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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
757
- 英文名:
Yeast RNA rapid extraction kit
- 保质期:
12个月
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
2~8℃
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专业生产销*(代"售")北京酵母RNA提取试剂盒现货,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:北京酵母RNA提取试剂盒现货
英文名:Yeast RNA rapid extraction kit
产地:国产|进口
编号:ALH041
规格:50次
品牌:百奥莱博
本试剂盒适用于酵母RNA的提取,酵母细胞经溶壁酶处理去除细胞壁后,独特的裂解液/β-巯基乙醇迅速裂解细胞和灭活细胞RNA酶,然后用乙醇调节结合条件后,RNA选择性吸附于离心柱内硅基质膜, 再通过一系列快速的漂洗-离心的步骤, 去蛋白液和漂洗液将细胞代谢物,蛋白等杂质去除, 最后低盐的RNase free H20将纯净RNA从硅基质膜上洗脱。
本试剂盒特点:
1.离心吸附柱内硅基质膜全部采用进口世界著名公司特制吸附膜,柱与柱之间吸附量差异极小,可重复性好。克服了国产试剂盒膜质量不稳定的弊端。
2.不需要使用有毒的*酚,*仿等试剂,也不需要乙醇沉淀等步骤。
3.快速,简捷,单个样品操作一般可在20分钟内完成。
4.多次柱漂洗确保高纯度,OD260/OD280典型的比值达1.9~2.0,基本无DNA残留,可用于RT-PCR,Northern-blot和各种实验。
试剂盒组份:
| 组份 | 10次 |
| 缓冲液SE | 30ml |
| 溶壁酶(10U/μl) | 2500U |
| 裂解液RLT | 20 |
| 去蛋白液RW1 | 40 |
| 漂洗液RW | 10 |
| RNase-freeH2O | 10ml |
| 吸附柱和收集管 | 10套 |
储存条件:室温,有效期12个月(溶壁酶需-20℃保存)。
注意事项
1. 第一次使用前请先在漂洗液RW瓶中加入指定量乙醇,加入后请及时打钩标记已加入乙醇,以免多次加入!
2. 所有的离心步骤均在室温完成,使用转速可以达到13000rpm 的传统台式离心机,如Eppendorf 5415C 或者类似离心机。
3. 需要自备乙醇,β-巯基乙醇,水浴锅。
4. 裂解液RLT 和去蛋白液RW1 中含有刺激性化合物,操作时要戴乳胶手套,避免沾染皮肤,眼睛和衣服。若沾染皮肤、眼睛时,要用大量清水或者生理盐水冲洗。
5. 关于DNA 的微量残留:
一般情况下,一般说来任何总RNA 提取试剂在提取过程中无法完全避免DNA 的微量残留,本试剂盒由于采取了本公司独特的缓冲体系和选择了特殊吸附能力的吸附膜,在大多数RT-PCR 扩增过程中极其微量的DNA 残留(一般电泳EB 染色紫外灯下观察不可见)影响不是很大, 如果要进行严格的mRNA 表达量分析如荧光定量PCR,我们建议在进行模板和引物的选择时:
1) 选用跨内含子的引物,以穿过mRNA 中的连接区,这样DNA 就不能作为模板参与扩增反应。
2) 选择基因组DNA 和cDNA 上扩增的产物大小不一样的引物对。
3) 将RNA 提取物用RNase-free 的DNase I 处理。本试剂盒还可以用于DNase I 处理后的RNA 清洁(cleanup),请联*(代"系")我们索取具体操作说明书。
4) 在步骤去蛋白液RW1 漂洗前,直接在吸附柱 上进行DNase I 处理。请联*(代"系")我们索取具体操作说明书。
6. RNA 纯度及浓度检测:
完整性:RNA 可用普通琼脂糖凝胶电泳(电泳条件:胶浓度1.2%;0.5×TBE 电泳缓冲液;150v,15 分钟)检测完整性。由于细胞中70%-80%的RNA 为rRNA,电泳后UV下应能看到非常明显的rRNA 条带。动物rRNA 大小分别约为5 kb 和2kb,分别相当于28S 和18S rRNA。动物RNA 样品中最大rRNA 亮度应为次大rRNA 亮度的1.5-2.0 倍,否则表示RNA 样品的降解。出现弥散片状或条带消失表明样品严重降解。
纯度:OD260/OD280 比值是衡量蛋白质污染程度的指标。高质量的RNA,OD260/OD280 读数(10mMTris, pH7.5)在1.8-2.1 之间。OD260/OD280 读数受测定所用溶液的pH 值影响。同一个RNA 样品,假定在10mM Tris,pH7.5 溶液中测出的OD260/OD280 读数1.8-2.1 之间,在水溶液中所测读数则可能在1.5-1.9之间,但这并不表示RNA 不纯。
浓度:取一定量的RNA 提取物,用RNase-free 水稀释n 倍,用RNase-free 水将分光光度计调零,取稀释液进行OD260, OD280 测定,按照以下公式进行RNA浓度的计算:终浓度(ng/μl)= (OD260)×(稀释倍数n)×40
本品别名:酵母RNA提取试剂盒|酵母RNA抽提试剂盒|酵母RNA纯化试剂盒
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北京酵母RNA提取试剂盒现货关键词:酵母RNA抽提试剂盒,酵母RNA提取试剂盒,酵母RNA纯化试剂盒
·基因组DNA去污剂
编号:ALH602
英文名称:DNA eraser
规格:50ml
本品采用非酶法清除RNA样品中的基因组DNA污染。每ml试剂处理~100μg RNA样品。很多用户在提取RNA的时候由于操作因素或者RNA抽提试剂质量问题,造成所得到的RNA样品中混杂基因组污染,在普通或者变性电泳的时候直接肉眼可见程度不一的DNA污染杂带。即使用市售的RNase-free的DNase消化DNA也不容易清除完全,而且常常导致RNA降解。本品不含DNA酶,在强烈抑制RNA酶的条件下彻底清除RNA样品中的污染DNA杂带和蛋白质污染,同时进一步纯化RNA。最后通过异丙醇沉淀回收的RNA纯度极高,完全不影响原有RNA质量和下游应用。
·M-MuLV反转录酶(不含RNase H活性)
编号:ALH257
英文名称:M-MuLV Reverse Transcriptase
规格:10KU|10KU×5
本品是使用通过基因重组技术克隆表达的点突变型RNase H活性缺失的M-MuLV反转录酶。野生型的M-MuLV包含的RNase H活性能够催化降解DNA/RNA杂合体中的RNA,因此在cDNA第一条链的合成反应中可能会降解RNA/DNA杂合体中的模板RNA。本酶M-MuLV(RNase Hˉ)的RNase H活性缺失,与M-MuLV 相比,具有更强的延伸能力和稳定性,可用于较长的cDNA合成以及高比例的全长cDNA文库的构建等。本酶浓度200 units/μl,合成cDNA片段长度最高可达12kb。
试剂盒组分(10KU):
M-MuLV RTase(200U/μl)———————10000U
5×RT Buffer————————————500μl
注意事项:
1. 避免RNase污染。
2. 为保证反转录成功建议使用高质量的RNA样品。
3. 如果RNA模板GC含量丰富或者有复杂二级结构,可以先只加RNA模板、引物和和RNase free H2O混匀,65℃变性5分钟,冰上冷却,短暂离心后加入其它成分继续下面的反转录步骤。
储存条件:-20℃。
我公司生产供应销*(代"售")的RNA纯化产品正全系列现货促销,满分期待您的垂询选购北京酵母RNA提取试剂盒现货。
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文献和实验相关专题 北京百泰克—国内自主研发核酸提取与PCR相关试剂盒商家 1.迅速灭活内源的RNA酶,以防止RNA降解。 以下3个方法均可有效使内源RNA酶失活: 1)用含离液(如胍盐)的细胞裂解液收获样品,并立即匀浆。 2)用液氮瞬间冻结样品。值得特别注意的是:组织块必须保证足够小,在浸入液氮的瞬间就能冻结,以确保瞬间令RNA酶失活。 3)立即将样品置于RNAfixer无液氮RNA样品储存液中
或组织的类型来选择。大部分培养的细胞可以置于细胞裂解液中,通过简单的涡旋震荡来匀浆;而动物组织、植物组织、酵母和细菌、真菌则常常需要更加剧烈的方法,通常用液氮研磨。比如说细菌(特别是革兰氏阳性菌)的细胞壁,就需要溶菌酶消化来实现彻底的细胞裂解和RNA的最大回收,酵母提取时加入破壁酶帮助破壁,再用TRIpure或RNApure进行提取。5. RNA提取少走弯路——不同材料如何选择最适RNA提取试剂现有众多的RNA分离方法也许令人难以取舍。目前最简单也是最安全的方法是柱式分离,如RNApure 因为操作
分培养的细胞可以置于细胞裂解液中,通过简单的涡旋震荡来匀浆;而动物组织、植物组织、酵母和细菌、真菌则常常需要更加剧烈的方法,通常用液氮研磨。比如说细菌(特别是革兰氏阳性菌)的细胞壁,就需要溶菌酶消化来实现彻底的细胞裂解和RNA的最大回收,酵母提取时加入破壁酶帮助破壁,再用TRIpure或RNApure进行提取。5. RNA提取少走弯路--不同材料如何选择最适RNA提取试剂 现有众多的RNA分离方法也许令人难以取舍。目前最简单也是最安全的方法是柱式分离,如RNApure 因为操作简单,时间短,纯度
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