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- 百奥莱博
- BTN130957-RQB
- 北京
- 2025年07月14日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
544
- 英文名：
Cell Lysate RT-PCR Mix
- 保质期：
一年
- 供应商：
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件：
2～8℃
特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
免RNA提取RT-PCR试剂盒(细胞组织裂解物RT-PCR试剂盒)说明书的品牌：百奥莱博，是优质的核酸扩增(PCR)产品，用于生化研究，本产品质量好，且极具价格优势，深为用户称道，了解更多免RNA提取RT-PCR试剂盒(细胞组织裂解物RT-PCR试剂盒)等核酸扩增(PCR)产品请联*(代"系")我司咨询订购。
名称：免RNA提取RT-PCR试剂盒(细胞组织裂解物RT-PCR试剂盒)说明书
英文名：Cell Lysate RT-PCR Mix
编号：BTN130957
品牌：百奥莱博
规格：100次
产地：国产|进口
本产品是一种免RNA提取的RT-PCR的试剂盒，它使用精心优化的细胞裂解液直接裂解培养细胞和痕量组织块，然后直接在细胞裂解液中进行RT，再用cDNA进行PCR或荧光定量PCR。
产品特点：
1. 免RNA提取，从细胞裂解到得到RT-PCR或real-time RT-PCR结果只需3个步骤约3小时，省略了整个RNA提取过程。
2. 灵敏度不低于常规方法(先提总RNA再进行RT-PCR)，不但可以检测到低拷贝的RNA，还可用于检测miRNA。
3. 整合了去除基因组DNA的步骤，只检测RNA，无需担心基因组DNA的污染。
4. 每次只需要10-10000个培养细胞或含相应细胞数的痕量组织(如LCM样品)，验证过的细胞包括Hela、CHO、293、COS-7等，但不能用于U937细胞系。
5. 两步法RT-PCR，后续使用灵活。得到的cDNA既可用于普通PCR，也可用于基于SYBR的荧光定量PCR，也可用于其他定量PCR(如TaqMan)，非常灵活。
6. 有单管操作和多孔板操作两种模式，前者适用于少量样品，后者适用于平行处理大量样品，适用于高通量筛查。
7. 本产品足够100次50μL体系的RT反应和600次30μL体系的PCR反应。
试剂盒组成：
| 成份 | 规格 |
| 细胞裂解液成分一 | 3.8mL |
| 细胞裂解液成分二 | 300μL |
| 细胞裂解液成分三 | 100μL |
| Oligo(dT),0.5ug/uL | 50μL |
| 随机引物,0.2ug/uL | 50μL |
| MMLV逆转录酶(含RI) | 300μL |
| PCR MagicMix3.0 | 9mL |
| RNase-free 水 | 10mL |
| 使用手册 | 1份 |
储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。
免RNA提取RT-PCR试剂盒(细胞组织裂解物RT-PCR试剂盒)说明书极具性价比，此外，我公司正火爆促销以下产品：
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·碘化丙啶(PI)干粉
编号：BTN130863
英文名称：Propidiumodide，Powder
规格：10mg
PI是一种可对DNA染色的细胞核染色试剂，它在嵌入双链DNA后释放红色荧光。常用于细胞凋亡(apoptosis)或细胞坏死(necrosis)的检测，常用于流式细胞仪分析。尽管PI不能通过活细胞膜，但却能穿过破损的细胞膜而对核染色。PI-DNA复合物的激发和发射波长分别为535nm和615nm。
CAS号：25535-16-4
分子式：C27H34I2N4
分子量：668.39
储存条件：低温运输，-20℃干燥避光保存，有效期一年。
·PreScissiom蛋白酶
编号：BTN130876
英文名称：PreScissiom Protease
规格：100U
PreScission蛋白酶是一种由人鼻病毒14型的3C蛋白酶和谷胱甘肽S-转移酶(GST)组成的融合蛋白。这种蛋白酶特异识别短肽Leu-Glu-Val-Leu-Phe-Gln/Gly-Pro中的Gln和Gly残基而进行切割，底物的识别和切割不仅依赖于融合蛋白的一级结构还依赖于融合蛋白的二级和三级结构。它可以特异性的将pGEX-6P系列等载体表达出的带有酶底物识别多肽序列融合蛋白的GST标签进行分离。
储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。
活性定义：在5℃条件下反应16小时，能够切割100μg的GST标签的融合蛋白达90%以上所需的酶量定义为一个活性单位。
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文献和实验获取目的蛋白的思路是行不通的，因为获取的DNA里面会含有非编码区。要表达真核生物的基因并表达出相应的蛋白，只能通过提取其mRNA并RT-PCR这条颇费周折的途径 1．RNA的提取 RNA的提取其实原理很简单：通过变性剂破碎细胞或者组织，然后经过氯仿等有机溶剂抽提RNA，再经过沉淀，洗涤，晾干，最后溶解。但是由于RNA酶无处不在，随时可能将RNA降解，所以实验中有很多地方需要注意，稍有疏忽就会前功尽弃。
RNA提取和RT-PCR 在做Northern等杂交实验、构建cDNA文库、获取能够编码真核生物蛋白的基因、获得RNA病毒基因时，会用到RNA提取和RT-PCR技术。 真核生物的基因组是DNA，为什么不直接从DNA PCR得到我们需要的基因呢？因为真核生物的基因含有大量的非编码区，称为内元（intron），真正编码蛋白的区段是被这些内元隔开的，这些编码区叫做外元（exon）。真核生物的DNA转录成为RNA之后，经过剪切和拼接，去掉这些非编码区，才形成成熟的mRNA，由mRNA再翻译
做RT也做了几次,有成功也有失败,在园子中受益良多,把我自已的一个流程放上来,供大家参考.细胞RT-PCR操作流程实验流程一 、取RNA：1、 处理细胞：（1） 贴壁细胞：先用无菌DEPC水配制的PBS洗细胞两次，弃尽PBS后，直接向培养瓶中加入1ml Trizol，通过溶解细胞，通过移液管分次移出细胞裂解物。当Trizol量不足，可导致RNA中有DNA污染。（2） 悬浮细胞：先用无菌DEPC水配制的PBS洗细胞，通过离心沉淀细胞，在Trizol中移液管反复吹打来裂解细胞，每107细胞
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