miRNA marker(miRNA电泳分子量标准)批发

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

百奥莱博专业生产销*(代"售")miRNA marker(miRNA电泳分子量标准)批发，我公司供应的分子生物学试剂品类齐全，且具有优势价格，欢迎新老客户垂询订购。

名称：miRNA marker(miRNA电泳分子量标准)批发
规格：30次
编号：BTN70605
英文名：miRNA Ladder
产地：国产|进口
品牌：百奥莱博
尿素-聚丙*(代"烯")酰胺凝胶电泳(Urea-PAGE)是目前分离100nt以下的小片段RNA分子，尤其是20nt左右的microRNA(miRNA)分子的主要方法，但是目前作为miRNA电泳的分子量对照产品还很少，为此百奥莱博开发了本产品。

产品特点：
1. 范围在15-50nt，尤其适合于长度在20nt左右的miRNA的分子长度初步确定。
2.产品是单链DNA，变性胶上泳动行为类似于单链的RNA，但比RNA 更稳定。

储存条件：低温运输，-20℃保存，保存期为一年。

使用方法：
1. 将5μL 本产品与15μl 10M的尿素溶液(自备)或5μL miRNAload电泳上样液混合后直接上样。也可以使用样品所用的其它上样液。
2.电泳后用0.5μg/mL的EB溶液染色半小时后即可在UV下观察。

使用效果：

图注: 用5μL本产品在浓度为15%的PAGE(含7M尿素)上电泳(用1×TEB缓冲液),最后用0.5μg/mL的EB溶液染色。

我公司的miRNA marker(miRNA电泳分子量标准)批发，性价比高，货期短，送货上门，欢迎您来电咨询购买，另外，我公司还生产供应销*(代"售")下列产品：
ARB13789 豚鼠白介素6(IL-6)elisa检测说明书 Guinea pig interleukin 6,IL-6 ELISA KIT
DL-邻**甘*酸 Bafilomycin A1 from Streptomyces griseus 141196-64-7
BL1178 增强型DAB显色试剂盒(20×)
抗酒石酸酸性磷酸酶染色液   4×10ml|4×20ml
ARB10865 人抗核仁纤维蛋白抗体(AFA/snoRNP/U3RNP)酶标法分析 Human anti-fibrillarin antibody,afa/snornp/u3rnp ELISA KIT
ARB10336 人水通道蛋白3(AQP-3)含量测试 Human aquaporin 3,aqp-3 ELISA KIT
丽春红染色液   100ml
C0401 标准新生牛血清(无菌过滤) 100ml/200ml/500ml/500ml*20瓶
PY08-068  改良马丁培养基 225ml  20瓶/箱，用于生物制品霉菌检验
50-76-*(代"0") 放线菌*(代"素")D Actinomycin D
L-脯*酸 Beryllon I 147-85-3
ARB13237 小鼠蛋白*(代"磷")酸酶(PP)免费代测 Mouse protein phosphatase,pp ELISA KIT
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·柱式酵母质粒DNA提取试剂盒
编号：BTN70202
英文名称：Yeast plasmid DNA column extraction kit
规格：50次
本试剂盒是专门用于提取酵母质粒DNA的产品(不适用于酵母dsRNA质粒)。本产品根据酵母细胞壁十分坚硬的特点，在细菌质粒碱裂解法的基础上，增加了高效裂解酵母细胞壁的预处理步骤，可在1小时左右得到可以用于PCR或转化酵母质粒DNA。

试剂盒特点：
1.快速，整个过程只需要一个小时左右，可同时处理多个样品。
2. 得到的酵母质粒DNA 纯度高，可直接用于转化和PCR等实验。
3.可以从平板上的菌斑或液体培养的酵母中抽提质粒DNA。
4. 安全，不需使用玻璃珠、酚、*仿等试剂。
5. 每5-10mL 酵母培养液一般可以提取到1μg左右的高拷贝酵母质粒DNA。
6. 即开即用，经济实惠，客户自己不需要准备额外的试剂。

试剂盒组成：

 

成分	规格
溶液A	30ml
溶液B	13ml
溶液C	13ml
溶液D	18ml
破壁酶	50mg
RNase A溶液10mg/mL)	0.15ml
离心吸附柱	50套
通用洗柱液	50ml
DNA洗脱液2.0	10ml
说明书	1份

储存条件：常温运输及保存(RNase A溶液4℃保存)，有效期一年。

使用方法：
1. 将5-10mL 酵母过夜液体培养物分多次转移到1.5mL塑料离心管中。每转移一次后，需要12000～15000×g室温离心1分钟，然后吸弃液体培养基。注意：不要使用培养时间超过16小时的酵母液体培养物，否则质粒DNA产量偏低；也不要使用超过10mL的酵母液体培养物，否则破壁不充分，降低质粒DNA产量。
2. 加入1mL自备的无菌水，充分震荡混匀，12000～15000×g室温离心1分钟，吸弃上清。
3. 加入600μl溶液A，充分震荡细胞沉淀重悬，95℃保温10分钟。
4. 12000～15000×g室温离心1分钟，弃上清液。
5. 加入250μl含破壁酶的溶液B(配制方法是将本试剂盒提供的50mg 粉末状的破壁酶和0.15mL RNase A溶液全部加入到装有13mL溶液B的塑料瓶中，轻柔摇晃混匀后使用。未用完的部分需要分装成小份然后放-20℃保存，否则破壁酶很容易失去活性)，吹打混匀。
6. 37℃保温30分钟，延长保温时间到60分钟有利于细胞壁的裂解。注意：放置较长时间后，溶液B中的裂壁酶会逐渐失活，额外再加入一些裂壁酶(如蜗牛酶、Lyticase、Zymolyase、Lywallzyme等，总浓度为1mg/mL)可以极大提高产量。
7. 将离心管放冰浴冷却后，加入250μl溶液C，轻轻颠倒混匀直至裂解液变得澄清，然后室温放置5-10分钟。注意：不要剧烈震荡，否则基因组DNA 将断裂并污染质粒DNA。
8. 加入350μl溶液D，轻轻颠倒混匀几次，管内将出现白色沉淀物，然后冰浴放置10-30分钟(如果质粒较长，最好放置30分钟)。
9. 12000～15000×g室温离心6-10分钟，将上清液转移到离心吸附柱中。
 注意：不要将漂浮在液面的沉淀物(如果有的话)转移到离心吸附柱中。上清液可以分多次转移。
10.室温下放置至少2分钟以让质粒DNA 充分结合到离心吸附柱上。
11.12000～15000×g室温离心1分钟，弃穿透液。
12. 将500μl 通用洗柱液加入离心吸附柱中，12000～15000×g室温离心1分钟，弃穿透液。
13. 重复上步操作一次。
14.12000～15000×g室温离心1分钟去除离心吸附柱中残留液体。不要此步省略，否则残留洗液将影响后续的电泳、PCR和转化实验。
15. 将离心吸附柱套在一干净的1.5mL塑料离心管中，加入30-100μl DNA 洗脱液2.0(加入的量取决于预期的DNA浓度)至离心吸附柱的膜的中央。
16.室温下放置至少2分钟。
17.12000～15000×g室温离心1分钟以洗脱DNA。
18. 如有必要，可以再加入适量DNA 洗脱液2.0洗出残留的DNA。第二次洗脱得到的DNA的产量约为第一次的30-50%。不要将已经洗脱的、含DNA的溶液再加上去。


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·大肠杆菌Rosetta-gami (DE3)pLys化学感受态细胞
编号：BTN130560
英文名称：E.coli Rosetta-gami (DE3)pLys Chemical Competent Cell
规格：0.1mL*10
 Rosetta-gami(DE3)pLysS是Rosetta-gami(DE3)的的衍生菌株，用于具有毒性的含二硫键真核蛋白的表达。它是高度严紧表达宿主菌，包括Tunerlac 透性酶突变以及gor B/gor突变帮助细胞质内二硫键形成。

基因型：Δ(ara–leu)7697 Δ lac X74 Δ phoA PvuII phoR araD139 ahpC galE galK rpsL F"[lac+lacIq pro](DE3)gor522::Tn10(TcR)gorB::kan plysS pRARE(CmR)

储存条件：干冰运输、-80℃保存，有效期半年。

自备试剂：目的DNA、SOC或LB培养基等。

使用方法：
1. 取感受态细胞置于冰浴中。一次转化感受态细胞的建议用量为50-100μL，可以根据实际情况分装使用。
以下实验以50μL感受态细胞为例。
2. 待感受态细胞融化后，向感受态细胞悬液中加入目的DNA(根据实际情况加入适量的DNA，通常100μl感受态细胞能够被1 ng超螺旋质粒DNA所饱和)，用移液器轻轻吹打混匀，冰浴30分钟。
3. 42℃热击45秒，迅速将离心管转移到冰浴中，冰上静置2-3分钟。
4. 每个离心管中加入450μl 无菌的SOC或LB培养基(不含抗生素)，混匀后置于37℃摇床，150rpm 振荡培养45分钟使菌体复苏。
5. 根据实验需求，取适量已转化的感受态细胞，加到含相应抗生素的SOC或LB 固体琼脂培养基上，用无菌的涂布棒将细胞均匀涂开，将平板置于37℃直至液体被吸收，倒置培养，37℃培养12-16小时。

注意事项：
1. 涂布用量可根据具体实验调整。若转化的DNA 总量较多，可取少量转化产物涂布平板；若转化的DNA 总量较少，可取200-300μl转化产物涂布平板。若预计的克隆数较少，可通过离心(4,000rpm，2分钟)后吸除部分培养液，悬浮菌体后将其涂布于平板中。
2. 新制备的固体培养基不易涂干，可将平板正置于37℃直至液体被吸收后再倒置培养。
3. 涂布剩余的菌液可置于4℃保存，如果次日的转化菌落数过少，可以将剩下的菌液再涂布新培养基进行培养。

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