATCGAGG | ACGGCAGCGT | GCAGCTCGCC | GACCACTACC |
|
||
| TTGTAGCTCC | TGCCGTCGCA | CGTCGAGCGG | CTGGTGATGG |
|
|||
| 1301 | CCCCATCGGC | GACGGCCCCG | TGCTGCTGCC | CGACAACCAC |
|
||
| GGGGTAGCCG | CTGCCGGGGC | ACGACGACGG | GCTGTTGGTG |
|
|||
| 1351 | CCCAGTCCGC | CCTGAGCAAA | GACCCCAACG | AGAAGCGCGA |
|
||
| GGGTCAGGCG | GGACTCGTTT | CTGGGGTTGC | TCTTCGCGCT |
|
|||
| 1401 | CTGCTGGAGT | TCGTGACCGC | CGCCGGGATC | ACTCTCGGCA |
|
||
| GACGACCTCA | AGCACTGGCG | GCGGCCCTAG | TGAGAGCCGT |
|
|||
| ApaI | |||||||
| 1451 |
|
GGGCCCGGTA | CCTTAATTAA | TTAAGGTACC | |||
|
CCCGGGCCAT | GGAATTAATT | AATTCCATGG | ||||
| AclI | AfeI | AflII | AgeI | AhdI | AscI | AsiSI |
| BaeI | BbsI | BbvCI | BlpI | BmgBI | BsiWI | BsmBI |
| BspEI | BspQI | BssHII | BstEII | BstZ17I | EarI | EcoNI |
| FseI | NruI | PflMI | PmeI | PmlI | PpuMI | PshAI |
| PspXI | SapI | SbfI | ScaI | SgrAI | SpeI | SwaI |
| XcmI | XmnI | |||||
| NdeI | CA`TA,TG | 240 | PspOMI | G`GGCC,C | 1461 | |
| SnaBI | TAC|GTA | 346 | ApaI | G,GGCC`C | 1461 | |
| CspCI | ,NN`(N)11CAA(N)5GTGG(N)10,NN` | 380 | PvuI | CG,AT`CG | 1541 | |
| NheI | G`CTAG,C | 597 | BclI | T`GATC,A | 1697 | |
| BmtI | G,CTAG`C | 597 | MfeI | C`AATT,G | 1790 | |
| SacI | G,AGCT`C | 651 | HpaI | GTT|AAC | 1803 | |
| Eco53kI | GAG|CTC | 653 | MluI | A`CGCG,T | 1926 | |
| BstXI | CCAN,NNNN`NTGG | 659 | BsaXI | ,NNN`(N)9AC(N)5CTCC(N)7,NNN` | 2087 | |
| SacII | CC,GC`GG | 660 | DraIII | CAC,NNN`GTG | 2153 | |
| NotI | GC`GGCC,GC | 668 | SfiI | GGCCN,NNN`NGGCC | 2812 | |
| TspMI | C`CCGG,G | 680 | StuI | AGG|CCT | 2861 | |
| XmaI | C`CCGG,G | 680 | ClaI | AT`CG,AT | 2880 | |
| SmaI | CCC|GGG | 682 | BspDI | AT`CG,AT | 2880 | |
| BamHI | G`GATC,C | 687 | KasI | G`GCGC,C | 3039 | |
| HindIII | A`AGCT,T | 693 | NarI | GG`CG,CC | 3040 | |
| PstI | C,TGCA`G | 699 | SfoI | GGC|GCC | 3041 | |
| EcoRI | G`AATT,C | 705 | PluTI | G,GCGC`C | 3039 | |
| EcoRV | GAT|ATC | 713 | MscI | TGG|CCA | 3122 | |
| SalI | G`TCGA,C | 717 | Tth111I | GACN`N,NGTC | 3158 | |
| AccI | GT`MK,AC | 718 | PflFI | GACN`N,NGTC | 3158 | |
| BglII | A`GATC,T | 723 | BsrDI | GCAATG,NN` | 3271 | |
| XhoI | C`TCGA,G | 729 | RsrII | CG`GWC,CG | 3556 | |
| PaeR7I | C`TCGA,G | 729 | BstBI | TT`CG,AA | 3722 | |
| XbaI | T`CTAG,A | 735 | BsaI | GGTCTCN`NNNN, | 4029 | |
| BcgI | ,NN`(N)10CGA(N)6TGC(N)10,NN` | 829 | ApaLI | G`TGCA,C | 4644 | |
| BsrGI | T`GTAC,A | 1450 | PciI | A`CATG,T | 4958 |
T3 primer (620-639): 5′-AATTAACCCTCACTAAAGGG-3′
C-EGFP primer (852-873): 5′-GGGTCAGCTTGCCGTAGGTGGC-3′
pCMV-C-EGFP的全序列信息：LM2626 pCMV-C-EGFP-seq.txt
pCMV-C-EGFP质粒转染细胞后的表达效果请参考图1。
图1. pCMV-C-EGFP质粒转染细胞后的表达效果图。左侧为明场照片，右侧为荧光照片。
包装清单:
| 产品编号 | 产品名称 | 包装 |
| LM2626-1μg | pCMV-C-EGFP (绿色荧光蛋白) | 1μg |
| LM2626-100μg | pCMV-C-EGFP (绿色荧光蛋白) | 100μg |
| — | 说明书 | 1份 |
-20℃保存。
注意事项：
本质粒未经联迈生物书面许可不得用于任何商业用途，也不得移交给订货人所在实验室外的任何个人或单位。
本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
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文献和实验相关实验
一、 GFP背景概述 绿色荧光蛋白（green fluorescent protein, GFP）最早由Osamu Shimomura于1962年在水母（Aequorea victoria）（图2a）中发现。这种蛋白质在蓝色波长范围的光照激发下发出绿色荧光，其发光过程需要冷光蛋白质Aequorin的帮助，而且，这个冷光蛋白质可与钙离子（Ca2+）相互作用（图3）。在Aequorea victoria中发现的野生型绿色荧光蛋白的分子量较小，仅为27~30kDa，而编码GFP的基因序列也很短
dmdfe 本人将GFP基因后面加了一段大约110bp的序列，插入PET28A的BamH1和Hind3位点，最后在BL21中表达。 经SDS-PAGE验证表明： 目的蛋白 大量存在菌体裂解后沉淀即包涵体中，但是该沉淀无色。 少量存在于上清中，上清显微弱的绿色。 看文献大量报道GFP融合蛋白几乎都形成可溶性表达，目的蛋白在上清中，并且诱导条件没有太大要求。 想请教一下各位做过GFP原核表达的经验
刚刚去BD网站，发现一个优惠活动，送BD绿色荧光蛋白表达载体，原价是6000千元的，赶快贴在这里，大家赶快去要呀，是个好东东！！ Free AcGFP green monomer vector while supplies last! Commemorative Promotion: Ten Years in Fluorescent Proteins Dear Researchers, Over the past ten years, your feedback
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