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- 详细信息
- 文献和实验
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- 库存:
379
- 英文名:
Human Methylated/Non-methylated DNA Standard
- 保质期:
一年
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
常温运输、-20℃
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产销*(代"售")BTN100936型人甲基化/非甲基化DNA标准品厂家,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:BTN100936型人甲基化/非甲基化DNA标准品厂家
产地:国产|进口
编号:BTN100936
英文名:Human Methylated/Non-methylated DNA Standard
规格:100次
品牌:百奥莱博
甲基化专一PCR必须要使用甲基化的DNA做修饰和PCR的阳性对照,用非甲基化的DNA做修饰和PCR的阴性对照,否则无法判断样品是否甲基化。本产品通过nested WGA方法用人血液DNA 制备而得,主要用于检测和优化设计的甲基化引物。产品即开即用,非常方便。
产品组成:
| 成分 | 规格 |
| 人甲基化DNA(10ng/μL) | 100μl |
| 人非甲基化DNA(10ng/μL) | 100μl |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:常温运输、-20℃保存、有效期一年。
自备试剂:超纯水、甲基化PCR引物。
使用方法:
取10-100ng 本产品作为甲基化PCR的模板。PCR 参数由客户根据引物,PCR区域长度等因素决定。
甲基化专一性PCR 条件(仅供参考)
| 成分 | 体积 |
| PCR MagicMix 2.0 | 15μl |
| 模板DNA(10ng/uL)(甲基化或非甲基化DNA) | 1-10μl |
| 自备甲基化PCR引物一 | 0.2-0.5μM(需优化) |
| 自备甲基化PCR引物二 | 0.2-0.5μM(需优化) |
| 超纯水 | 补水到30μL |
PCR 参数需要用户自己根据引物和PCR产物的长度决定。
关于BTN100936型人甲基化/非甲基化DNA标准品厂家的更详细说明,请致电我公司咨询,我们将以最饱满的热情为您提供解答,此外,我公司专业供应下列产品:
103-47-9 2-(环己*(代"胺")基)乙*(代"烷")磺酸 CHES
*基琼脂糖凝胶4B Veratryl alcohol
ARB10929 人吡哆醛/吡哆醇维生素B6磷酸酶(PDXP)Elisa定量检测 Human pyridoxal/pyridoxine vitamin b6-phosphatase,pdxp ELISA KIT
二甲*酚蓝指示剂 100ml
O-(内-二环[2,2,1]庚-5-稀-2,3-二甲酰亚胺)-N,N,N",N"-四甲基六*磷酸盐 Chromotropic acid disodiu*(代"m") salt dihydrate 208462-94-6
CBZ-L-谷*酰胺 DEAE Sephadex A-25 2650-64-8
HC0171 芦荟无粉乳胶手套
BL0888 兔抗鸡IgG免疫血清 0.5ml
ARB11439 人真胰岛素(TI)代做ELISA实验 Human true insulin,ti ELISA KIT
ARB13339 牛I型胶原(Col I)Elisa方法检测 Bovine collagen type i,col i ELISA KIT
ARB13951 猪总胆固醇(TC)Elisa分析 Porcine total cholesterol,tc ELISA KIT
BTN130421 DEAE交换介质 DEAE Medium
硫代乙醇酸* D-Tryptophanol 367-51-1
BTN100936型人甲基化/非甲基化DNA标准品厂家关键词:Human Methylated/Non-methylated DNA Standard,人甲基化/非甲基化DNA标准品,BTN100936
·白色念球菌RNA提取试剂盒
编号:BTN130846
英文名称:Candida albicans RNA extraction kit
规格:50次
·动物线粒体总蛋白提取试剂盒
编号:BTN130891
英文名称:Animal mitochondrial Total Protein Extraction Kit
规格:50次
·20% PVP K30溶液(DNA级)
编号:BTN100865
英文名称:Animal mitochondrial Total Protein Extraction Kit
规格:250mL
·甲酰胺嘧啶-DNA糖基化酶(FPG)
编号:BTN130644
英文名称:Formamidopyrimidine DNA Glycosylase
规格:500U
Fpg(甲酰胺嘧啶[fapy]-DNA糖基化酶)也称作8-氧代鸟嘌呤DNA糖基化酶(OGG),既有N-端糖基化酶活性也有AP-裂解酶活性。N-端糖基化酶活性可以切下双链DNA上受损的嘌呤碱基,产生一个脱嘌呤(AP)位点。AP-裂解酶活性可以切割AP位点的3´或5´端,因此可以除去AP位点,产生一个具有3´和5´磷酸的碱基缺口。被Fpg识别并切除的受损碱基包括:7,8-二羟基-8-氧代鸟嘌呤(8-氧代鸟嘌呤)、8-羟基腺嘌呤、fapy-鸟嘌呤、甲基-fapy-鸟嘌呤、fapy-腺嘌呤、黄曲霉毒素B1-fapy-鸟嘌呤、5-羟基-胞嘧啶和5-羟基尿嘧啶。
产品特点:
1.单细胞凝胶电泳(彗星试验),彗星试验的推荐稀释倍数,1:10³~10⁴;
2.碱性析出;
3.碱解旋;
4.修饰的切刻平移技术。
产品组成:
| 成份 | 规格 |
| Fpg(8000U/mL) | 62.5μL |
| 10×Buffer | 1mL |
| 使用手册 | 1份 |
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
活性定义:1单位指在10μl反应体系中,37℃ 1小时,能够切割1pmol含单个与胞嘧啶配对的8-氧代鸟嘌呤的34bp寡核苷酸双链所需要的酶量。
BTN100936型人甲基化/非甲基化DNA标准品厂家关键词:Human Methylated/Non-methylated DNA Standard,人甲基化/非甲基化DNA标准品,BTN100936
·柱式酵母质粒DNA提取试剂盒
编号:BTN70202
英文名称:Yeast plasmid DNA column extraction kit
规格:50次
本试剂盒是专门用于提取酵母质粒DNA的产品(不适用于酵母dsRNA质粒)。本产品根据酵母细胞壁十分坚硬的特点,在细菌质粒碱裂解法的基础上,增加了高效裂解酵母细胞壁的预处理步骤,可在1小时左右得到可以用于PCR或转化酵母质粒DNA。
试剂盒特点:
1.快速,整个过程只需要一个小时左右,可同时处理多个样品。
2. 得到的酵母质粒DNA 纯度高,可直接用于转化和PCR等实验。
3.可以从平板上的菌斑或液体培养的酵母中抽提质粒DNA。
4. 安全,不需使用玻璃珠、酚、*仿等试剂。
5. 每5-10mL 酵母培养液一般可以提取到1μg左右的高拷贝酵母质粒DNA。
6. 即开即用,经济实惠,客户自己不需要准备额外的试剂。
试剂盒组成:
| 成分 | 规格 |
| 溶液A | 30ml |
| 溶液B | 13ml |
| 溶液C | 13ml |
| 溶液D | 18ml |
| 破壁酶 | 50mg |
| RNase A溶液10mg/mL) | 0.15ml |
| 离心吸附柱 | 50套 |
| 通用洗柱液 | 50ml |
| DNA洗脱液2.0 | 10ml |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:常温运输及保存(RNase A溶液4℃保存),有效期一年。
使用方法:
1. 将5-10mL 酵母过夜液体培养物分多次转移到1.5mL塑料离心管中。每转移一次后,需要12000~15000×g室温离心1分钟,然后吸弃液体培养基。注意:不要使用培养时间超过16小时的酵母液体培养物,否则质粒DNA产量偏低;也不要使用超过10mL的酵母液体培养物,否则破壁不充分,降低质粒DNA产量。
2. 加入1mL自备的无菌水,充分震荡混匀,12000~15000×g室温离心1分钟,吸弃上清。
3. 加入600μl溶液A,充分震荡细胞沉淀重悬,95℃保温10分钟。
4. 12000~15000×g室温离心1分钟,弃上清液。
5. 加入250μl含破壁酶的溶液B(配制方法是将本试剂盒提供的50mg 粉末状的破壁酶和0.15mL RNase A溶液全部加入到装有13mL溶液B的塑料瓶中,轻柔摇晃混匀后使用。未用完的部分需要分装成小份然后放-20℃保存,否则破壁酶很容易失去活性),吹打混匀。
6. 37℃保温30分钟,延长保温时间到60分钟有利于细胞壁的裂解。注意:放置较长时间后,溶液B中的裂壁酶会逐渐失活,额外再加入一些裂壁酶(如蜗牛酶、Lyticase、Zymolyase、Lywallzyme等,总浓度为1mg/mL)可以极大提高产量。
7. 将离心管放冰浴冷却后,加入250μl溶液C,轻轻颠倒混匀直至裂解液变得澄清,然后室温放置5-10分钟。注意:不要剧烈震荡,否则基因组DNA 将断裂并污染质粒DNA。
8. 加入350μl溶液D,轻轻颠倒混匀几次,管内将出现白色沉淀物,然后冰浴放置10-30分钟(如果质粒较长,最好放置30分钟)。
9. 12000~15000×g室温离心6-10分钟,将上清液转移到离心吸附柱中。
注意:不要将漂浮在液面的沉淀物(如果有的话)转移到离心吸附柱中。上清液可以分多次转移。
10.室温下放置至少2分钟以让质粒DNA 充分结合到离心吸附柱上。
11.12000~15000×g室温离心1分钟,弃穿透液。
12. 将500μl 通用洗柱液加入离心吸附柱中,12000~15000×g室温离心1分钟,弃穿透液。
13. 重复上步操作一次。
14.12000~15000×g室温离心1分钟去除离心吸附柱中残留液体。不要此步省略,否则残留洗液将影响后续的电泳、PCR和转化实验。
15. 将离心吸附柱套在一干净的1.5mL塑料离心管中,加入30-100μl DNA 洗脱液2.0(加入的量取决于预期的DNA浓度)至离心吸附柱的膜的中央。
16.室温下放置至少2分钟。
17.12000~15000×g室温离心1分钟以洗脱DNA。
18. 如有必要,可以再加入适量DNA 洗脱液2.0洗出残留的DNA。第二次洗脱得到的DNA的产量约为第一次的30-50%。不要将已经洗脱的、含DNA的溶液再加上去。
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Real-time qPCR 手册——手把手教你从菜鸟到高手
稀释 Slope ~ -3.3 R2 > 0.99 精密度 至少 3 个重复 标准差 除了这些因素,还必须评估和验证合适的实验对照(如无模板对照,无 反转录酶对照等)以及模板质量。 3. Real-time qPCR 定量方法 可以分绝对定量和相对定量。绝对定量是用一系列已知浓度的标准品制作标准曲线,在相同的条件下目的基因测得的荧光信号量同标准曲线进行比较,从而得到目的基因的量。该标准品可以是纯化的质粒 DNA,体外转录的 RNA,或者是体外合成的 ssDNA。相对定量可以分比较 Ct 法
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