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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
759
- 英文名:
Yeast tRNA Solution
- 保质期:
一年
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
低温运输,-20℃
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产销*(代"售")酵母tRNA溶液(精提)厂家,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:酵母tRNA溶液(精提)厂家
英文名:Yeast tRNA Solution
产地:国产|进口
编号:BTN70904B
规格:1.5mL
品牌:百奥莱博
本产品分A和B两个规格,浓度均为5mg/mL。A是酵母tRNA粗提液,用作制备更高纯度(如分子生物级)酵母tRNA的原材料。B是精提液,是经过本公司柱式RNAadsorp纯化的分子生物学级别的酵母tRNA溶液,不含蛋白质和DNA污染,OD260/OD280在1.9左右,可直接用作微量RNA提取和回收的助沉剂,也可以用作原位杂交、Northern杂交的封堵剂,对于探针为RNA的杂交试验尤其适用。
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
使用方法:
一:以tRNA粗提液(BTN70904A)为材料,酚法制备tRNA精提液(BTN70904B)
1.在1倍体积的tRNA粗提液中加入一倍体积的自备Tris饱和酚,振荡混匀后12000~15000g离心3分钟得上清。
2.在上清中再加入一倍体积的自备Tris饱和酚和0.2倍体积自备的*仿,振荡混匀后12000~15000g离心3分钟得上清。
3. 重复此步直到酚相和水相之间没有白膜出现。一般需要2-4次抽提。
4.在上清中加入0.1倍体积的自备3M NaAc(pH5.2)和2倍体积的自备无水乙醇,振荡混匀。
5. 12000~15000g离心15分钟以上,小心移弃上清。
6. 用1mL自备 75%乙醇洗一次(即加入1mL 75%乙醇,振荡混匀后12000~15000g离心5分钟,小心移弃上清)。
7. 短暂离心数秒,小心移弃残留液体,所得沉淀即是精提的酵母tRNA,可以溶解在自备的DEPC水中,UV测定其浓度,然后直接用于各种分子生物学实验。
注意:tRNA比较短,又是单链,所以电泳时结合EB等染料的能力很弱,测定其浓度时最好不要使用电泳比较法,而要使用分光光度法。
注意:此法得率较高,但缺点是不能去除部分多糖污染,因为多糖也能在醇沉淀时沉淀下来。如果最后得到的溶液带颜色,则需要用本公司柱式RNAadsorp精提,详细过程见该产品使用说明书。
二:tRNA精提液(BTN70904B)作为核酸助沉剂
1.在核酸(DNA或/和RNA)溶液中,加入适当浓度的盐离子,盐离子不同其终浓度也不相同,具体如下:
| 盐 | 终浓度 |
| NH4OAc(醋酸铵) | 0.5M |
| NaCl(*化*) | 0.25M |
| NaOAc(醋酸*) | 0.3M |
2. 加入本产品使其终浓度为20μg/mL,混合均匀。
3. 加入两倍体积的乙醇,混合均匀。
4. 冰上放置15分钟。
5. 12000~15000g离心15分钟以上,小心移弃上清。
6. 用1mL 75%乙醇洗一次(即加入1mL 75%乙醇,振荡混匀后12000~15000g离心5分钟,小心移弃上清)。
7. 短暂离心数秒,小心移弃残留液体。
8. 将沉淀溶于适当缓冲液中待用。
注:由于tRNA是多聚核苷酸激酶和末端转移酶的底物,因此如果回收的DNA或RNA要用于此类反应,就不能使用tRNA作为助沉剂。如果回收的RNA要用于RT-PCR,使用tRNA可能会对反应的特异性产生干扰。
三:tRNA精提液(BTN70904B)作为杂交封堵剂
本产品可以作为原位杂交、Northern杂交和RNA斑点杂交的封堵剂,也可以作为Southern杂交和DNA 斑点杂交的封堵剂,但不适于作为菌斑杂交。其在杂交液或预杂交液中的终浓度为100μg/mL。
如果使用RNA探针,最好使用本产品做封堵剂,以保护RNA探针。
我公司的酵母tRNA溶液(精提)厂家,性价比高,货期短,送货上门,欢迎您来电咨询购买,另外,我公司还生产供应销*(代"售")下列产品:
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酵母tRNA溶液(精提)厂家关键词:Yeast tRNA Solution,酵母tRNA溶液,BTN70904B,酵母tRNA溶液(精提)
·环孢霉素A
编号:BTN120687
英文名称:Cyclosporin A Solution
规格:1mL
本产品为浓度为10mg/mL的环孢霉素A溶液。环孢霉素A(Antibiotic S 7481F1;环孢多肽A ;环孢灵;山地明),分子式: C62H111N11O12 ,分子量:1202.61 ,CAS号: 59865-13-3,环孢霉素A是由11个*基酸组成的环状多肽,它的第1、2、3、11位*基酸残基上可形成亲水性免疫抑制活性位点。
储存条件:低温运输,-20℃避光保存,有效期6个月。
·生物素标记UTP溶液(Biotin-16-UTP )
编号:BTN151203
英文名称:Biotin-dUTP Solution
规格:25μL
本产品为浓度为10mg/mL的环孢霉素A溶液。环孢霉素A(Antibiotic S 7481F1;环孢多肽A ;环孢灵;山地明),分子式: C62H111N11O12 ,分子量:1202.61 ,CAS号: 59865-13-3,环孢霉素A是由11个*基酸组成的环状多肽,它的第1、2、3、11位*基酸残基上可形成亲水性免疫抑制活性位点。
储存条件:低温运输,-20℃避光保存,有效期6个月。
·TCEP盐*(代"酸")膦
编号:BTN131055
英文名称:TCEP·HCl
规格:1g
本产品全名是Tris[2-carboxyethyl]phosphine hydrochloride),中文名是Tris[2-羧乙基]盐*(代"酸")膦,它是高效、水溶性、无味的还原剂,其特点是选择性并彻底地还原最稳定的、水溶性的烷基二硫键。在室温、pH5.0的条件下,在五分钟内高效地还原。水溶性为310克/升。抵抗空气氧化;非挥发性并且对于蛋白中的其它基团无反应活性。
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
·RNAse-free水
编号:BTN80403
英文名称:RNase-free Water
规格:1mL
本产品就是DEPC处理过的水,但是经过RNase-free质检,所以没有RNase污染。可以用于与RNA相关的实验。
储存条件:常温运输及保存、有效期一年。
·非冻型血液DNA保存液
编号:BTN60910
英文名称:DNAhold Blood RNA non-freezing preservation
规格:250mL
本品是在室温条件下长期保存用于DNA提取的血液样品的保存液,它通过裂解细胞并高效抑制DNase的活性而达到长期保证DNA分子的完整性。
产品特点:
1. 保存时间长,可常温保存血液DNA 长达六个月,尤其适合于野外血液样品采集。
2. DNA 完整性好,纯化后长度在20-50 Kb之间。
3. DNA 无化学修饰,提得的DNA可用于酶切、电泳、Southern杂交和PCR等分子生物学实验。
4.适用于各种动物血液(包括禽类血液)。
5. 安全可靠,本产品无毒无害。
6. 使用简单,直接把新鲜的血液样品与本产品混合即可。
储存条件:室温运输及保存,有效期两年。
使用方法:
一: 哺乳动物血液(包括人血液)
1. 将抗凝血(1-10mL)加入到适当容量的塑料离心管中。
2. 加入等体积的血液DNAhold,充分振荡混合均匀。
3. 常温闭光保存直到使用。
4. 提取DNA时,可以取出部分液体,用自备的蛋白酶K(终浓度为0.1mg/mL)37℃处理过夜,然后再用经典的酚/*仿抽提+乙醇沉淀方法得到DNA。
二: 禽类血液
由于禽类血液有核细胞量远高于哺乳动物,血液的使用量很少,一般只有哺乳动物血液用量的1/100 到1/1000,所以需先用等体积的水将血液DNAhold稀释,然后直接将禽类血液加入。其余操作同上。
酵母tRNA溶液(精提)厂家关键词:Yeast tRNA Solution,酵母tRNA溶液,BTN70904B,酵母tRNA溶液(精提)
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文献和实验: 蛋白胨 12g 酵母提取物 24g 甘油 4ml 各组分溶解后高压灭菌。冷却到60℃,再加100ml灭菌的170mmol/L KH2PO4/0.72 mol/L K2HPO4的溶液(2.31g的KH2PO4和12.54gK2HPO4溶在足量的水中,使终体积为100ml。高压灭菌或用0.22um的滤膜
摘要 随着分子生物学的发展,不论对酶分子本身作用机制的研究以及其他研究,越来越需要纯度很高的酶制剂,这就要求我们熟悉酶提纯的一般操作及酶的提纯及活力测定等重要的生物实验技术,本次实验主要是提取啤酒酵母中的蔗糖酶并测定其Km。在试验过程中用乙醇分级沉淀法,DEAE-Cellulose柱层析,分子筛层析提取纯化蔗糖酶。在实验过程中,虽然我们很努力,但由于我们对实验的程序不熟悉,因此在实验的一些过程中有一些明显的操作失误,使得实验的最后测定结果与理论值有一定出入。 关键词 蔗糖酶 透析
的要求不是十分严格,但是通常小片段模板DNA的扩增效率要高于大分子。因此,建议在PCR反应前使用机械剪切或者限制性内切酶消化基因组DNA以提高产量。(五) 适宜的模板量理论上PCR反应的最佳工作条件需要目标靶序列的单一拷贝作为模板,然而实际工作中常常在反应体系中存在数千拷贝的目标DNA。在哺乳动物基因组,通常每次PCR最多取1?g的基因组DNA作为模板,而这已含有多达3×105常染色体基因的拷贝。而对于简单得多的酵母、细菌及质粒基因组,每次反应的模板最大加入量分别为10ng,1ng和1pg。二
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