M-MuLV反转录酶(不含RNase H活性)供应

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北京百奥莱博专业生产销*(代"售")M-MuLV反转录酶(不含RNase H活性)供应，我公司供应的分子生物学试剂品类齐全，且具有优势价格，欢迎新老客户垂询订购。

名称：M-MuLV反转录酶(不含RNase H活性)供应
编号：ALH257
产地：国产|进口
品牌：百奥莱博
规格：10KU|10KU×5
本品是使用通过基因重组技术克隆表达的点突变型RNase H活性缺失的M-MuLV反转录酶。野生型的M-MuLV包含的RNase H活性能够催化降解DNA/RNA杂合体中的RNA，因此在cDNA第一条链的合成反应中可能会降解RNA/DNA杂合体中的模板RNA。本酶M-MuLV(RNase Hˉ)的RNase H活性缺失，与M-MuLV 相比，具有更强的延伸能力和稳定性，可用于较长的cDNA合成以及高比例的全长cDNA文库的构建等。本酶浓度200 units/μl，合成cDNA片段长度最高可达12kb。

试剂盒组分(10KU)：
M-MuLV RTase(200U/μl)———————10000U
5×RT Buffer————————————500μl

注意事项：
1. 避免RNase污染。
2. 为保证反转录成功建议使用高质量的RNA样品。
3. 如果RNA模板GC含量丰富或者有复杂二级结构，可以先只加RNA模板、引物和和RNase free H2O混匀，65℃变性5分钟，冰上冷却，短暂离心后加入其它成分继续下面的反转录步骤。

储存条件：-20℃。

本品别名：M-MuLV反转录酶(不含RNase H活性)|M-MuLV反转录酶(RNase H活性缺失)|N-MuLV Rtase

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·一步法荧光定量耐热RT-PCR试剂盒
编号：ALH197
英文名称：One Step heat-resistant qRT-PCR Kit
规格：50μl×50次|50μl×100次
本试剂盒是采用SYBR Green I 嵌合荧光法进行Real Time PCR 的专用试剂，用本制品进行Real Time qRT-PCR 可在同一反应管内连续进行。反应过程中无需打开

管盖添加试剂并可对扩增产物进行实时检测，避免了污染的同时提高了检测灵敏度和实验效率。非常适合于微量RNA 尤其是微量RNA病毒的检测。本试剂盒包括最

适合Real Time PCR的突变改造M-MuLV H Minus逆转录酶(THERMOscript RTase)、热启动HotMaster Taq DNA聚合酶和RNasin抑制剂mix、同时包含适用于逆转录和

PCR扩增的优化独特反应体系。本酶M-MuLV(RNase Hˉ)的RNase H活性缺失，与M-MuLV 相比，具有更强的延伸能力和稳定性。同时该酶多点突变提高了耐热性，

可以在50℃反转录，提高了复杂二级结构，GC含量丰富模板反转录效率。而采用优质热启动酶HotMaster Taq DNA Polymerase可以最大限度的减少PCR扩增全程中

的非特异性扩增产物产生，大大提高了荧光定量PCR反应的精确性。本制品可以在宽广的定量区域内得到良好的标准曲线，对靶基因进行准确定量检测，重复性好

，可信度高。

试剂盒组份(50次)：
2×qRT-PCR Mix(含Sybr Green I)———————1.25ml
Enzyme Mix—————————————————50μl
耐热反转录酶————————————————50μl
RNase free H2O———————————————1.5ml

适用范围：适用于高拷贝、低拷贝基因检测；部分高GC 含量或具有复杂二级结构的RNA 模板。

注意事项：
1. 当同时需要进行数次Real Time One Step qRT-PCR反应时，应先配制各种试剂的混合液（Master Mix，其中包括RNase-free ddH2O、Buffer、各种酶等），然

后再分装到每个反应管中。这样可使所取的试剂体积更准确，减少试剂损失，避免重复分取同一试剂。同时也可以减少实验操作或实验样品之间产生的误差。
2. 使用Enzyme Mix和RTase时，分取之前要小心地瞬间离心收集到反应管底部；由于酶保存液中含有高浓度的甘油，粘度高，分取时应慢慢吸取。
3. 2×qRT-PCR Mix内含Sybr Green I，保存或配制One Step qRT-PCR反应液时应避免强光照射。
4. 为保证反应成功建议使用高质量的RNA模板。
5. 不同的片段，所需最佳RNA模板用量不同，过多的RNA会抑制反应，建议根据反应调整模板用量。
6. 只能使用特异性引物，不能使用Oligo(dT) 和Random Primer 进行反应。

储存条件：-20℃，有效期12个月。


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·柱式质粒小量提取试剂盒
编号：ALH075
英文名称：Plasmid rapid extraction kit (centrifugal column)
规格：100次|200次
本试剂盒适用于小规模质粒制备。采用改进SDS-碱裂解法裂解细胞，离心吸附柱内的硅基质膜在高盐、低pH值状态下选择性地结合溶液中的质粒DNA，再通过漂洗液将杂质和其它细菌成分去除，最后低盐、高pH值的洗脱缓冲液将纯净质粒DNA从硅基质膜上洗脱。

试剂盒组份(100次)：
RNaseA(10mg/ml)————————250μl
溶液P1—————————————25ml
溶液P2—————————————25ml
溶液P3—————————————35ml
漂洗液WB————————————25ml
洗脱缓冲液EB——————————15ml
吸附柱和收集管(2ml)———————100套

试剂盒特点：
1.离心吸附柱内硅基质膜全部采用进口世界著名公司特制吸附膜，柱与柱之间吸附量差异极小，可重复性好。克服了国产试剂盒膜质量不稳定的弊端。
2.快速、方便，不需要使用有毒的*酚、*仿等试剂，也不需要乙醇沉淀。获得的质粒产量高、纯度好， 可以直接用于酶切、转化、PCR、体外转录、测序等各种分子生物学实验。

注意事项
1. 本试剂盒适用菌株为XL-1 Blue和DH5α等核酸酶含量低缺陷型菌株。所用菌株为JM系列、HB101等endA菌株或野生型菌株，核酸酶含量丰富，应购买本公司生产的高纯度质粒小量快速提取试剂盒。
2. 所有的离心步骤均在室温完成，使用转速可以达到13000rpm的传统台式离心机，如Eppendorf 5415C 或者类似离心机。
3. 溶液P3中含有刺激性化合物，操作时要戴乳胶手套，避免沾染皮肤、眼睛和衣服。若沾染皮肤、眼睛时，要用大量清水或者生理盐水冲洗。
4. 提取质粒的量与细菌培养浓度、质粒拷贝数等因素有关。一般高拷贝质粒，建议接种单菌落于1.5～4.5ml加合适抗生素的LB培养基， 过夜培养14～16个小时，可提取出多达20μg的纯净质粒。如果所提质粒为低拷贝质粒或大于10kb的大质粒，应适当加大菌体使用量，使用5～10ml过夜培养物，同时按比例增加P1、P2、P3的用量，其它步骤相同。
5. 得到的质粒DNA可用琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计检测浓度与纯度。OD260值为1相当于大约50μg/ml DNA。电泳可能为单一条带，也可能为2条或者多条DNA条带，这主要是不同程度的超螺旋构象质粒泳动位置不一造成，与提取物培养时间长短、提取时操作剧烈程度等有关。本公司产品正常操作情况下基本超螺旋可以超过90%。
6. 质粒DNA确切分子大小， 必须酶切线性化后，对比DNA分子量Marker才可以知道。处于环状或者超螺旋状态的的质粒，泳动位置不确定，无法通过电泳知道其确切大小。
7. 洗脱液EB不含有螯合剂EDTA，不影响下游酶切、连接等反应。也可以使用水洗脱，但应该确保pH大于7.5，pH过低影响洗脱效率。用水洗脱质粒应该保存在－20℃。质粒DNA如果需要长期保存，可以用TE缓冲液洗脱（10mM Tris-HCl，1mM EDTA，pH 8.0），但是EDTA可能影响下游酶切反应，使用时可以适当稀释。

储存条件：室温，有效期12个月。


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·动物组织细胞免DNA提取PCR试剂盒
编号：ALH203
英文名称：Animal Tissue PCR Kit(Free of DNA Extraction)
规格：100次|500次
本试剂盒采用独特的裂解缓冲液快速裂解动植物组织，释放的DNA无需纯化便可以作为模板，用高度耐抑制物的2 × Direct PCR Mix扩增，扩增产物可直接上样电泳。动植物组织（哺乳动物，海洋动物，昆虫等）、细胞、唾液、毛发等。使用简单，高通量筛选；一般扩增大小<2.5kb

试剂盒组分(100次)：
缓冲液AD1—————————0.75 ml
缓冲液AD2—————————7.5ml
2×Direct PCR Mix—————1ml
双蒸水(PCR级)———————10ml

注意事项:
1. 如果扩增条带较弱，可以适当增加或者减少模板加入量，裂解混合物模板一般可以在1μl～4μl内调节。
2. 如果非特异扩增较多，可调整退火温度，或者适当增减模板用量。
3. 各溶液使用完毕后，应该立刻盖紧盖子，以免PH改变影响质量。

储存条件：-20℃。

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