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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
4℃
- 保质期:
一年
- 英文名:
Annexin V-Alexa Fluor 488/PI Apoptosis Detection Kit
- 库存:
589
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 规格:
20 rxn
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京现货细胞凋亡检测试剂盒(Annexin V-Alexa Fluor 488/PI)折扣价是高品质的细胞凋亡与增殖,由北京百奥莱博供应,用于科研实验,本产品质量好,且极具价格优势,深为用户称道,了解更多细胞凋亡检测试剂盒(Annexin V-Alexa Fluor 488/PI)等细胞凋亡与增殖产品请联系我司咨询订购。
名称:北京现货细胞凋亡检测试剂盒(Annexin V-Alexa Fluor 488/PI)折扣价
产地:国产|进口
品牌:百奥莱博
编号:SY0474
英文名:Annexin V-Alexa Fluor 488/PI Apoptosis Detection Kit
规格:20 rxn
Annexin V-Alexa Fluor488/PI细胞凋亡检测试剂盒(Annexin V-Alexa Fluor488/PI Apoptosis Detection Kit)是用Alexa Fluor488标记了的Annexin V作为探针,来检测细胞早期凋亡的发生,可用流式细胞仪或其他荧光检测设备进行检测。
其检测原理为:在正常的活细胞中,磷脂酰丝氨酸(phosphotidylserine,PS)位于细胞膜的内侧,但在早期凋亡的细胞中,PS 从细胞膜的内侧翻转到细胞膜的表面,暴露在细胞外环境中。Annexin-Ⅴ(膜联蛋白-V)是一种分子量为35-36KD的Ca2+ 依赖性磷脂结合蛋白,能与PS高亲和力结合。可通过细胞外侧暴露的磷脂酰丝氨酸与凋亡早期细胞的胞膜结合。
另外,本试剂盒中还提供了碘化丙啶(Propidium Iodide,PI)用来区分存活的早期细胞和坏死或晚期凋亡细胞。PI是一种核酸染料,它不能透过正常细胞或早期凋亡细胞的完整的细胞膜,但可以透过凋亡晚期和坏死细胞的细胞膜而使细胞核染红。因此,将Annexin V与PI联合使用时,PI 则被排除在活细胞(Annexin V-/PI-)和早期凋亡细胞(Annexin V+/PI-)之外,而晚期凋亡细胞和坏死细胞同时被Alexa Fluor488 和PI 结合染色呈现双阳性(Annexin V+/PI+)。
试剂盒组份:
Annexin V-Alexa Fluor488————————100 μl
PI Staining Solution (20 μg/ml)————200 μl
4×Binding Buffer————————————4 ml
注意事项
1) 由于细胞凋亡是一个快速的过程,建议样品在染色后1小时之内进行分析。
2) 对于贴壁细胞,消化是一个关键步骤。贴壁细胞诱导细胞凋亡时如有漂浮细胞,需收集漂浮细胞和贴壁细胞后合并染色。处理贴壁细胞时要小心操作,尽量避免人为的损伤细胞。胰酶消化时间过短,细胞需要用力吹打才能脱落,容易造成细胞膜的损伤,PI摄入过多;消化时间过长,细胞膜同样易造成损伤,甚至会影响细胞膜上磷脂酰丝氨酸与Annexin V-Alexa Fluor488的结合。消化时将胰酶铺满孔板底后,轻摇时胰酶与细胞充分接触,然后倒掉大部分胰酶,利用剩余的少量胰酶再消化一段时间,待细胞间空隙增大,瓶底呈花斑状即可终止。在消化液中尽量不用EDTA,EDTA会影响Annexin V与PS的结合。
3) 如果样品来源于血液,请务必除去血液中的血小板。因为血小板含有PS,能与Annexin V结合,从而干扰实验结果。可以使用含有EDTA的缓冲剂并在200 g离心洗去血小板。
4) 试剂在开盖前请短暂离心,将盖内壁上的液体甩至管底,避免开盖时液体洒落。
5) Annexin V-Alexa Fluor488和PI是光敏物质,在操作时请注意避光。
储存条件:4℃,有效期一年。
北京现货细胞凋亡检测试剂盒(Annexin V-Alexa Fluor 488/PI)折扣价极具性价比,此外,我公司正火爆促销以下产品:
·透明质酸酶
编号:SY0387
英文名称:Hyaluronidase
规格:100mg
本品来源于牛睾丸,活力值为400–1,000 units/mg,最佳pH值为4.5–6.0。透明质酸酶,英文名称Hyaluronidase,一类能够降低体内透明质酸活性的酶的总称,结构上由4个相同亚基构成,每个亚基分子量接近14kDa,该酶是一种糖蛋白,包含5%的甘露糖和2.2%的葡萄糖胺。功能上该酶可随机裂解透明质酸、软骨素和硫酸软骨素中的 β-N-乙酰己糖胺-[1→4] 糖苷键。常与胶原酶联合使用于降解细胞外基质,从而从组织中分离活细胞。
溶液配制:溶于0.02 M PBS(pH7.0),含77 mM NaCl和0.01% BSA,浓度为1mg/ml。现配现用。
中文别名:玻璃糖醛酸酶;玻璃酸酶
英文别名:Hyaluronoglucosaminidase; Hyaluronate 4-glycanohydrolase
CAS:37326-33-3
来源:牛睾丸
分子量:~55kDa
类型(Type):I-S
外观:淡黄色至米黄色至褐色粉末
活力单位:基于USP透明质酸酶参照标准,即每分钟在37℃,pH5.7的2ml反应液中引起OD6000.330个变化定义为一个活力单位。
抑制剂(Inhibitor):Fe2+,Fe3+,Zn2+,Cu2+,肝素,金精三羧酸,硫酸,硝酸,乙酰化透明质酸,硫酸纤维素酯,胆汁等
储存条件:-20℃保存,有效期两年
结构式

北京现货细胞凋亡检测试剂盒(Annexin V-Alexa Fluor 488/PI)折扣价关键词:细胞凋亡检测试剂盒(Annexin V-Alexa Fl,Annexin V-Alexa Fluor 488/PI Apoptosis Detection K,细胞凋亡检测试剂盒(Annexin V-Alexa Fluor 488/PI),SY0474
·腺苷三磷酸溶液(100 mM)(ATP)
编号:SY0052
英文名称:ATP Solution(100 mM)
规格:1ml
ATP即Adenosine-5-triphosphate,中文名为腺苷三磷酸,该化合物及其钠盐是生物系统中能量转换的基本组分,可用于分子生物学中多种相关应用,如激酶反应、体外转录、连接和磷酸化反应等。
本产品为纯度≥99%(HPLC)的ATP三钠盐配制所得的无色透明水溶液, pH (25℃)= 7.0±0.1,浓度为100mM,且无DNase,RNase和磷酸酶污染。
储存条件:-20℃,有效期2年。
·动植物组织RNA稳定液
编号:SY0267
英文名称:Tissue Stabilizer
规格:100ml
RNA酶广泛存在环境中,很容易降解新鲜采取的动植物组织、血液、体液等样本中的RNA,从而使得研究人员在收集完新鲜样本需要做液氮速冻,或者立即进行RNA的纯化,给研究人员的户外工作带来很多不便。
动植物组织稳定液(Tissue Stabilizer)是专门开发用于稳定并保护采集样本内RNA的完整性,一种无毒溶液,可迅速渗入组织,灭活内源RNase。具有以下特点:
1)操作极其简便:只需要将新鲜组织切成合适大小(≤0.5 cm)的组织块,浸入5~10倍体积的本品中即可。2)稳定周期长:经本品浸渍的组织/细胞可在37℃保存1天,室温保存1周,4℃保存4周,-20℃/-80℃长期保存。3)下游兼容性广:几乎兼容于所有的RNA分离方法,如Total RNA Extraction Reagent总RNA抽提试剂,以及商业化的几乎所有RNA抽提试剂盒,包括离心柱抽提法,磁珠纯化法等。4)应用性广:可用于多种动植物组织如脑、心脏、肝脏、胰脏、肾脏、脾脏、睾丸、肌肉、植物的茎叶等的保存,还可用于酵母、组织培养细胞等。
注意事项
1)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
2)经本品稳定液处理的样本还可做DNA的提取,甚至蛋白质的提取,但由于本品会变性蛋白质,因此不适合做天然蛋白的提取。
3)本本品稳定液室温保存过程中可能会产生一些沉淀,只需要在使用前放到37℃温育片刻,并摇晃使其重溶即可。
4)本本品稳定液仅适用于新鲜组织,不可用于冰冻组织。若需要保护冰冻组织内RNA的稳定性,可使用我司的本品-ICE冰冻动植物组织RNA稳定-过渡溶液,即可在将冰冻组织恢复为匀浆用的组织状态,并进行RNA抽提的过程中,维持RNA的稳定性。
操作流程
1. 样品处理:
A. 动物组织:本品稳定液不会破坏动物组织结构的完整性,因此,已经浸入本品的组织平衡一段时间后,可从溶液中取出,切成更小的组织块(≤0.5 cm大小),再重新放回本品稳定液中。另外,某些动物组织如骨头具有比较弱的液体渗透性,不适合用本品进行RNA保护。
使用:将组织切成合适的大小块(≤0.5 cm大小)后,加入5倍体积的本品稳定液。
B. 植物组织:植物组织天生具有的屏障如叶子表面的蜡层可阻碍本品稳定液的渗透,往往需要破坏这些屏障层从而允许溶液的浸透。对于许多柔软的植物组织如嫩叶,嫩茎等,本品可直接渗透且达到理想的RNA保护效果。
使用:将组织切成合适的大小块(≤0.5 cm大小)后,加入5倍体积的本品稳定液。
C. 组培细胞、白细胞:按照标准实验操作方法收集细胞(用PBS清洗1-2次)。之后往细胞内加入5~10倍体积的本品稳定液。
D. 酵母:收集大约108个细胞 (12,000 g,2 min),弃上清。加入0.5~1 ml的本品稳定液。长期保存时应将酵母细胞置于本品稳定液中,4℃放置1小时。然后离心收集细胞 (12,000 g,5 min),弃上清,再置于-80℃保存。
2. 样品保存:
A. -80℃保存:对于归档的样本建议-80℃保存,且效果最佳,样本可长期保存,-80℃条件下本品溶液也会结冻。
首先需要让样本4℃浸透过夜,然后再转移到-80℃。如果中间需要做样本的融化,建议取出4℃浸透过夜的组织或者离心收集细胞,然后再冻存在-80℃。之后,样本可直接放在室温融化,之后重新冻上,不会造成RNA量的严重损失或者RNA完整性的明显破坏。
B. -20℃保存:也适用于归档样本的保存。样本不会在-20℃冻住,但可能会形成结晶。不会对后续RNA分离造成影响,样本可长期保存。
首先需要让样本4℃浸透过夜,然后再转移到-20℃。之后,样本可直接放在室温融化。重新冻上后不会造成RNA量的损失或者RNA完整性的破坏。
C. 4℃保存:大部分样品放到本品溶液中,稳定保存1个月,不会有明显的RNA降解发生。
D. 室温(25℃)保存:建议低温环境保存。若条件不允许,请将本品稳定液于冰上冷却几个小时,然后将样品浸入此溶液中,室温稳定保存1周,不会有明显的RNA降解发生。
E. 37℃保存:纯化的RNA样本于37℃孵育24h,结构依然完整。
3. RNA提取:
注意:RNase失活的过程是可逆的,在样本使用前不要清洗掉本品稳定液。
A. 组织样本:直接用灭菌镊子从本品稳定液中取出组织块,然后用干净的吸水纸吸掉表面的液体。之后立即置于裂解液中匀浆。
B. 细胞样本:由于本品稳定液密度较大,此时需要使用大于普通介质的离心力。一般来说,保存在本品稳定液中的细胞能承受更高的转速,并维持细胞的完整性。大部分细胞能够承受离心速度 (5,000 g,5 min),收集细胞沉淀。注意:由于不同细胞承受离心力会有差异,建议先用少量的细胞进行离心速度承受性的测试。
C.之后进行后续的RNA抽提,兼容各种常见的RNA抽提试剂,以及商业化的RNA抽提试剂盒。
北京现货细胞凋亡检测试剂盒(Annexin V-Alexa Fluor 488/PI)折扣价关键词:细胞凋亡检测试剂盒(Annexin V-Alexa Fl,Annexin V-Alexa Fluor 488/PI Apoptosis Detection K,细胞凋亡检测试剂盒(Annexin V-Alexa Fluor 488/PI),SY0474
羧甲基纤维素 Sodium 2-naphthalenesulfonate 9004-32-4
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ARB10419 人丙型肝炎IgM(HCV-IgM)酶联免疫定量检测 Human hepatitis c virus igm,hcv-igM ELISA KIT
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63231-63-0 核糖核酸酵母
阿米卡星 EDTA-2NaCa 37517-28-5
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文献和实验Annexin V是一种钙离子依赖性磷脂结合蛋白,与磷脂酰丝氨酸PS有高度亲和力,可通过细胞外侧暴露的PS与凋亡早期细胞胞膜结合,将Annexin V标记上荧光染料利用流式细胞仪或荧光显微镜可检测细胞凋亡。 由于凋亡晚期或坏死细胞膜完整性丧失,细胞核染色液可进入细胞内染色细胞核,搭配Annexin V使用可将处于不同凋亡时期的细胞区分开。 A.悬浮细胞: 按照实验方案进行凋亡诱导,300 g离心5 min,弃上清,收集细胞,用PBS洗涤细胞一次,轻轻重悬浮细胞并计数。 取1~5 ×
Q:Annexin V 凋亡检测试剂盒的原理是什么? A:Annexin V 是一种钙离子依赖性磷脂结合蛋白,与磷脂酰丝氨酸 PS 有高度亲和力,可通过细胞外侧暴露的 PS 与凋亡早期细胞胞膜结合,将 Annexin V 标记荧光染料如 FITC 利用流式细胞仪或荧光显微镜可检测细胞凋亡。 碘化丙啶(Propidium Iodide, PI)或 7-AAD 可与双链 DNA 特异性结合,并产生强烈的荧光,正常情况下无法透过细胞膜。由于凋亡晚期或坏死细胞膜丧失完整性,核染料 PI 或 7-AAD
示例: Jurkat细胞用1μM喜树碱(Camptothecin) (左)或未加药 (右)处理4h,FITC-Annexin V/PI荧光双染细胞凋亡检测试剂盒染色后,流式细胞仪荧光检测。 Annexin V-FITC单阳性细胞为早期凋亡细胞,Annexin V-FITC和PI染色双阳性的细胞为坏死细胞或者晚期凋亡。PI单染色阳性位裸核细胞。 实测数据可能会因细胞类型、细胞凋亡情况,检测仪器等的不同而存在差异,图中数据仅供参考。 流式检测细胞凋亡的数据分析方法: 1) 选中所有颗粒,将FSC
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