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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
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225
- 英文名:
PCNA cell proliferation Detection Kit
- 保质期:
长期
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
2~8℃
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博主要从事生物试剂的生产和销*(代"售"),产品线涵盖北京PCNA细胞增殖检测试剂盒(ICF/FACS法)哪里卖在内的细胞生物学试剂产品,还包括PCR及荧光定量PCR、核酸提取试剂盒类、样本核酸保护试剂、核酸提取、克隆与转化、蛋白纯化、蛋白检测、免疫组化、细胞凋亡与抗体等。
名称:北京PCNA细胞增殖检测试剂盒(ICF/FACS法)哪里卖
品牌:百奥莱博
编号:KFS335
英文名:PCNA cell proliferation Detection Kit
规格:20T
PCNA 细胞增殖检测试剂盒(细胞免疫荧光法/流式细胞仪检测),PCNA是细胞DNA 多聚酶的“δ”辅助蛋白,是真核细胞DNA 合成时所必需的一种酸性核蛋白。PCNA 在细胞核内合成,并储存在核内,细胞处于静止状态时,其含量很低,当细胞进入增殖周期中,其表达明显增加,故PCNA 的表达高低可反映细胞增殖的活跃程度。
操作方法
1. 在最适的环境下培养细胞。
2. 除去培养液,用PBS 洗一次。
3. 胰蛋白酶处理和收集细胞,离心,(注意1)保证每管细胞数在106 个。
4. 用0.3 ml PBS 轻轻的重悬细胞, 然后慢慢加入0.7 ml 预冷的100%乙醇。用1 ml 玻璃移液管小心的混匀。在4°C 至少1h。(注意2)
5. 沉淀细胞,完全吸去上清。
6. 用150 μl PBS/1 % BSA 洗细胞2 次。
7. 用100μl 抗体孵育液(0.5% Tween-20/1%BSA/PBS)重悬细胞,加入1ul PCNA 抗体(1μg/106 cells),室温孵育1 小时。
8. 离心收集细胞,用150μl1% BSA-PBS 洗2 次。
9. 离心收集细胞,用50μl 抗体孵育液重悬,加1μl (1.5μg/106 cells) 羊抗鼠IgG-FITC,室温孵育30 分钟。离心收集细胞,150μl PBS/ 1 % BSA 洗2 次。
10. 用含有终浓度为10 μg/ml RNase A 和20μg/ml PI 的0.5 ml PBS(pH7.4)重悬细胞。
11. 避光使细胞在室温下孵育20min 后,离心收集细胞,150μl PBS/ 1 % BSA 洗2 次后,转移至流式检测管中重悬。
12. FACS 检测或者储存于4℃。
注意事项
1.所有的沉淀细胞步骤为2,000 rpm, 5 min。
2.可渗透化处理细胞后细胞浓度大约为106 ,样品可以4°C 储存于乙醇中到2 个星期。
3.流式细胞检测时需要设立对照试验:
只用PI 染细胞
只用羊抗小鼠IgG-FITC 染细胞
未染色的细胞组
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·Z-LE(OMe)HD(OMe)-FMK(Caspase 9 抑制剂)
编号:KFS270
英文名称:Caspase 9 Inhibitors Ac-LEHD-FMK
等级:5mM in DMSO
规格:20μl
浓度:5mM in DMSO
分子式:C32H43FN6O10
分子量:690.7
纯度:≥95% (HPLC)
储存:-20℃,有效期6个月
·线粒体红色荧光探针
编号:KFS158
英文名称:MitoRed
等级:5mM in DMSO
规格:100μL
具有细胞膜渗透性的MitoRed(分子量531.5)探针包含一个温和的巯基反应性*甲基基团,可用于标记线粒体,并在固定之后保留在线粒体内。标记线粒体,细胞可以与MitoRed 探针简单孵育,探针通过被动扩散传过质膜,并在有活性的线粒体内富集。一旦线粒体被标记,细胞再用醛基类固定剂固定之后,就可以进一步做下游实验的深入处理。这些MitoRed 染料可以解决一些致病性细胞上研究所面临的困难,因为标记线粒体可以在细胞被固定之前开展。
虽然传统的荧光染料,如四甲基罗丹明和罗丹明123,很容易识别功能性线粒体,但是这些染料一旦在线粒体去极化时也很容易被洗涤出线粒体。这些缺点限制了常规染色实验中所用的醛类固定剂,以及一些实验用的处理药品的选择。而MitoView 染料可以很好的解决这一问题。
浓度:0.5mM in DMSO
储存:-20℃,避光,有效期6个月。
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·kFluor555标记山羊抗小鼠IgG(H+L)
编号:KFS404
英文名称:KeyFluor555 Goat anti-mouse IgG(H+L)
规格:100μL
浓度:2.0mg/ml
储存:4℃避光,有效期6个月(或-20℃避光,有效期一年)
荧光标记的山羊抗小鼠免疫球蛋白抗体能被荧光显微镜,激光扫描共聚焦显微镜,流式细胞术,荧光吸光检测器检测出。我们所给出的荧光标记宽度使我们的试剂几乎能适用于任何荧光检测机器。
山羊抗小鼠免疫球蛋白抗体是为了能和所有小鼠免疫球蛋白重链和轻链起反应的同类纯化抗体准备的。为了把交叉反应的影响降到最低,相比于其他抗体,山羊抗小鼠免疫球蛋白抗体应优先选择从小鼠免疫球蛋白和血清中提取。标记每个聚合物的标准是每一个免疫球蛋白分子用2-8个荧光团或生物素分子标记。在准备阶段,必须检测样品中有没有非结合的染料,并且把样品在无荧光实验中做检测以确保较低的非特异性染色的可能。
使用说明
1. 在使用前,用微型离心机短暂地分离蛋白质溶液,留取上清液进行实验。这一步除除去了储存中可能形成的蛋白质聚合物,因此减少了非特异性背景染色的可能。
2. 因为在不同的应用条件,染色方法是不同的,所以应该根据经验需要稀释适量的抗体。
3. 对于荧光团和生物素标记抗体, 1-10μg/mL 的终浓度应该适用于大部分的免疫组织化学应用。
4. 对于流式细胞术,1×106个细胞才能等到令人满意的结果。
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ARB12654 大鼠催乳素(PRL)检测服务 Rat prolactin,prl ELISA KIT
F030229 HRP标记兔抗人Ig抗体 Rabbit Anti-Human Ig*HRP
ARB12863 小鼠末端补体复合物C5b-9(TCC C5b-9)elisa检测 Mouse terminal complement complex c5b-9,tcc c5b-9 ELISA KIT
ARB11435 人热休克蛋白糖蛋白96(HSP gp96)代做ELISA实验 Human heat shock protein glycoprotein 96,hsp gp96 ELISA KIT
BL1223 GoldViewⅠ型核酸染色剂(10000×)
PY02-410 YM琼脂 250克
67-68-5 DMSO二甲基亚砜(细胞培养级)
ARB11503 人脂氧素A4(LXA4)酶标法分析 Human lipoxin a4,lxa4 ELISA KIT
ARB14046 猴γ干扰素(IFN-γ)含量测试 Monkey interferon γ ,ifn-γ ELISA KIT
硫*(代"酸")卡那霉素溶液(10mg/ml) Kanamycin 10mg/ml 10ml
BL0873 羊抗鸡IgG免疫血清
BTN120644 聚乙二醇 PEG
BL1396 SABC小鼠/兔IgG-AP kit
BTN131144 山羊抗小鼠IgG(H+L),碱性磷酸酶标记 Goat Anti-Mouse IgG(H+L),AP Conjugate
CBZ-D-天冬*酸 Poly I 78663-07-7
PBS磷酸盐缓冲液(0.01mol/L,pH7.2-7.4) 500ml|5L
偶氮脒类引发剂V40 CIB 2094-98-6
胰激肽原酶 1kb DNA LadderⅡ 9001-01-8
阿拉伯胶水溶液(25%) 100ml
BTN131158 荧光素488标记山羊抗兔IgG Goat Anti-Rabbit IgG ,IF488 Conjugate
北京百莱博科技有限公司专业生产细胞凋亡与增殖产品,欢迎来电咨询选购北京PCNA细胞增殖检测试剂盒(ICF/FACS法)哪里卖。
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文献和实验余种。值得注意的是:该公司2009年6月先后通过甲型H1N1流感病毒RNA检测试剂盒(荧光PCR法)的质量管理体系考核、取得甲型H1N1流感病毒RNA检测试剂盒(荧光PCR法)的注册受理通知书。2009年6月17日国家食品药品监督管理局医疗器械监管司王宝亭司长、王兰明专员光临我公司并对甲型H1N1流感病毒检测试剂盒文号申报工作进行指导。2009年6月首批428套甲型H1N1流感病毒检测试剂盒配发至全国213个流感检测网络实验室PS:今年甲型流感这一试剂的开发和应用,让金豪公司赚得盆满钵满
(50 μg/mL PI, 0.1%柠檬酸钠, 0.1% Triton X-100), 以FACS检测细胞核DNA中亚二倍体的凋亡DNA波峰. 1)冰乙醇固定后无需穿孔? 2)低渗PI染液中Triton用量是多少?有的是100染液中用1%Triton 0.5ml。对吗? 3)配方: 柠檬酸三钠 0.25g Triton-X 100 0.75ml Propidium iodide 0.025g 核糖核酸酶 0.005g 蒸馏水 250ml PI
,导致实验结果出现背景不干净,非特异性条带多等问题。进口品牌国内分装则是个别经销商从厂家买到产品后,再通过稀释、分装、重新贴牌之后卖给客户,这样的抗体虽然价格相对便宜,但质量良莠不齐,批间差异较大。要确保抗体的高质量,我们通常是选择可信赖的品牌,此外,还应注意抗体的供应商渠道是否正规,其供应链物流是否专业。综合这几方面因素,Sigma-Aldrich 都是不错的选择。Sigma-Aldrich 是国内最早实行电子商务的生命科学产品供应商,并以直销为主导,避免了中间流通环节的问题,加上其强大的物流
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