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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
816
- 英文名:
Firefly Luciferase Assay Kit
- 保质期:
半年
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
2~8℃
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产供应北京现货萤火虫荧光素酶活性检测试剂盒促销,我公司销*(代"售")全品类的分子生物学试剂,价格优惠,欢迎广大科研工作者垂询订购。
名称:萤火虫荧光素酶活性检测试剂盒
产地:国产|进口
编号:BTN130597
规格:100次
英文名:Firefly Luciferase Assay Kit
品牌:百奥莱博
本试剂盒采用通用裂解缓冲液,能与其他类型的报告基因检测和蛋白含量检测兼容。本产品与海肾荧光素酶报告基因检测试剂盒共同使用,可进行一体化的双荧光素酶检测。
报告基因检测是真核基因表达调控研究的常用方法。因为检测光量子的方法非常敏感,所以生物发光法是报告基因检测最常用的手段。荧光素酶(luciferase)催化底物荧光素的转化,发射出光子。萤火虫荧光素酶催化的发光反应,具有很好的浓度线性范围(7~8个数量级的线性范围),酶的检测灵敏度达到10⁻²ºmol。原理如下:

试剂盒特点:
1.高度灵敏:可检测10⁻¹⁸~10⁻²ºmol荧光素酶。
2.线性范围宽:线性范围达到7~8个数量级。
3.快速简便:特别适合于高通量筛选。
4.兼容性好:与其它常用报告基因检测试剂兼容。
5.本产品可足够100次荧光素酶检测。
试剂盒组成:
| 成分 | 规格 |
| 5×Universal Lysis Buffer (通用裂解缓冲液) |
20mL |
| Fassay Buffer | 10mL |
| Fassay Substrate(底物) | 0.5mL |
| 使用手册 | 1份 |
储存条件:低温运输,-20℃或-80℃避光保存,有效期半年。
使用方法:
★裂解细胞:
1. 配制裂解液:临用前,取适量5×Universal Lysis Buffer(ULB),用双蒸水稀释至1×ULB,混匀。1×ULB可在4℃存放数周。
2. 清洗细胞:倾去培养板/皿中的培养液,加入足量PBS ,轻轻洗涤细胞。完全倾去洗涤液。
3. 裂解细胞:按照下表中推荐的体积,在孔/皿中加入1×ULB ,混匀。培养板可在微型振荡器上震荡5-10分钟;培养皿可直接用细胞刮刀刮下细胞,将细胞悬液移入1.5mL离心管,在涡旋振荡器上充分混悬震荡30秒。裂解细胞悬液可直接用于发光测定,也可离心30秒,取上清液做发光测定。
表:不同孔/皿所需1×ULB体积
| 96孔板 | 48孔板 | 24孔板 | 12孔板 | 6孔板 | 35mm平皿 | 60mm平皿 |
| 50μL | 80μL | 150μL | 250μL | 500μL | 500μL | 1000μL |
★配制发光反应液:
测定前,室温溶化Fassay Buffer和Fassay Substrate,混匀。按20/1比例用Fassay Buffer稀释Fassay Substrate,配制所需体积的Fassay Reagent(注意避光)。
★测定仪器的设置:
按仪器操作说明开启发光测定仪。手动操作型仪器,将测读时间设为10~20秒。自动操作型仪器,一般将测定延迟设为2秒,将测读时间设为10~20秒,Fassay Reagent的注入体积设定为100μL。
★手动发光测定:
取待测样品20μl加入测量管底部,取Fassay Reagent 100μL立即加入管底部,轻轻敲击管壁3~5次混匀,放入仪器中立即测定,记录发光值为Firefly luciferase的发光单位(RLU)。如用多孔板同时手动测定多个样品,则将各待测样品20μL分别加入连续的各孔底部,用多道加样器于各孔底加入Fassay Reagent 100μL,轻轻敲击板侧3~5次混匀,放入仪器中立即测定,记录发光值为Firefly luciferase的发光单位(RLU)。
★自动发光测定:
配制好的Fassay Reagent置于测定仪内并连接好对应管道。取待测样品20μL分别加入测定管/板孔底部,启动自动测量程序。记录Firefly luciferase的发光单位(RLU)。
注意事项:
1.Fassay Substrate(底物)溶液应密封、盖严存放,避免蒸发。Fassay Buffer和Fassay Substrate(底物)应避免反复冻熔,可分装成合适体积分次使用。
2.1×细胞裂解液一般在当天测定。如需隔日测定,应将样品于-20℃保存。长期保存应在-80℃。
3.用多孔板同时手动测定多个样品时,要尽量缩短样品间试剂加入的时间间隔。
4.本产品与海肾荧光素酶活性检测试剂盒联合使用,可进行一体化的双荧光素酶检测。
关键词:Firefly Luciferase Assay Kit,萤火虫荧光素酶活性检测试剂盒,BTN130597
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| 编号 | 名称 |
| BTN130958A | 红色DNA上样液(6×,非甘油) |
| BTN111201 | 痰液DNA提取试剂盒 |
| BTN131291 | Methacarn固定液 |
| BTN120619 | dGTP溶液(100mM) |
| BTN80805 | 柱式毛发DNA提取试剂盒 |
| BTN120654D | Southern DNA Marker DL2000(DIG标记) |
| BTN131289 | PLP固定液(Nakane-McLean固定液) |
| BTN140402 | 植物RNA提取专用高盐溶液 |
| BTN130646 | 尿嘧啶-DNA糖基化酶(UDG) |
| BTN60205 | 柱式质粒DNA提取试剂盒 |
| BTN80901 | 柱式动物RNA大量提取试剂盒 |
| BTN81225 | Tricine-SDS PAGE配胶液 |
| BTN130663 | T4噬菌体基因32蛋白 |
| BTN70503Y | DNA marker(100-5000bp) |
| BTN131208 | DNA探针变性液 |
| BTN90505 | 大肠杆菌BL21(DE3)化学感受态细胞 |
| BTN130806 | 胚胎裂解液 |
| BTN70703 | 柱式分枝杆菌DNA提取试剂盒 |
| BTN131038 | dUTP溶液,100mM |
| BTN121112 | 大肠杆菌Stbl3化学感受态细胞 |
| BTN51207 | Pfu DNA聚合酶 |
| BTN60105 | 平末端DNA加A试剂盒 |
| BTN70503S | DNA marker(200-5000bp) |
| BTN70701 | 柱式病毒DNA提取试剂盒 |
| BTN130905 | 超级杂交液(芯片) |
| BTN81223 | 增强型DAB显色试剂盒 |
| BTN80904 | 柱式真菌RNA大量提取试剂盒 |
| BTN90603B | 随机引物法DNA探针生物素标记试剂盒 |
| BTN120506 | T4聚核苷酸激酶 |
| BTN140386 | 酿酒酵母AH109化学感受态细胞 |
| BTN3150 | RNA电泳液,10× |
| BTN130971 | 柱式病毒RNA-DNA共提试剂盒 |
| BTN120641 | 一站式CTAB-PAGE电泳套装 |
| BTN100835 | 胃蛋白酶抑制剂溶液(1mg/mL) |
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文献和实验地关注。 原理: ATP含量检测可以用吸光度检测、发光检测或同位素等方法实现。传统的吸光度检测法,检测灵敏度低,线性范围窄,难以准确检测ATP状况。而应用荧光素酶发光方法检测ATP,具有极高的灵敏度和极宽的检测范围,而且简便、快速,是目前最为流行的方法。该方法基于萤火虫荧光素酶(Firefly Luciferase)催化荧光素氧化,消耗ATP,发出光子的高效发光反应,具有发光效率极高、发光量与ATP含量呈很好的线性关系的特点。 检测方法: 1.所需器材 专用检测
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