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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
487
- 英文名:
One-Stop RNA Electrophoresis Pack
- 保质期:
一年
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
常温
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产供应北京现货一站式RNA电泳套装厂家直销,我公司销*(代"售")全品类的分子生物学试剂,价格优惠,欢迎广大科研工作者垂询订购。
名称:北京现货一站式RNA电泳套装厂家直销
品牌:百奥莱博
英文名:One-Stop RNA Electrophoresis Pack
规格:10次
产地:国产|进口
本品是包括琼脂糖、去离子甲醛、RNA上样液、电泳液等在内的RNA电泳套装,专门用于RNA电泳分析。可以进行至少10次mini变性胶电泳。
产品特点:
1. 即开即用,用户不需要自己进行RNase 灭活、高压灭菌、pH调节等操作。
2.与Northern杂交等后续反应兼容。
产品组成:
| 成分 | 规格 |
| 琼脂糖 | 5g |
| 超纯水 | 250ml |
| 甲醛 | 60ml |
| RNAload(含EB) | 0.5ml |
| RNAep,10× | 100ml |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:常温运输和保存,但收到货后RNAload 需要4℃保存,RNAep,10×一旦打开需要-20℃保存,有效期一年。
使用方法:
注意:所有器皿(三角瓶,电泳槽,枪头等)均需去除RNase。强烈推荐使用本公司的超强无毒的固相RNase 清除剂。
一、配制琼脂糖甲醛变性胶(1.2%,100mL)
1.在三角瓶中加入下列成份:琼脂糖 1.2-1.5g;DEPC水 87mL
2. 将琼脂糖加热融化后,加入10mL 10×RNAep(10×RNAep 就是10×MOPS缓冲液,其瓶子一旦打开,就很容易产生污染细菌,细菌大量繁殖后会释放大量 RNase,所以剩下的10×RNAep 最好-20℃放置)。
3. 待胶冷却至 60℃左右,再加下列成份:甲醛 3.0mL;自备EB(10mg/mL)2-4μL
注意:由于本试剂盒提供的RNAload中含EB,所以也可以不加EB,但效果较差。如果使用自备的其他染料,如SYBR Green I,则不能同时使用其他染料,包括含EB的RNAload,用户需要另购不含EB的RNAload)。
4. 混匀后倒胶,凝固半小时后即可以使用。
二、配制电泳液
5. 将RNAep 用DEPC 水稀释十倍后即成电泳液,所需要的体积根据使用的电泳槽决定。
三、变性RNA样品
6.在一干净的离心管中将5-10μL RNA和15μL RNAload 混合,50-60℃保温10分钟后冰浴5-10分钟,直接上样。注意:每一泳道至多可分析30μg RNA,通常用10-20μg 总RNA进行Northern杂交,可以检测高丰度mRNA(占mRNA 总量的0.1%以上);如待测RNA含量极微,每个泳道需加0.5-3.0μg poly(A)+ RNA。
四、电泳
7.电泳时,将凝胶预电泳5 min(电压为5 V/cm)。随后加样品和分子量对照(如果有的话),以3-4 V/cm的电压电泳,直至染料迁移至胶下游的3/4处。
8.电泳结束后,在300nm 紫外灯下拍照。
五、后续处理
9. 按标准方法进行Northern杂交等后续处理。
使用效果:
图注: 用本产品电泳兔全血总RNA效果图。10μL 总RNA与15μL RNAload 混合后在甲醛琼脂糖变性胶上电泳0.5小时,直接在紫外灯下观察并照相。
疑难解答:
Q:RNA电泳为何最好使用RNAep,不要使用DNA电泳液TAE或TBE?
A:一是因为RNAep 经过去RNase处理,而一般实验室使用的TAE或TBE都没有经过去RNase处理,故极有可能含RNase,使样品RNA 降解。即使要灭活TAE或TBE中的RNase 也十分麻烦,因为DEPC 不能处理含Tirs的缓冲液;二是TEB含有硼*(代"酸"),硼*(代"酸")是研究多羟基醇和糖的经典试剂,它能与RNA中含多羟基的核糖反应生成糖硼*(代"酸")络合物,故电泳时RNA 带型十分弥散。在一定浓度范围内,RNA分子间还能通过硼*(代"酸")形成分子间复合物,出现电泳时各种RNA以一条带的形式出现的现象。所以RNA电泳时要避免使用含硼*(代"酸")的缓冲液。使用TAE效果虽然比TBE 稍好,但文献报道(BioTechniques 2000,28:414-415),它不能分离某些大小不同的RNA分子。
Q:上样孔里的红色荧光物一定是污染的基因组DNA 吗?
A:不是。用TAE或TBE电泳液和非变性胶电泳RNA时容易产生此现象,初步研究发现大部分红色荧光物是变性不充分的单链RNA通过碱基互补或通过硼*(代"酸")络合(如果使用TBE作电泳液的话)形成的复合物,加RNase处理后,这些红色荧光物一般会消失。为避免此现象,建议最好使用甲醛变性胶电泳。如果需要使用非变性胶,也必须在上样前使RNA变性。
使用百奥莱博优化的上样/变性/染色三用溶液RNAload可以使RNA在非变性胶上电泳时也有较好分辨率。使用非变性胶时,可以使用TAE或超快电泳液SuperBuffer-2,最好不要使用TBE缓冲液,因为TBE中的硼*(代"酸")能与RNA的多羟基形成复合物,RNA 很难形成锐利的条带。
Q:如何确认和去处除污染的基因组DNA?
A:如果怀疑有DNA污染,可以用RNase处理RNA样品,然后再电泳。如果上样孔里的红色荧光物不消失,则表示是基因组DNA污染。进一步确认可以使用PCR扩增法。去除污染的DNA可以使用非酶的DNA去除剂DNAScavenger或RNase-free DNase,由于RNase-free DNase一般都有残留的RNase污染,所以必须严格按照厂家提供的使用手册进行操作。
Q:为何我的植物RNA样品有4-5 条带?
A:部分植物组织有叶绿体等质体,而叶绿体有核糖体,所以也有其rRNA。
叶绿体的rRNA跟细胞浆里面核糖体的rRNA大小不同,所以一般会多出两条带(共4 条rRNA 条带)。小的tRNA和5S rRNA 有时可见,有时不可见,取决于回收效率。
关于北京现货一站式RNA电泳套装厂家直销的更详细说明,请致电我公司咨询,我们将以最饱满的热情为您提供解答,此外,我公司专业供应下列产品:
·T7核酸内切酶I
编号:BTN130635
英文名称:T7 Endonuclease Ⅰ
规格:250U
T7核酸内切酶I识别并切割不完全配对DNA、十字型结构DNA、Holliday结构或交叉DNA、异源双链DNA或者以更慢的速度切割含切刻的双链DNA。该酶切割错配碱基5´端的第一、第二或第三个磷酸二酯键。其反应原理图如下:
产品用途:
1.识别错配DNA。
2.分解四方向交叉DNA或分支DNA。
3.检测或切割异源二聚体DNA和切刻DNA。
4.随机切割线性DNA进行shot-gun克隆。
产品组成:
| 成分 | 规格 |
| T7 核酸内切酶I,10000U/mL | 25μl |
| 10×反应缓冲液 | 1.25ml |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
活性定义:1单位指在 50μL反应体系,37℃条件下,1小时将90%以上的1μg超螺旋十字型结构的pUC(AT)转化成90%以上的线性结构所需要的酶量。
* pUC(AT)来自 pUC19,在其 EcoRI和PstI 位点之间的多克隆位点处有修改。
实验步骤举例(使用T7核酸内切酶I消化PCR产物确定基因打靶效率):
1.在一个塑料离心管中,按次序加入下列成分:
| 成分 | 加入量 |
| PCR产物 | 200ng |
| 10×反应缓冲液 | 2μl |
| 超纯水 | 补水到19μl |
2.取上步溶液,在PCR 仪内进行如下操作:
| 步骤 | 温度 | 时间 |
| 初步变性 | 95℃ | 5min |
| Annealing | 95-85℃ | -2℃/second |
| 85-25℃ | -0.1℃/second | |
| Hold | 4℃ |
3.添加T7核酸内切酶I至退火后的PCR产物(20μL体系):
| 成分 | 加入量 |
| PCR产物 | 19μl |
| T7 核酸内切酶I | 1μl |
4.37℃保温15分钟。
5.添加1.5μL 0.25M EDTA终止反应。
备注:
T7核酸内切酶I是一种具有底物结构选择性的酶。该酶以不同的活性作用于不同的DNA底物。切割特定底物时,必须控制酶量和反应时间。反应温度超过42℃时,会增加非特异性核酸酶活性。
北京现货一站式RNA电泳套装厂家直销关键词:一站式RNA电泳套装,One-Stop RNA Electrophoresis Pack,BTN60904
BL0955 胶体金标记兔抗山羊IgG抗体
ARB11317 人促睡眠肽(DSIP)ELISA代测服务 Human delta sleep-inducing Peptide,dsip ELISA KIT
ARB12814 小鼠乙型肝炎核心抗体(HBcAb)Elisa定量检测 Mouse hepatitis b virus core antibody,hbcab ELISA KIT
*铂酸铵 Calcium hypophosphite 16919-58-7
6-**并三氮唑-1,1,3,3-四甲基脲六*磷酸酯 DMB 330645-87-9
亲和硅烷 Xylanase
淀粉酶水溶液(1%,pH5.3) 100ml
D-地衣酸 Phenosafranine 7562-61-0
尿素 Inositol 57-13-6
BTN51207 Pfu DNA聚合酶 Pfu DNA Polymerase
ARB11984 大鼠GATA结合蛋白4(GATA4)Elisa分析 Rat gata binding protein 4,gata4 ELISA KIT
β-丙内酯 IPC-TBA-HS 57-57-8
北京现货一站式RNA电泳套装厂家直销关键词:一站式RNA电泳套装,One-Stop RNA Electrophoresis Pack,BTN60904
·酵母生产及产孢培养基
编号:BTN130901
英文名称:Growth and Sporulation Medium
规格:250mL
本产品由1% KOAc、2%琼脂、0.1%酵母提取物、0.05%葡萄糖组成,用于酵母营养生长3-5天后再产孢。如果二倍体细胞是营养缺陷性,则还需要补充加入营养成分。
储存条件:常温运输及保存,有效期两年。
·脱脂奶粉
编号:BTN130907
英文名称:Non-fat Milk
规格:50g
本产品为分子生物学级脱脂奶粉,可广泛用于Southern、Northern和Western印迹杂交实验的封闭试验。
储存条件:常温运输和保存、有效期半年。
·dGTP溶液(2.5mM)
编号:BTN130914
英文名称:dGTP Solution(2.5mM)
规格:2mL
dGTP分子式为C10H13N5O13P3Na3,分子量是507.2,消光系数为13.7×103 M-1×cm-1(pH7.0)。λmax为253nm。
储存条件:低温运输和-20℃保存、有效期一年。
我公司强烈推荐核酸电泳和回收系列产品,热情期待您的咨询选购北京现货一站式RNA电泳套装厂家直销。
风险提示:丁香通仅作为第三方平台,为商家信息发布提供平台空间。用户咨询产品时请注意保护个人信息及财产安全,合理判断,谨慎选购商品,商家和用户对交易行为负责。对于医疗器械类产品,请先查证核实企业经营资质和医疗器械产品注册证情况。
文献和实验: 用植物总RNA提取液套装从桑叶和土豆块茎中提取RNA。 实验材料: 桑树叶片、土豆块茎,研钵,植物总RNA提取液套装(Simgen Cat. No.5123100) 超微量电子天平(DENVER INSTRUMENT,TP-213) 旋涡震荡器(越新仪器,XH-C) 台式离心机(eppendorf Centrifuge 5415 D) 超微量分光光度计(Simgen Cat.No.sim100) 电泳仪(北京六一仪器厂,DYY-6C型 ) 土豆内参引物(F:ATTGGAAACGGATATGCTCCA
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