动植物膜蛋白微量制备试剂盒北京价格

动植物膜蛋白微量制备试剂盒北京价格

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  • ¥120 - 2220
  • 百奥莱博
  • BTN91204-NJF
  • 北京
  • 2025年07月14日
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      864

    • 英文名

      Animal-Plant Membrane Protein Miniprep Kit

    • 保质期

      一年

    • 供应商

      北京百奥莱博科技有限公司

    • 保存条件

      2~8℃

    特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

    百奥莱博专业生产销*(代"售")动植物膜蛋白微量制备试剂盒北京价格,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。


    名称:动植物膜蛋白微量制备试剂盒北京价格
    英文名:Animal-Plant Membrane Protein Miniprep Kit
    产地:国产|进口
    品牌:百奥莱博
    编号:BTN91204
    规格:50次
    细胞膜蛋白质参与了很多重要的细胞活动,根据它们与膜结合的位置一般分为两种,一种是附着在细胞膜上,另一类是嵌入到细胞膜中间。附着型膜蛋白疏水性较弱,比较容易提取和纯化;而嵌入型膜蛋白疏水型很强,所以在水溶液里面很难溶解,非常难以提取和纯化。百奥莱博根据上述特点,经过精心优化的、开发出本产品,专门用于分离纯化这两种膜蛋白。

    产品特点:
    1. 两步法提取,先纯化含膜组分,再分离附着型膜蛋白和嵌合型膜蛋白。
    2. 膜蛋白(附着型+嵌入型)产量高,对肝脏组织而言,其线粒体膜蛋白产率为10μg/mg左右,过氧化物酶体为1μg/mg左右,内质网为25-30μg/mg。
    3. 所得的膜蛋白大部分具有生物活性,可用于活性研究。
    4.可用动物、植物培养细胞和实体细胞为材料,也可用预先纯化的含膜组分或细胞器(如线粒体、叶绿体、内质网、过氧化物酶体)为材料(本试剂盒不含纯化细胞器的试剂)。
    5. 本方法重复性好。
    6. 本试剂盒足够50次微量提取,分A型和B型两种。A型用于附着型膜蛋白,B型用于嵌合型膜蛋白和附着型膜蛋白。

    试剂盒组成:

     
    成分 A型 B型
    溶液A 100ml 100ml
    溶液B 10ml 10ml
    溶液C 50ml 100ml
    说明书 1份 1份


    储存条件:常温运输及保存,有效期一年。

    使用方法:
    1. 对培养细胞:收集1×107个培养细胞(动物细胞、植物细胞),用20mL自备的冰浴的PBS 洗涤三次,每次洗涤后需要4℃下1000 g离心2分钟,然后小心弃上清。对实体组织:由于各种动植物的各种实体组织的属性差别太大,故本手册的纯化膜组分的操作步骤(第1-7 步)不一定完全适合,用户需要自行优化以纯化含膜组分或含膜的细胞器(如细胞质膜、内质网、线粒体、叶绿体等),再将含膜组分或细胞器沉淀直接用于第8 步的膜蛋白提取。
    2. 将洗涤后的细胞沉淀重悬在2mL溶液A中,冰上静置10分钟。注意:膜蛋白有膜的保护,在纯化过程中对蛋白酶的降解没有胞浆蛋白敏感,一般可以不加蛋白酶抑制剂。但如果纯化的膜蛋白的确有降解的话,可以在溶液A中加入自备的蛋白酶抑制剂混合物。
    3.转移到容积为2mL的Dounce 玻璃匀浆器上下匀浆20-50次(具体次数取决于细胞种类,293T细胞一般需要20次左右,而MEF细胞一般需要50次左右。最好用样品先进行预实验以摸索最佳匀浆次数,最佳匀浆次数时在显微镜下能看见细胞破裂但细胞核完整)。
    4. 将匀浆液转移到15或50mL塑料管中,加入相当于匀浆液体积1/10的溶液B,其间可以轻柔颠倒混匀3-5次,留少量样品作为对照1(匀浆液)。
    5. 4℃ 2500rpm离心20分钟,沉淀为细胞核,上清为胞浆和膜成分,留少量样品作为对照2(胞浆和膜成分)。
    6. 将上清液用Beckman Optima 台式超速离心机100,000 g 4℃离心60分钟。也可以使用其他冷冻超速离心机,但离心力应该为100,000g,否则有可能得不到膜成分沉淀。
    7.小心转移上清(胞浆部分)并留少量样品作为对照3(胞浆)。
    8. 将沉淀(含膜组分)重悬于1mL 冰浴的溶液C中后,冰上静置30分钟,留少量样品作为对照4(膜成分)。本成分电泳前,需要先用自备的TCA沉淀(TCA 终浓度为10%),再用冰冷的丙*(代"酮")洗涤两次后再溶解在1×上样液中待用。对照1-3 号不需要这样的预处理。
    9. 用Beckman Optima 台式超速离心机100,000g 4℃离心60分钟。也可以使用其他冷冻超速离心机,但离心力应该一致,否则有可能得不到沉淀。
    10. 如果需要附着型膜蛋白,则取上清(含附着型膜蛋白)弃沉淀(含膜和其中的嵌合型膜蛋白)。上清可以放-20℃长期保存,如果需要电泳,需要先用自备的TCA沉淀(TCA 终浓度为10%),再用冰冷的丙*(代"酮")洗涤两次后再溶解在1×上样液中与对照1-4 号一起上样电泳。
    11. 如果需要嵌合型膜蛋白,则取出上清(含附着型膜蛋白)并留少量样品作为附着型膜蛋白样品,然后再用1mL 冰浴的溶液C重悬沉淀,然后100,000g 4℃离心60分钟,去掉上清(上清含残留的附着型膜蛋白,可以留样作为洗涤后的附着型膜蛋白样品)。沉淀含膜和其中的嵌合型膜蛋白。如果需要测定膜蛋白的浓度,则将其溶解在自备的0.5 M NaOH溶液。

    动植物膜蛋白微量制备试剂盒北京价格正在火爆热销,除此之外,为您推荐下别热销产品:

    ·生物素化的蛋白G
    编号:BTN131098
    英文名称:Biotin-Protein G
    规格:0.5mg
    本产品为生物素标记的蛋白G,可用于生物素化二抗的替代物。可以检测或定位位于细胞表面或组织中免疫球蛋白。

    储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。

    ·核酸清除剂
    编号:BTN81216
    英文名称:Nucleic Acid Scavenger
    规格:1.5mL
    本产品用于去除蛋白样品中的核酸污染。蛋白双向电泳的关键是制备好的样品,其中包括核酸的清除,因为核酸能与蛋白质结合,影响聚焦。同时,核酸的分子量大,容易堵塞凝胶,造成条带拖尾。此外,如果使用银染的方法检测蛋白质,污染的核酸也会被染色,为此我司开发了本产品。

    产品特点:
    1. 使用简单,加入样品中简单保温即可。
    2. 效率高,10分钟内可以清除核酸(DNA和RNA)对蛋白质电泳的干扰。
    3.基于酶学消化,所以会引入DNase和RNase。

    储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。

    使用方法:
    1.在样品中加入0.1倍体积的本产品,轻柔混匀。
    2.在冰上保温10-30分钟,使核酸降解成单核苷酸或寡核苷酸。

    注意事项:
    这两种酶也有可能在双向电泳图谱呈现蛋白斑点。用超离心方法也能除去核酸,但也可能除去大片分子质量的蛋白质,在低离子强度时,带负电的核酸和带正电的蛋白质会形成复合物,所以用高pH和高离子强度的溶液能减少这种反应,单最后还必需去盐。


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    ·即用型蓝白T载体D型(无RNA启动子,有MCS)
    编号:BTN120514
    英文名称:Instant Blue-White Vector T,Type D
    规格:20次
    本产品是用Xcm I酶切线性化的DNA片段,其两个末端的5´都有一个突出的T,可以用于快速克隆具有加尾活性的耐热酶(如Taq DNA聚合酶)扩增得到的PCR片段。

    产品特点:
    1. 由于是通过酶切制备,所以载体两端的带T率为100%,远高于用Taq DNA聚合酶和TdT末端转移酶在平末端载体加尾得到的T载体。
    2. 克隆的阳性率一般在90%以上,缩短了筛选过程。
    3. 插入位点两侧有多克隆(CMS)位点,便于对克隆的PCR片段进行近一步的分析。
    4. 来源于pUC19质粒,两侧无RNA聚合酶启动子。
    5.可以使用pUC/M13 Forward和Reverse测序引物测定插入片段的序列。
    6. T克隆位点位于β-半乳糖苷酶的α 肽编码区内,可以进行蓝白斑筛选。
    7.含有丝状噬菌体f1 复制起始子,可以制备单链DNA。

    产品组成:
    组分 规格
    即用型蓝白T载体D型(10ng/μL) 60μl
    阳性对照(35ng/μl) 30μl


    储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期两年。

    质粒图谱
    即用型蓝白T载体D型(无RNA启动子,有MCS)质粒图谱
    多克隆位点
    即用型蓝白T载体D型(无RNA启动子,有MCS)多克隆位点


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    抑肽酶溶液(Aprotinin,2mg/ml)   1ml
    CYB162022 兔抗猴IgG(抗血清) 0.5ml
    F030405 胶体金标记山羊抗小鼠IgG抗体 Goat Anti-Mouse IgG*GOLD
    铋试剂Ⅰ 3-Isocyanatopropyltrimethoxysilane 1072-71-5
    D-对羟基*甘*酸 Complex amino acid 22818-40-2
    酒石酸泰乐菌素 PEPC 74610-55-2
    100bp DNA ladder(100-1500bp) 100次
    11081-40-6 葡聚糖凝胶G-15 Sephadex G-15 medium
    ARB11367 人前列腺分泌蛋白94(PSP94)Elisa方法检测 Human prostate secretory protein94,psp94 ELISA KIT
    E0603 脱纤维裂解山羊血(无菌) 100ml/500ml
    ARB12142 大鼠白三烯B4(LTB4)代做ELISA实验 Rat leukotriene b4,LT-b4 ELISA KIT
    HC0102 25mm针头式滤器
    F040201 人类丙型肝炎病毒重组抗原 HCV
    ARB14126 人可溶性OX40L(sOX40L)含量测试 
    丙基红指示剂   100ml
    间羟基*乙*(代"酸") LY-237216 621-37-4
    ARB12570 大鼠脑*素/脑*尿肽(BNP)elisa检测 Rat brain natriuretic Peptide,bnp ELISA KIT
    86-87-3 NAA α*乙酸

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