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- 详细信息
- 技术资料
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 库存:
448
- 英文名:
SuperOptimal Broth,Powder
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京现货SOB培养基厂家直销的品牌:百奥莱博,是优质的干粉培养基产品,用于生化科学研究,本产品质量好,且极具价格优势,深为用户称道,了解更多SOB培养基等干粉培养基产品请联*(代"系")我司咨询订购。
名称:北京现货SOB培养基厂家直销
规格:250g
编号:BTN100813
产地:国产|进口
英文名:SuperOptimal Broth,Powder
SOB培养基是由美国科学家Hanahan在1983年在LB培养基的基础上开发的培养基,专门用于复苏电转化或化学转化的E.coli感受态细胞以提高转化效率。配制一升液体培养基需要25g本产品。
储存条件:常温运输及保存,有效期两年。
想要了解更多关于北京现货SOB培养基厂家直销的价格、品牌、厂家、说明书、促销信息,请和我们联*(代"系")。此外我公司还销*(代"售")下面的产品:
·土壤微生物RNA提取试剂盒
编号:BTN90704
英文名称:Soil microbe RNA extraction kit
规格:50次
由于土壤中有机质含量丰富,尤其是其中的腐殖酸对 RT-PCR等后续反应有极大的抑制作用,所以从土壤微生物提取高纯度的RNA一直是十分棘手的问题。本试剂盒就是为解决相关问题而研发设计的。
试剂盒特点:
1. 操作简单快速,处理一个样品只需要约十几分钟。
2. 去污染效果好,RNA 纯度更高,平均 OD260/280一般都在 2.0左右。
3. 得到的RNA可直接用于RT-PCR、Northern杂交、cDNA 合成等实验。
4. 性价比高于进口的土壤 RNA提取产品。
5. 试剂无毒无害,环保。
试剂盒组成:
| 成分 | A型 |
| 溶液A | 50ml |
| 溶液B | 15ml |
| 溶液C | 25ml |
| 溶液D | 25ml |
| RNA溶解液 | 10ml |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:常温运输,4℃保存,有效期一年。
使用方法:
1. 称取 0.1-0.5 g的土壤,加入1mL溶液A,震荡器上剧烈震荡 5-10分钟。
注意:一定要让管底的土壤震荡起来。注意:溶解溶液A沉淀。溶液A在 4℃ 放置后可能会产生沉淀,使用前必须放在 65℃水浴使沉淀彻底溶解并充分摇 匀后再取用。
2. 稍微静置后将上清液转移至一个干净的1.5mL塑料离心管中。
3.在离心管中加入0.3mL的溶液B和0.2mL自备*仿,在振荡器上振荡 30秒混匀。振荡器振荡时必须使管底溶液震荡起来。
4.室温 12000rpm离心 3~5分钟。
5. 将上清液(约0.6mL)转移到另一干净的1.5mL塑料离心管中,下层有机相和中间层含有DNA、蛋白质和其他杂质,避免触及或吸取。最好留下 100μl上清液不取。
6.在上清液中加入0.5mL的溶液C和0.2mL的自备*仿,用手上下颠倒或振 荡器振荡 30秒混匀,此时溶液呈均匀的乳浊状。振荡器振荡时必须使管底溶液震荡起来。
7.室温 12000rpm离心 3分钟,两相间将有白色膜状物(蛋白质)形成。
8. 将上清液(约1mL)转移到另一干净的1.5mL塑料离心管中,避免触及或吸取有机相及其上面的白色膜状物。
9.在上清液中加入0.5倍体积的溶液D,用手上下颠倒或振荡器振荡 30秒混匀,此时溶液呈白色浑浊状。振荡器振荡时必须使管底溶液震荡起来。
10. 13000-15000g室温离心 5-30分钟,小心移弃上清液,避免触及管底大量的白色 RNA沉淀。
11.在离心管中加入1mL 75%乙醇,振荡器上振荡混均 30秒。室温离心13000-15000g 1分钟,RNA 此时在管底形成细小沉淀。小心吸弃上清液,注意不要吸弃 RNA沉淀。
12. 重复第 11 步的75%乙醇清洗步骤一次。
13. 短暂快速离心数秒使管壁上残留液体沉到管底(约50μl),用移液枪小心吸弃,注意不要吸弃沉淀。此步十分重要,因为残留的乙醇会影响后续反应。
14.室温短暂放置 2分钟,立即加入适量(一般为10-30μl)RNA 溶解液使 RNA沉淀溶解。注意:千万不要用真空离心法使 RNA沉淀过于干燥,否则 RNA 将变得十分难溶。RNA样品可以直接使用,也可以存放于-80℃长期保存。
15. RNA 完整性的电泳检测:如果需要做 Northern杂交,强烈建议用户使用甲醛变性胶进行 RNA电泳 ,因为非变性胶不能分离所有的RNA分子(BioTechniques,28:414,2000)。
16. RNA产量产率测定:将5-10μl RNA 溶于TE缓冲液中(pH7.5-8.2 之间)检测其在 OD260的光吸收。通过光吸收可以得出 RNA浓度(1 OD260的RNA=40μg/mL),进而计算出 RNA的产量(浓度 X 体积)和产率(RNA产量/组织用量)。
17. RNA 纯度测定:无污染的总 RNA的OD260/OD280一般在 1.8-2.1 之间(具体数值与其碱基组成和溶液成分等多种因素有关),高于此范围则分别表示样品可能有蛋白质污染,但一般不影响 RT-PCR等反应。
北京现货SOB培养基厂家直销关键词:SuperOptimal Broth,Powder,SOB培养基,BTN100813
溶菌酶(Lysozyme,10mg/ml) 5ml
甲*-4-磺酰胺 O-Acetyl-L-serine hydrochloride 70-55-3
二乙基二硫代*基甲*(代"酸")银盐 Benzyldodecyldimethylammonium bromide 1470-61-7
ARB11265 人骨成型蛋白受体Ⅱ(BMPR-Ⅱ)elisa检测说明书 Human bone morphogenetic protein receptor Ⅱ,bmpr-Ⅱ ELISA KIT
ARB10468 人白三烯D4(LTD4)含量检测 Human leukotriene d4,lt-d4 ELISA KIT
ARB11693 人硫氧化还原蛋白(Trx)Elisa定量检测 Human thioredoxin,trx ELISA KIT
BL1192 姬姆萨染色液(工作液)
还原辅酶Ⅰ抑制剂 Trypan blue
BL1134 TOP10受体菌
J0307 兔抗绵羊IgG(H+L)抗血清 1ml/10ml
ARB13821 豚鼠晚期糖基化终末产物(AGEs)酶联免疫定量检测 Guinea pig advanced glycation end products,ages ELISA KIT
ARB11434 人热休克蛋白90(HSP-90)Elisa定量检测 Human heat shock protein 90,hsp-90 ELISA KIT
ARB13167 小鼠热休克蛋白70(HSP-70)酶标法分析 Mouse heat shock protein 70,hsp-70 ELISA KIT
葡萄糖酸* Dimethylphosphinic acid 299-27-4
北京现货SOB培养基厂家直销关键词:SuperOptimal Broth,Powder,SOB培养基,BTN100813
·HRP标记亲和素
编号:BTN131086
英文名称:HRP-Avidin
规格:2mg
本产品为辣根过氧化物酶标记的亲和素干粉,每摩尔亲和素含有1-2mol辣根过氧化物酶,结合能力为5-10μg生物素/mg蛋白≥80过氧化物酶单位/mg蛋白。本品常用在内源磷酸酶会对实验造成影响的免疫组化中使用以及免疫印记。
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
·即用型荧光定量PCR试剂盒
编号:BTN90408
英文名称:Instant Fluorescent qPCR Kit
规格:1mL
本产品是基于荧光染料检测的即用型PCR试剂盒,可以对靶片段进行实时定量PCR分析。产品含有经过优化的缓冲液组分、Taq DNA聚合酶、dNTPs、MgCl2及新型荧光染料DNAgreen等所有实时定量PCR所需要的成分,用户只需加入模板和引物即可进行实时定量PCR反应和HRM分析,具有广泛的用途。
产品特点:
1. 方便,用户只需准备模板和引物既可以进行实时定量PCR实验和HRM(High Resolution DNA Melt Curve Analysis)分析。而基于SYBR Green I和LC Green染料的qPCR mix则不能同时用于上述两种实验。
2. 使用第三代饱和型荧光染料,信号强,不会抑制PCR反应。
3.快捷,即用型的预配液使加样操作步骤大大简化,避免了交叉污染,降低实验误差。
4. 各成分的浓度和比例都经过精心优化,反应的灵敏度高,特异性强。能检测到浓度为50拷贝/mL的靶分子。
试剂盒组成:
| 成分 | 规格 |
| Taq DNA聚合酶(5U/μL) | 100μl |
| 易错PCR Mix,10× | 300μl |
| 易错PCR专用dNTP,10× | 300μl |
| MnCl2,5mM | 300μl |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:低温运输,-20℃保存,保存期限为6个月。
使用方法:
1.以20μl的qPCR反应体系为例:在一干净的PCR管中,加入下列成分:
| 反应体系成分 | 20μl体系 | 终浓度 |
| qPCR MagicMix,2× | 10μl | 1× |
| 自备引物一 | xμl | 0.1-0.5μM |
| 自备引物二 | xμl | 0.1-0.5μM |
| 自备模板 | xμl | |
| 自备ROX | 2μl | (可以不加) |
| 补超纯水到 | 20μl |
放入荧光PCR仪中进行扩增,并在退火或延长步骤中记录荧光信号。
注意:
a)通常引物浓度以0.2μm可得到较好结果,可以终浓度0.1-1.0μm作为设定范围的参考;通常DNA模板的量以10-100 ng基因组DNA或1-10 ng cDNA为参照,因不同物种的模板中含有的目的基因拷贝数不同,可对模板进行梯度稀释,以确定最佳的模板使用量。
b)ROX 校正染料:如果使用ABI公司的7500,7700和7900三种型号的荧光PCR仪器,则需用自备的ROX进行Ct值校正。对ABI 7700和7900,ROX的最佳浓度为1×(即在每20μl反应体系中加2μl 10×ROX)。对ABI 7500,ROX的最佳浓度为0.05-0.1×(每20μl反应体系加0.1-0.2μl 10×ROX;也可将10×ROX稀释到1×,然后每个反应体系加入1-2μl 1×ROX)。ROX会在溶解曲线中产生噪音,因此,如果出现了杂峰,将软件中“Passive Reference Dye”中的“ROX”选项取消打勾,然后重新分析数据。
对于iCycler IQ,MJ Opticon,MJ Chromo4,MX3000,MX4000,RotorGene3000,RotorGene 6000和LightCycler 480等型号的荧光PCR仪器,ROX不是必须的,但加入的话也不会影响整个PCR分析。
2. 循环步骤:根据扩增子的性质和仪器性能,从以下三个过程中任选一个进行扩增。
两步快速循环法:适用于引物Tm值设计为60℃的反应
| 循环步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
| 酶活化 | 95℃ | 10min | 1 |
| 变性 | 95℃ | 15s | 35-40 |
| 退火&延伸 | 60℃ | 1min |
注意:本产品所采用的热启动酶须在预变性95℃、10 min条件下实现酶的活化。退火温度请以60-64℃作为设定范围的参考,发生非特异性反应时,可提高退火温度。
三步快速循环法:适用于延伸步骤温度高于退火步骤的PCR(长引物PCR)
| 循环步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
| 酶活化 | 95℃ | 10min | 1 |
| 变性 | 95℃ | 10s | 35-40 |
| 退火 | 56-64℃ | 30s | |
| 延伸 | 72℃ | 32s |
注意:
·退火温度:建议采用两步法PCR,退火温度60℃进行反应。若提高反应特异性,可提高退火温度,以60-64℃作为设定范围的参考。若因使用Tm值较低的引物等原 因,得不到良好的实验结果时,可尝试进行三步法PCR扩增,三步法的退火温度请以56℃-64℃的范围作为设定参考。
·延伸温度:延伸温度设为72℃通常可以提高扩增效率。但是,对于AT含量大于70%的扩增子来说,延伸温度设为60℃为宜。
通用循环法:这种循环方法适用于几乎所有的荧光PCR仪,也适用于用快速循环法不能扩增的模版。
| 循环步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
| 酶活化 | 96℃ | 10min | 1 |
| 变性 | 96℃ | 15s | 35-40 |
| 退火&延伸 | 60℃ | 1min |
3. 数据采集
具体操作按所用仪器推荐的流程进行。本产品中所含的荧光染料在没结合DNA时,最大吸收光谱在471nm,结合DNA时的最大吸收光谱在500nm,最大发射光谱在530nm。
注意事项:
1. 如果使用iCycler,可以不加入FAM。
2. 如果使用Roche LightCycler的玻璃毛细管进行PCR,需加入终浓度为0.5mg/mL的自备BSA。
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