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- 详细信息
- 技术资料
- 库存:
805
- 英文名:
Universal Loop-Mediated Isothermal Amplification Kit
- 保质期:
一年
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
2~8℃
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产销*(代"售")通用型LAMP试剂盒价格,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:通用型LAMP试剂盒价格
产地:国产|进口
规格:50次
编号:BTN100203
品牌:百奥莱博
本试剂盒可以用于LAMP等温扩增,LAMP即环介导等温扩增,是一种新颖的等温核酸扩增方法。它利用4条模板专一的特异引物和具有链置换能力的DNA聚合酶,在等温条件下(63℃左右)30-60分钟完成扩增(详细反应过程见本页面下方相关产品栏中的LAMP flash)。该技术在灵敏度、特异性和检测范围等指标上能媲美甚至优于PCR技术,同时还不需要模板的热变性、温度循环、电泳及紫外观察等过程,不依赖任何专门的仪器设备。目前已成功应用于人类及动植物、细菌、病毒、寄生虫、真菌等病原体的快速检测。
产品特点:
1.高特异性,由于同时使用4-6条特异引物,所以特异性比PCR更高。
2.高扩增效率,扩增效率可达到10E9-10E10,比PCR灵敏一个数量级,可检测到单拷贝的DNA分子。
3. 65℃左右等温扩增,不需要贵重的热循环仪。
4. 即开即用,包含了除引物和模板DNA外的所有成份,十分方便。
5. 肉眼检测扩增结果,不需要昂贵的电泳、荧光PCR等仪器。
6. 提供扩增对照,便于在遇到困难时分析原因。
试剂盒组成:
| 成分 | 规格 |
| LAMP Mix(2×) | 0.5ml |
| Bst DNA聚合酶(8U/μL) | 75μl |
| 对照引物 | 20μl |
| 对照模板DNA | 5μl |
| 25mM MgCl2 | 0.2ml |
| 超纯水 | 1ml |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
使用方法:
1.在冰上溶解除酶外的各种组份,混匀,稍离心。在反应管中加入以下组份:
| 成份 | 样品管 | 阴性对照 |
| LAMP Mix(2×) | 10μl | 10μl |
| FIP引物终浓度 | 0.8μM | 0.8μM |
| BIP引物终浓度 | 0.8μM | 0.8μM |
| F3引物终浓度 | 0.2μM | 0.2μM |
| B3引物终浓度 | 0.2μM | 0.2μM |
| Loop F引物终浓度(可选项) | 0.4μM | 0.4μM |
| Loop B引物终浓度(可选项) | 0.4μM | 0.4μM |
| MgCl2(25mM) | 3μL | 3μL |
| 模板DNA | 1-100ng | 不加 |
| Bst DNA聚合酶(8U/μL) | 1.5μl | 1.5μl |
| 补水到 | 20μl | 20μl |
注:如在反应管中加入本公司PCR级绿如蓝染料1μL(水则少加1μL),则可直接在荧光定量PCR仪中进行荧光定量检测。
2. 混匀,置于60-65℃保温30-120分钟。注意:如果不使用Loop引物,则最好保温2小时;如果使用Loop引物,则最好保温30分钟。
3. 80℃10分钟灭活Bst DNA聚合酶。
4.产物置于-20℃备用或立即用于下游检测。扩增产物可选下列方法之一检测:
a)琼脂糖凝胶电泳。取扩增产物5μl,1-2%的琼脂糖凝胶电泳,可见LAMP特征性电泳图谱;
b)向扩增产物中直接加入本公司PCR级绿如蓝染料(另售)1μL,混匀,稍离心。将反应管置于紫外透射仪或凝胶成像系统中,紫外灯下可见绿色荧光产生;
c)荧光定量检测。
5. 结果分析:
a)如果没有扩增,则需要用阳性对照进行扩增。本试剂盒提供5次阳性对照,反应按下表设置:
| 成份 | 阴性对照管 | 阳性对照管 |
| LAMP Mix(2×) | 10μl | 10μl |
| 对照引物混合物 | 4.0μl | 4.0μl |
| 对照模板DNA | 不加 | 1μl |
| MgCl2(25mM) | 3μl | 3μl |
| Bst DNA聚合酶(8U/μL) | 1.5μl | 1.5μl |
| 水 | 1.5μl | 0.5μl |
混匀后,置于60℃保温120分钟,其余操作同上。注意:本对照引物中没有Loop引物,所以最好保温2小时。
b)如果阳性对照能够扩增出,则说明试剂盒没有问题,可能是模板或引物的问题。如果阳性对照没有扩增出条带,则是试剂盒的问题,请跟厂家联*(代"系")。
注意事项:
1.引物设计对成功扩增十分关键。除用于SNP分型外,尽量以保守区设计引物。
2.引物至少包括F3/B3和FIP/BIP,加入环状引物F loop/B loop可以使反应速度大大提高。
3. 应优化引物序列、GC含量和尽量避免二级结构。
4.反应中各个引物的浓度及比例对扩增效果有一定的影响。
5. 建议先将所有引物混合在一起,配制成10×浓度以方便使用。
6. LAMP扩增具有特异性好、灵敏度高、时间快、不需要特殊仪器设备等优点。但太高的灵敏度使得其比普通PCR扩增更加容易污染导致假阳性。因此,必须高度重视扩增产物的污染。常规措施包括严格的实验分区、添加UNG和dUTP(可能导致反应效率下降)、使用荧光定量等不开盖检测方法。实验室一旦遭到污染,所有相关试剂必须全部更换,必要时还得更换实验室。
7. 要确证扩增的为目标基因,可以使用特定的限制性酶切和/或Southern杂交。
8. 本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床治疗、食品等用途。
除通用型LAMP试剂盒价格外,我公司正在打折促销以下产品:
·菌落PCR试剂盒2.0
编号:BTN50901
英文名称:Colony PCR Kit 2.0
规格:50次
菌落PCR是筛选重组子的有效方法,可以使质粒鉴定过程从两天缩短到几小时。但由于它直接以E.coli菌落为PCR而菌落中常常含有未进入细菌的、来源于连接反应的载体DNA和插入片段,所以十分容易产生假阳性。本产品针对此缺点进行了改良。
产品特点:
1. 无假阳性率,特殊的溶菌方式能有效降低菌落中未转化DNA 对PCR的干扰,使假阳性率低于5%,远低于绝大部分同类产品。
2. 简单快速,用户只需要提供PCR引物和E.coli菌落,不需要细菌培养和质粒提取,整个筛选过程从一天缩短到2-3小时,节约时间和成本。本产品与常用E.coli菌株和载体兼容。既可小规模筛选,也适用于大规模筛查。
3.高灵敏度,既可用于高拷贝质粒,也适合于低拷贝质粒。
4. PCR反应体系中含有惰性电泳染料,反映完成后可直接上样电泳,不需另加上样液。
5.处理过的菌落样品低温长期保存后仍能用于PCR 筛查。
6. 性价比高,价格跟质粒提取试剂盒相当,但节约一天时间。
| 成分 | 规格 |
| 溶菌液A | 0.5ml |
| 溶菌液B | 0.1ml |
| PCR 2.0 | 0.75ml |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
使用方法:
1. 标记1.5mL塑料离心管,除样品管外,还必须加上阳性和阴性对照管。
在每个管中加入下列成份配制100μL 溶菌液:
| H2O(自备) | 88μl |
| 溶菌液A | 10μl |
| 溶菌液B | 2μl |
| 合计 | 100μl |
2. 用无菌牙签或无菌移液枪头从培养皿上挑取一个菌落或部分菌落,放入溶菌液中,充分震荡直到菌落彻底分散混匀。为方便回查,最好在培养皿上给已取样的菌落做好标记。
3. 重复第2 步直到待筛查菌落全部转移到相应的离心管中。
4.在阳性对照管中,加入已知含有待筛选质粒的菌落;如果没有此菌落,直接进入第6 步,用连接反应液直接作PCR的阳性对照。
5.在阴性对照管中,加入已知的不含有待筛选质粒的任何E.coli菌落(如常见的宿主细菌),其他处理同第2 步。
6. 将所有离心管置于37℃保温30分钟,然后转入100℃水浴处理10分钟。振荡混匀溶液数秒后10,000 g离心1分钟,转移上清到一新的离心管中待用。此溶液为样品DNA溶液。
7. 标记与第1 步数量相同的PCR 管,每个管中分别加入下列成份并充分混匀:
| 样品DNA溶液 | 1-5μl |
| PCR MagicMix | 15μl |
| 引物1(10 pmol/μL) | 1μl(自备) |
| 引物2(10 pmol/μL) | 1μl(自备) |
| Taq物DNA聚合酶(5U/μL) | 0.2-0.4μL(1-2U) |
| 补水到 | 30μl |
注意:引物选择有三种情况,
一是选用商品化的能与多克隆位点两边顺序结合的通用引物(如T7、T3、SP6等);
二是使用用户自己合成的能与插入片段结合的引物(如果插入片段是PCR产物,引物是现成的);
三是组合第一种情况和第二种情况的引物。选择前两种引物在筛查到重组子后还必须用其他方法(如质粒制备后酶切或使用载体引物/插入片段引物PCR)进一步确定插入方向。选择第三种引物则可以同时完成重组子筛选和DNA 插入方向确定两项工作。用户可以根据自己的具体情况选择。
8. 将PCR 管放入PCR 仪器中进行扩增,PCR 温度参数根据引物和模板情况由客户自己预先确定。
9. PCR结束后取10μl电泳直接进行琼脂糖电泳分析。(注:本试剂盒提供的PCR buffer中已经含有电泳染料和甘油,故可以直接上样)
通用型LAMP试剂盒价格关键词:BTN100203,Universal Loop-Mediated Isothermal Amplification K,通用型LAMP试剂盒
·DNA marker(φX174 DNA/Hinc II)
编号:BTN90602I
英文名称:DNA ladder(φX174 DNA/Hinc II)
规格:50次
本系列产品为传统的酶切分子量标准,由单一的质粒DNA或噬菌体DNA经单个限制性内切酶完成消化后,加热灭活而成。每次上样总DNA含量已知,每条带的含量可根据其摩尔数的比值计算出来。本系列产品成分中已经含有上样缓冲液,所以可以直接上样电泳。得到的电泳条带长度准确,明亮清晰,背景较低,稳定性很好。
每次加样量为5μL,可用于相对定量。本系列产品与各种琼脂糖和各种电泳缓冲液兼容。
储存条件:低温运输、-20℃保存,有效期一年。
使用方法:直接上样电泳,每次加样量为5uL。
使用效果:
疑难解答:
a)如对带型要求较高,建议使用0.8-1.5%琼脂糖凝胶(对SuperBuffer-2缓冲液,电压为250-400V)或1.5-2.0%琼脂糖凝胶(对TAE或TBE缓冲液,电压为80V),同时适当延长电泳时间。
b)电泳图象的质量与琼脂糖、电泳缓冲液有关。请采用高质量的琼脂糖,同时要经常更换电泳缓冲液。
·一站式Tricine-SDS-PAGE套装
编号:BTN81205
英文名称:One-Stop Tricine-SDS-PAGE Pack
规格:30次
本系列产品为传统的酶切分子量标准,由单一的质粒DNA或噬菌体DNA经单个限制性内切酶完成消化后,加热灭活而成。每次上样总DNA含量已知,每条带的含量可根据其摩尔数的比值计算出来。本系列产品成分中已经含有上样缓冲液,所以可以直接上样电泳。得到的电泳条带长度准确,明亮清晰,背景较低,稳定性很好。
每次加样量为5μL,可用于相对定量。本系列产品与各种琼脂糖和各种电泳缓冲液兼容。
储存条件:低温运输、-20℃保存,有效期一年。
使用方法:直接上样电泳,每次加样量为5uL。
使用效果:
疑难解答:
a)如对带型要求较高,建议使用0.8-1.5%琼脂糖凝胶(对SuperBuffer-2缓冲液,电压为250-400V)或1.5-2.0%琼脂糖凝胶(对TAE或TBE缓冲液,电压为80V),同时适当延长电泳时间。
b)电泳图象的质量与琼脂糖、电泳缓冲液有关。请采用高质量的琼脂糖,同时要经常更换电泳缓冲液。
通用型LAMP试剂盒价格关键词:BTN100203,Universal Loop-Mediated Isothermal Amplification K,通用型LAMP试剂盒
·L-谷胱甘肽(还原型)
编号:BTN120705
英文名称:Glutathione
规格:5g
还原型谷胱甘肽是人类细胞质中自然合成的一种肽,由谷*酸、半胱*酸和甘*酸组成,含有巯基(-SH),广泛分布于机体各器官内,作为一种抗氧化剂,可以保护肝脏细胞膜,增强肝脏的解毒能力,为维持细胞生物功能呈有重要作用。本产品可用于配制纯化GST标签蛋白的洗脱液。
储存条件:常温运输,4℃保存,有效期两年。
·miRNA marker(miRNA电泳分子量标准)
编号:BTN70605
英文名称:miRNA Ladder
规格:30次
尿素-聚丙*(代"烯")酰胺凝胶电泳(Urea-PAGE)是目前分离100nt以下的小片段RNA分子,尤其是20nt左右的microRNA(miRNA)分子的主要方法,但是目前作为miRNA电泳的分子量对照产品还很少,为此百奥莱博开发了本产品。
产品特点:
1. 范围在15-50nt,尤其适合于长度在20nt左右的miRNA的分子长度初步确定。
2.产品是单链DNA,变性胶上泳动行为类似于单链的RNA,但比RNA 更稳定。
储存条件:低温运输,-20℃保存,保存期为一年。
使用方法:
1. 将5μL 本产品与15μl 10M的尿素溶液(自备)或5μL miRNAload电泳上样液混合后直接上样。也可以使用样品所用的其它上样液。
2.电泳后用0.5μg/mL的EB溶液染色半小时后即可在UV下观察。
使用效果:
图注: 用5μL本产品在浓度为15%的PAGE(含7M尿素)上电泳(用1×TEB缓冲液),最后用0.5μg/mL的EB溶液染色。
我公司生产供应销*(代"售")的核酸扩增(PCR)产品正全系列现货促销,满分期待您的垂询选购通用型LAMP试剂盒价格。
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