北京牛小肠碱性磷酸酶(CIAP)现货价格

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百奥莱博专业生产销*(代"售")北京牛小肠碱性磷酸酶(CIAP)现货价格，我公司供应的分子生物学试剂品类齐全，且具有优势价格，欢迎新老客户垂询订购。

名称：北京牛小肠碱性磷酸酶(CIAP)现货价格
英文名：Alkaline Phosphatase,Calf Intestinal
产地：国产|进口
编号：BTN120404
品牌：百奥莱博
规格：500U
牛小肠碱性磷酸酶与E.coli来源的碱性磷酸酶相同，催化所有磷酸单酯的水解，不能催化磷酸二酯以及磷酸三酯的水解，对ATP等的焦磷酸键水解速度较慢。由于CIAP处理后的DNA片段缺少连接酶所要求的5´磷酸末端，因此它们不能进行自连接。这个特性可以在克隆时降低载体DNA的背景。

产品用途：
1．去除载体DNA片段的5´-末端的磷酸基；
2．防止克隆载体的自连接；
3．蛋白质丝*酸、苏*酸和酪*酸的去磷酸化；
4．为5´末端标记准备模板。

产品组成：

 

成份	规格
CIAP(10～30U/μl)	500U
10×CIAP Buffer	0.5mL
使用手册	1份

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

活性定义：在37℃、pH9.8的条件下，1分钟内水解对硝基*(代"*")磷酸盐生成1μmol的对硝基*(代"*")酚所需要的酶量定义为1个活性单位。

纯度：
1．30 U的本酶和1μg的λDNA-Hind III片段在37℃下反应16小时，DNA的电泳谱带不发生变化。
2．30 U的本酶和1μg的Closed circular(RFI)pBR322 DNA在37℃下反应1小时，DNA的电泳谱带不发生变化。
3．18 U的本酶和1μg的16S，23S rRNA在37℃下反应16小时，RNA的电泳谱带不发生变化。

使用举例：
1．在微量离心管中配制50μL反应体系：

成分	加入量
DNA Fragment in TE Buffer	1～20pmol
10×CIAP Buffer	5μl
CIAP(10～30units/μl)	1-2μl
补水到	50μl

2．37℃或50℃反应30分钟。或者先37℃反应15分钟，再50℃反应15分钟。注意：单链DNA和具有5´突出末端的DNA在较低温度下(如37℃)即可去磷酸化，而具有3´突出末端的DNA或平末端DNA需要较高温度(如50℃)才能去磷酸化。
3．*酚/*仿/异戊醇(25:24:1)抽提2次。注意：如果早在*酚抽提之前，用自备的蛋白酶K降解CIAP酶，则效果更好。具体做法是：加入EDTA和SDS使其终浓度为5mM EDTA和0.5% SDS，最后加入蛋白酶K溶液，使其终浓度为50μg/mL，然后56℃处理30分钟，再75℃孵育10分钟。然后用于*酚/*仿/异戊醇抽提。
4．*仿/异戊醇(24:1)抽提1次。
5．添加2.5μl的3M NaCl(终浓度150mM)。
6．添加125μl的(2.5倍量)冷乙醇，在-20℃下放置30～60分钟。
7．13000g离心20分钟后，小心去上清。
8．用1mL 75%乙醇洗涤一次。
9．干甩数秒，小心吸弃上清。
10．用20μl以下的TE Buffer溶解DNA沉淀待用或放-20℃长期放置。

更多有关北京牛小肠碱性磷酸酶(CIAP)现货价格的价格及使用说明等，请联*(代"系")我们的业务经理王欣女士咨询，我公司还销*(代"售")以下产品：

·动物RNA提取试剂盒(柱式提取)(无需*仿)
编号：BTN160905
英文名称：Animal RNA column extraction kit(chloroform-free)
规格：50次
本试剂盒是在本公司柱式动物总RNA快速提取试剂盒基础上升级的免*仿产品，可用于从各种动物组织(包括白细胞)快速提取总RNA。

试剂盒特点：
1. 免去*仿抽提步骤，操作更加简单快速，整个过程只需要不到十分钟(对一个样品而言)。
2. 不使用有毒的*仿，健康环保。
3. RNA纯度很高，OD260/OD280一般在2.0左右。
4.一般不含用RT-PCR可以检测到的基因组DNA污染。
5.适用于培养细胞、大部分动物组织和部分植物组织。
6. 所得RNA可直接用于RT-PCR、Northern杂交、cDNA合成等实验。
7. 性价比高于进口的柱式RNA

试剂盒组成：

组分	编号	规格
溶液A	BTN71201A	50mL
溶液B	BTN71201B	25mL
离心吸附柱	BTN90303	50套
通用洗柱液	BTN60408	50mL
RNA洗脱液	BTN71207	10mL
使用手册		1份

储存条件：常温运输和保存，但溶液A需要4℃保存，有效期一年。

使用方法：
下面的操作步骤是针对在1.5mL塑料离心管中进行的微量提取的，如果处理样品量大，请按比例增加各成份的用量并使用大的离心管和离心机。

1. 根据组织细胞类型的不同分为下面及种情况使用：
a)对贴壁细胞：吸尽培养液，在每10平方厘米细胞中加入1mL溶液A，用枪轻柔吹打数次，确保细胞全部裂解。
b)对悬浮细胞：离心收集细胞，吸尽液体，在每1-5×106悬浮细胞中加入1mL溶液A，用枪轻柔吹打数次，确保细胞全部裂解。如果是fibroblasts或carcinoma cell，1mL溶液A的细胞使用量不要超过1×106个细胞。
c)对新鲜组织：先将剪切成小块新鲜组织或液氮保存的组织放入10mL或15mL塑料离心管中，每50-100mg组织加1mL溶液A，用匀浆器匀浆30秒左右。对肝、脾、胰、肾等细胞分裂十分旺盛的组织(细胞中含大量正在复制的DNA)，建议组织的使用量不要超过50mg/ mL溶液A，否则十分容易产生DNA污染。
d)对RNAhold保存组织：先用纸吸去RNAhold液体后再剪切成小块，其余操作同新鲜组织的处理。
2. 将裂解物转移至一个干净的1.5mL塑料离心管中，12000rpm室温离心3～5分钟。
3. 将上清液(残留沉淀为每裂解的细胞和组织)转移到一个干净的1.5mL塑料离心管中。
4. 加入等体积的溶液B，充分颠倒混匀。
5. 将一半的溶液转移到离心吸附柱中，12000rpm室温离心半分钟，弃穿透液。
6. 将剩下的一半溶液转移到同一离心吸附柱中，12000rpm室温离心半分钟，弃穿透液。
7. 加0.7mL通用洗柱液到离心吸附柱中，室温离心半分钟，弃收集管中的穿透液。一次洗涤一般足够去除杂质。
8. 加0.3mL通用洗柱液，室温离心半分钟，弃穿透液。此步可以省略。
9.室温12000 rmp离心半分钟。此步十分重要，否则残留的通用洗柱液会影响RNA的使用。
10. 将离心吸附柱转移到一自备的RNase-free收集管中，加入50-100μL RNA洗脱液。
11.室温12000 rmp离心半分钟，离心管中溶液即为RNA样品，可以立即使用或存放于-80℃待用。
12. RNA的电泳检测：本试剂盒提取的RNA最好用甲醛变性胶电泳，如果在非变性的普通琼脂糖胶(in TAE或TBE buffer)上电泳，一定要使用RNA专用上样液RNAload(操作详见RNAload使用手册)，千万不要使用常用的DNA上样液，因为DNA上样液没有经过去RNase处理，也不能将RNA变性，得到的带型将十分杂乱。
13. RNA完整性的电泳检测：如果需要做Northern杂交，强烈建议用户使用甲醛变性胶进行RNA电泳，因为非变性胶不能分离所有的RNA分子(BioTechniques，28：414，2000)。
14. RNA产量产率测定：将5-10μl RNA溶于TE缓冲液中(pH7.5-8.2之间)检测其在OD260的光吸收。通过光吸收可以得出RNA浓度(1 OD260的RNA=40μg/mL)，进而计算出RNA的产量(浓度X体积)和产率(RNA产量/组织用量)。
15. RNA纯度测定：无污染的总RNA的OD260/OD280一般在1.8-2.1之间(具体数值与其碱基组成和溶液成分等多种因素有关)，高于此范围则分别表示样品可能有蛋白质污染，但一般不影响RT-PCR等反应。

疑难解答：
Q：上样孔里的红色荧光物一定是DNA污染吗？
A：不是。用TAE或TBE电泳液和非变性胶电泳RNA时容易产生此现象，百奥莱博初步研究发现大部分红色荧光物是变性不充分的单链RNA通过碱基互补或通过硼*(代"酸")络合(如果使用TBE作电泳液的话)形成的复合物，加RNase处理后，这些红色荧光物(RNA)一般会消失。为避免此现象，建议最好使用甲醛变性胶电泳和RNA专用上样液(如百奥莱博的RNAload)。
Q：如何确认和去处除污染的基因组DNA？
A：如果怀疑有DNA污染，可以用RNase处理RNA样品，然后再电泳。如果上样孔里的红色荧光物不消失，则表示是基因组DNA污染。进一步确认可以使用PCR扩增法。去除污染的DNA可以使用百奥莱博的非酶的DNA去除剂DNA Scavenger或RNase-free DNase，由于RNase-free DNase一般都有残留的RNase污染，所以必须严格按照厂家提供的使用手册进行操作。



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·特异性显色基质鲎试剂盒
编号：BTN170401
规格：32次
鲎试剂为鲎科动物东方鲎的血液变形细胞溶解物的冷冻干燥品，鲎试剂中含有C因子、B因子、凝固酶原、凝固蛋白原等。在适宜的条件下(温度，pH值及无干扰物质)，细菌内毒素激活C 因子，引起一系列酶促反应，激活凝固酶原形成凝固酶，凝固酶分解人工合成的显色基质，使其分解为多肽和黄色的对硝基*(代"*")胺(pNA，λmax=405nm)。在一定时间内，pNA的生成量与细菌内毒素浓度成正相关，据此，可以定量样品的内毒素浓度。同时，对硝基*(代"*")胺(pNA)也可用偶氮化试剂染成玫瑰红色(λmax = 545nm)，避免了样品本身的颜色对405nm处吸收峰的干扰。特异性鲎试剂是在鲎试剂的配方中添加G因子旁路抑制剂，使鲎试剂对(1,3)β-D-葡聚糖产生假阳性反应，使检测结果更加准确可靠。本鲎试剂对细菌内毒素的反应是特异的，抗干扰能力比普通鲎试剂更强，使用时只需用细菌内毒素检查用水直接溶解即可，不需另外添加G因子抑制剂(抗增液)。

试剂盒特点：
1. 仅用于体外细菌内毒素的定量检测，严禁试剂以任何途径进入机体。
2. 接触试剂及样品的所有器皿必须是除热原的。实验过程应防止微生物的污染。该说明书中的除热原指内毒素浓度小于0.005 EU/ml。玻璃器皿可经250℃干烤至少60分钟去除热原。
3. 待测样品的pH值应在6.0–8.0之间，若超出此范围，需用除热原的缓冲液、0.1M*氧化*或0.1M 盐*(代"酸")调节。
4. 当样品中可能存在鲎实验的干扰物质时，须进行干扰实验。

试剂盒组成：

成分	规格
细菌内毒素标准品	2支
特异性鲎试剂	2 支×1.7mL
显色基质	2 支×1.7mL
偶氮化试剂1	2 支×10mL
偶氮化试剂2	2 支×10mL
偶氮化试剂3	2 支×10mL
HCl(反应终止剂)	50ml
细菌内毒素检查用水	50mL×2 瓶
除热原试管，10×75mm	10×5 支
除热原吸头，1000VL	10×4 支
除热原吸头，200VL	1盒

储存条件：常温运输，4℃避光保存，有效期两年。


北京牛小肠碱性磷酸酶(CIAP)现货价格关键词：牛小肠碱性磷酸酶(CIAP),Alkaline Phosphatase,Calf Intestinal,BTN120404


·dTTP溶液，2.5mM
编号：BTN130913
英文名称：dTTP Solution，2.5mM
规格：2mL
dTTP分子式为C10H14N2O14P3Na3,分子量是548.1，消光系数为：9.6×103M-1×cm-1(pH7.0)。λmax为267nm。

储存条件：低温运输和-20℃保存、有效期一年。

·LB培养基
编号：BTN100602
英文名称：Lysogeny Broth Medium，Powder
规格：250g
LB培养基是由美国科学家Giuseppe Bertani在1951年独立开发。但现在常用的LB配方是由Miller修改而成，主要是去掉Glucose并把NaCl浓度从0.5 g/L增加到10 g/L。本产品就是根据Miller配方制备的干粉型培养基。

储存条件：常温运输及保存，有效期两年。

使用方法：称取本产品25.0 g于1 L蒸馏水或去离子水中，加热溶解，分装，121℃高压灭菌15分钟，备用。

·Maximov固定液
编号：BTN131288
英文名称：Maximov Fixative Solution
规格：250mL
本固定液主要成分为*化汞、重铬酸*、甲醛。与Zenker固定液相比，本产品不含铬酸，所以重铬酸*未被酸化，因此，对细胞浆固定较好。甲醛有促染胞浆的作用，增加对酸性染料的亲和力。

储存条件：常温运输和保存，有效期一年。

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