细胞凋亡检测试剂盒(Annexin V-Alexa Fluo

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细胞凋亡检测试剂盒(Annexin V-Alexa Fluor 488/PI)折扣价是高品质的细胞凋亡与增殖产品，由北京百奥莱博供应，用于科研实验，本产品质量好，且极具价格优势，深为用户称道，了解更多细胞凋亡检测试剂盒(Annexin V-Alexa Fluor 488/PI)等细胞凋亡与增殖产品请联*(代"系")我司咨询订购。

名称：细胞凋亡检测试剂盒(Annexin V-Alexa Fluor 488/PI)折扣价
品牌：百奥莱博
产地：国产|进口
编号：SY0474
规格：20 rxn
Annexin V-Alexa Fluor488/PI细胞凋亡检测试剂盒（Annexin V-Alexa Fluor488/PI Apoptosis Detection Kit）是用Alexa Fluor488标记了的Annexin V作为探针，来检测细胞早期凋亡的发生，可用流式细胞仪或其他荧光检测设备进行检测。

其检测原理为：在正常的活细胞中，磷脂酰丝*酸（phosphotidylserine，PS）位于细胞膜的内侧，但在早期凋亡的细胞中，PS 从细胞膜的内侧翻转到细胞膜的表面，暴露在细胞外环境中。Annexin-Ⅴ（膜联蛋白-V）是一种分子量为35-36KD的Ca2+ 依赖性磷脂结合蛋白，能与PS高亲和力结合。可通过细胞外侧暴露的磷脂酰丝*酸与凋亡早期细胞的胞膜结合。

另外，本试剂盒中还提供了碘化丙啶（Propidium Iodide，PI）用来区分存活的早期细胞和坏死或晚期凋亡细胞。PI是一种核酸染料，它不能透过正常细胞或早期凋亡细胞的完整的细胞膜，但可以透过凋亡晚期和坏死细胞的细胞膜而使细胞核染红。因此，将Annexin V与PI联合使用时，PI 则被排除在活细胞（Annexin V-/PI-）和早期凋亡细胞（Annexin V+/PI-）之外，而晚期凋亡细胞和坏死细胞同时被Alexa Fluor488 和PI 结合染色呈现双阳性（Annexin V+/PI+）。

试剂盒组份：
Annexin V-Alexa Fluor488————————100 μl
PI Staining Solution (20 μg/ml)————200 μl
4×Binding Buffer————————————4 ml

注意事项
1) 由于细胞凋亡是一个快速的过程，建议样品在染色后1小时之内进行分析。
2) 对于贴壁细胞，消化是一个关键步骤。贴壁细胞诱导细胞凋亡时如有漂浮细胞，需收集漂浮细胞和贴壁细胞后合并染色。处理贴壁细胞时要小心操作，尽量避免人为的损伤细胞。胰酶消化时间过短，细胞需要用力吹打才能脱落，容易造成细胞膜的损伤，PI摄入过多；消化时间过长，细胞膜同样易造成损伤，甚至会影响细胞膜上磷脂酰丝*酸与Annexin V-Alexa Fluor488的结合。消化时将胰酶铺满孔板底后，轻摇时胰酶与细胞充分接触，然后倒掉大部分胰酶，利用剩余的少量胰酶再消化一段时间，待细胞间空隙增大，瓶底呈花斑状即可终止。在消化液中尽量不用EDTA，EDTA会影响Annexin V与PS的结合。
3) 如果样品来源于血液，请务必除去血液中的血小板。因为血小板含有PS，能与Annexin V结合，从而干扰实验结果。可以使用含有EDTA的缓冲剂并在200 g离心洗去血小板。
4) 试剂在开盖前请短暂离心，将盖内壁上的液体甩至管底，避免开盖时液体洒落。
5) Annexin V-Alexa Fluor488和PI是光敏物质，在操作时请注意避光。

储存条件：4℃，有效期一年。

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F030828 BIOTIN标记兔抗猫IgG抗体 Rabbit Anti-Cat IgG*BIOTIN
DNaseⅠ溶液(1mg/ml)     1ml|5ml
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·RNase抑制剂(鼠源)
编号：SY0266
英文名称：Murine RNase inhibitor(40U/μl)
规格：2KU
RNase抑制剂（RNase inhibitor）是人的胎盘中存在的一种特异性核糖核酸酶(RNase)抑制剂，能够特异地与RNase以非共价键结合形成复合体从而使RNase失活。该产品是以可溶形式在大肠杆菌中表达纯化的重组鼠源RNase抑制剂，能够广泛抑制各种RNase (RNase A, B, C)，此外经过RT-PCR、RT-qPCR检验，本品能与Reverse Transcriptase、M-MLV (H-) Reverse Transcriptase以及各种DNA Polymerase兼容。与人源RNase inhibitor相比，本品不含人源蛋白中的两个对氧化非常敏感的半胱*酸，因而具有更高的抗氧化活性，且更加适合于对高DTT敏感性实验 (如qPCR)。

该产品可用于cDNA第一链合成、多核糖体的分离(Polysome isolation)、体外转录和体外无细胞翻译系统。

活性定义：抑制5 ng RNase A活性的50%所需要的酶量定义为1个活性单位 (U)。RNase A 的活性通过水解Cyclic 2, 3-CMP 生成3-CMP定量求得。

质量控制：
核酸外切酶残留检测：200 U本品和0.6 μg λ-Hind III在74℃下反应1小时，DNA的电泳谱带不发生变化。
核酸内切酶残留检测：200 U本品和0.6 μg Supercoiled pBR322 DNA在74℃下反应1小时，DNA的电泳谱带不发生变化。
大肠杆菌残留DNA残留检测：50 μl体系中，加入200 U本品，以ddH2O为模板，扩增E. coli 16 s rDNA基因。35个循环后进行1%琼脂糖凝胶电泳，EB染色，无扩增条带。

储存条件：-20℃，有效期2年。

应用实例

1.在RNase free离心管中配制如下混合液：

 

RNase free ddH2O	to 20μl
5×Buffer	4μl
Oligo (dT)18 (50 μM)	1μl
dNTP Mix (10 mM each)	1μl
RNase Inhibitor (40 U/μl)	1μl
Reverse Transcriptase (200 U/μl)	1μl
模板RNA	10 pg-2.5 μg

2.轻轻混匀。
3.50℃ 45min, 70℃ 15 min。
4.产物于-20℃保存。

注意事项
1）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
2）抑制RNase活性的pH值范围较广，在 pH 7～8时表现最大活性。
3）起泡或剧烈搅拌 (Vortex等)会引起失活。
4）不抑制RNase H活性。

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