BTN90602I型DNA marker(φX174 DNA

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BTN90602I型DNA marker(φX174 DNA/Hinc II)哪里卖是高品质的核酸电泳和回收产品，由北京百奥莱博供应，用于科研目的生化试验项目，本产品质量好，且极具价格优势，深为用户称道，了解更多DNA marker(φX174 DNA/Hinc II)等核酸电泳和回收产品请联*(代"系")我司咨询订购。

名称：BTN90602I型DNA marker(φX174 DNA/Hinc II)哪里卖
编号：BTN90602I
品牌：百奥莱博
产地：国产|进口
规格：50次
 本系列产品为传统的酶切分子量标准，由单一的质粒DNA或噬菌体DNA经单个限制性内切酶完成消化后，加热灭活而成。每次上样总DNA含量已知，每条带的含量可根据其摩尔数的比值计算出来。本系列产品成分中已经含有上样缓冲液，所以可以直接上样电泳。得到的电泳条带长度准确，明亮清晰，背景较低，稳定性很好。
 每次加样量为5μL，可用于相对定量。本系列产品与各种琼脂糖和各种电泳缓冲液兼容。

储存条件：低温运输、-20℃保存，有效期一年。

使用方法：直接上样电泳，每次加样量为5uL。

使用效果：


疑难解答：
a)如对带型要求较高，建议使用0.8-1.5%琼脂糖凝胶(对SuperBuffer-2缓冲液，电压为250-400V)或1.5-2.0%琼脂糖凝胶(对TAE或TBE缓冲液，电压为80V)，同时适当延长电泳时间。
b)电泳图象的质量与琼脂糖、电泳缓冲液有关。请采用高质量的琼脂糖，同时要经常更换电泳缓冲液。

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·T7核酸内切酶I
编号：BTN130635
英文名称：T7 Endonuclease Ⅰ
规格：250U
T7核酸内切酶I识别并切割不完全配对DNA、十字型结构DNA、Holliday结构或交叉DNA、异源双链DNA或者以更慢的速度切割含切刻的双链DNA。该酶切割错配碱基5´端的第一、第二或第三个磷酸二酯键。其反应原理图如下：


产品用途：
1．识别错配DNA。
2．分解四方向交叉DNA或分支DNA。
3．检测或切割异源二聚体DNA和切刻DNA。
4．随机切割线性DNA进行shot-gun克隆。

产品组成：

 

成分	规格
T7 核酸内切酶I，10000U/mL	25μl
10×反应缓冲液	1.25ml
说明书	1份

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

活性定义：1单位指在 50μL反应体系，37℃条件下，1小时将90%以上的1μg超螺旋十字型结构的pUC(AT)转化成90%以上的线性结构所需要的酶量。
* pUC(AT)来自 pUC19，在其 EcoRI和PstI 位点之间的多克隆位点处有修改。

实验步骤举例(使用T7核酸内切酶I消化PCR产物确定基因打靶效率)：
1．在一个塑料离心管中，按次序加入下列成分：

成分	加入量
PCR产物	200ng
10×反应缓冲液	2μl
超纯水	补水到19μl

2．取上步溶液，在PCR 仪内进行如下操作：

步骤	温度	时间
初步变性	95℃	5min
Annealing	95-85℃	-2℃/second
	85-25℃	-0.1℃/second
Hold	4℃

3．添加T7核酸内切酶I至退火后的PCR产物(20μL体系)：

成分	加入量
PCR产物	19μl
T7 核酸内切酶I	1μl

4．37℃保温15分钟。
5．添加1.5μL 0.25M EDTA终止反应。

备注：
T7核酸内切酶I是一种具有底物结构选择性的酶。该酶以不同的活性作用于不同的DNA底物。切割特定底物时，必须控制酶量和反应时间。反应温度超过42℃时，会增加非特异性核酸酶活性。


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